氯化琥珀膽堿的分析檢測綜述

彭慧飛,姜兆林,陳 陽,李 棟,王慶威

(1.中國刑警學院 法化系, 遼寧 沈陽 110000;2.青藏鐵路公安局刑事技術處 ，青海 西寧 810000))

氯化琥珀膽堿(又名司可林，SUX)屬于國家管制的B級有機劇毒藥品，主要作為獸藥或者手術麻醉誘導劑，其注射液為無色或者無色透明狀的粘液[1]，臨床上主要用于氣管插管和麻醉手術中使肌肉保持松弛狀態，代謝速度快，半衰期為2～4min。[2]但近年不法分子使用氯化琥珀膽堿制作弩箭，用于盜竊家犬，也有致人死亡事故發生，對于這類案件的偵破，如何檢測氯化琥珀膽堿固定犯罪證據，是此類案件偵破的關鍵[3]。

本文主要介紹已發表的生物體內的氯化琥珀膽堿的檢測方法。目前，SUX 檢測的方法主要有氣相色譜-質譜聯用法、高效液相色譜法、酶法電極法、離子交換分離結合電導檢測的方法。

1 液相色譜質譜聯

張云峰[4]等人精確稱取氯化琥珀膽堿標準品加乙腈定容，配成1mg/mL的標準溶液，存放于-20℃冰箱中冷凍，取空白血0. 5mL，加入3mL氨水調節pH值=8，渦旋混勻。使用Oasis WCX柱(3cc/60mg)柱依次甲醇，氨水活化。取血液樣品上清液過柱，用離子水、甲醇淋洗雜質;然后使用含甲酸∶水∶乙腈( 1∶50∶49，v /v) 溶液洗脫;洗脫液用0.22μm 微孔濾膜過濾，用液質聯用檢測。通過一系列的試驗確定色譜最優條件為，色譜柱：以20mmol/L甲酸銨緩沖液( 含0.2% 甲酸) -乙腈作為流動相梯度洗脫，質譜為ESI，氯化琥珀膽堿的分子量為290，生成雙電荷的母離子為145.1，選擇145.1作為檢測的定性離子對，其中115.6為定量離子。該方法也對空白干擾進行檢測，排除了血液中內源性物質對氯化琥珀膽堿測定沒有干擾。對液質聯用的基質效應進行考察，發現數值分別符合規范。證明此方法不存在基質效應，可以用于檢測血液中的氯化琥珀膽堿，但是有文獻報道，對于死亡之后的生物體血液，胃內容物無法檢測出琥珀氯化膽堿。

宣宇[5]等人同樣采用OasisR WCX 固相萃取柱預處理檢測樣品，采用液質檢測，均檢出琥珀膽堿，獲取良好的線性范圍，檢出限，精密度。宣宇等人同時論證了氯化琥珀膽堿的分解問題，將標準樣品存放于塑料瓶，玻璃瓶內，10日內分別檢測，證明在塑料容器中存儲穩定，而在玻璃容器中其降解幾乎達90%，證明玻璃種的SiO2容易引起對琥珀膽堿的吸附并使其降解，對于氯化琥珀膽堿贏存儲于塑料瓶內,注意防止愛檢測中因保管不當造成陰性結果。

周興旺[6]等人采取市場上毒狗肉進行檢測，用碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖鹽震蕩超聲提取狗肉的氯化琥珀膽堿，過WCX固相萃取柱凈化，液相色譜三重四極桿串聯質譜定性、定量，證明線性關系，檢出線均良好，適合快速檢測市場上的毒狗肉。此外，周興旺等人通過多組平行試驗，證明對WCX固相萃取柱進行活化后，上標準溶液25ng時，最佳的洗脫液為甲酸-乙腈-水溶液(1∶8∶1)體積為2.0mL。

李 祎[7]等人采用高效液相色譜 -飛行時間質譜，采取2mL血液加乙腈沉淀蛋白質后進樣分析，這樣樣品前處理簡單，僅需5min。此方法同樣獲取了良好的實驗結果。此方法具有良好的線性關系，檢出限低，重現性好，準確可靠，也排除了生物質干擾，但是相對前處理復雜，操作復雜。

2 離子色譜法

陳祥國[8]等采取死者針孔部位的肌肉，加入高氯酸酸化和去離子水，超聲5min后，過濾，取濾液檢測，采用抑制性陽離子交換色譜法，手動進樣:25μL ，采取的檢測方式為:電導檢測。在死者組織中檢測出氯化琥珀膽堿。此方法能滿足快速的定性需要。此方法具有分析時間快，靈敏度高，樣品前處理相對簡單等優點。但是需要考慮常見生物質中的陽離子，在檢測之前需要配置標準溶液，對于個案，在檢測前需要配制標準溶液和設置儀器條件，相對繁瑣。

3 紅外光譜的方法

喬文濤[9]等人取現場的飛鏢內液體0.1 mL， 存放于蒸發皿中揮干，以KBr壓片法制備試樣，譜庫檢索比對發現與氯化琥珀膽堿相似度達96%以上，可以達到定性目的，此方法可以作為公安理化鑒定的有效輔助手段。據查此法源于藥典對純品的檢測。

胡浩浪，裴茂清，施文兵[10]等人，利用傅立葉變換紅外光譜對“飛鏢”上的白色結晶性粉末進行紅外光譜儀檢測，與標準圖譜對比，與氯化琥珀膽堿的匹配率達90.65%，確定成分為氯化琥珀膽堿。

此法只適用于對純品的檢驗和定性，方法簡單易，準確定性也相對高，效果較好，快速。可以作為定性或者良好的輔助手段，但是不適用于生物檢材。

4 酶電極法

孫士青[11]等人通過設計一個精密的檢測電極——膽堿氧化酶電極，以固定化膽堿氧化(EC5896)結合H2O2電極構成電流型酶電極生物傳感分析儀,利用酶的專一性檢測氯化琥珀膽堿。同時通過對比試驗排除了乙二胺四乙酸二鈉、D-葡萄糖等物質的干擾，最優響應pH值為7.8，故采取硼酸作為緩沖溶液，同時也論證了氯化鈉與磷酸氫二鈉對電極活性具有抑制作用。

此類方法利用專一性高、固定化酶的穩定性，靈敏性高，能滿足注射液的快速定性、定量分析。但僅僅主要針對氯化琥珀膽堿注射劑進行分析，是否適用于生物檢材，文中暫未論述，個人感覺此方法專業強，無法滿足公安工作需要。

5 薄層色譜法

武向鋒[12]等人用薄層色譜法檢查注射液中的氯化琥珀膽堿含量。首先利用微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉制作薄層的玻板,晾干后,活化。選取正丁醇-水-無水甲酸(67∶25∶20)作為展開劑，噴以稀碘化鉍鉀試液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。通過這種方法對琥珀膽堿注射液及其雜質、分解產物做了檢測。通過點樣顯色確定氯化膽堿的最低檢出量為0.2μg。

此方法需要制作薄層色譜，而且相關試劑種類繁雜，操作麻煩，而且僅針對注射劑這類比較純的純品做檢測，不適用公安理化鑒定中。

總結，針對目前的公安機關的儀器條件，推薦使用液相色譜聯用質譜檢測生物檢材中氯化琥珀膽堿，該方法成熟，報道文獻數目最多，同時達到定性定量檢測目的，不過諸如離子色譜檢測，紅外檢測也都是良好的輔助檢測手段。目前的報道主要針對肌肉組織檢測，有文獻報道，根據氯化琥珀膽堿的代謝情況，在生物尸體在心、肝、脾、腎和膈肌中均可檢測到琥珀膽堿，其中腎臟中的藥物濃度始終最高，對于肌肉組織未檢出的情況下，可以對腎臟進行檢測[13]。

[1] 冒理雄，葉光華，范琰琰，等.注射氯化琥珀膽堿致人死亡1 例[J].中國法醫學雜志, 2014,29(03)： 272-273.

[2] 張延波，鄭偉明，羅郁風，等.注射氯化琥珀膽堿殺人后自殺1 例[J].法醫學雜志,2016,32(1):75-76.

[3] 方俊杰，秦 明，韓志杰，等.氯化琥珀膽堿弩箭殺人的法醫學鑒定3例[J].刑事技術,2013(3):64-65.

[4] 張云峰，趙 森，王 炯，等.超高效液相色譜- 質譜法分析人全血中的氯化琥珀膽堿[J]．中國法醫學雜志，2013(6):475-477．

[5] 宣 宇，孫 楠，傅得鋒，等.液相色譜質譜聯用檢測血液和尿液中的琥珀膽堿及對標樣的穩定性評價[J].分析試驗室，2011,30(8):112-114.

[6] 周興旺,康紹英,張繼紅,等.液相色譜串聯質譜測定狗肉中的氯化琥珀膽堿[J].食品與機械，2015,31(6 ):102-104.

[7] 李 祎，舒 科，申秀華，等.高效液相色譜 -飛行時間質譜用于琥珀膽堿的快速檢測[J].刑事技術,2016,41(2):120-122.

[8] 陳祥國，王淑真，呂紀忠，等.離子色譜法分析生物檢材中的氯化琥珀膽堿[J]．刑事技術，2010(6):17-18．

[9] 喬文濤,黃彬晏,黃克建，等.離子色譜法結合紅外光譜法檢驗氯化琥珀膽堿[J].化學分析計量,2014(S1):38-40.

[10] 胡浩浪,裴茂清,施文兵.氯化琥珀膽堿致人死亡一例[J].廣東公安科技,2014(1):78-79.

[11] 孫士青，王 寧，葛淑蘭.酶電極法測定氯化琥珀膽堿注射液氯化膽堿及氯化琥珀膽堿含量[J]．中國藥學雜志，1997，32(10):609-611.

[12] 武向鋒,靳守東,沈 娟,等.氯化琥珀膽堿注射液中有關物質的檢查[J]. 解放軍藥學學報，2009,25(4):355-357.

[13] 竺 凌，聞 俊，周婷婷，等.琥珀膽堿的體內過程及其法醫毒物分析研究[J].藥物分析雜志，2015，35(5):849-855.