操國(guó)景,張振新,畢研亮,曹 杰,齊長(zhǎng)明
(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京 海淀100193;2.北京三元綠荷奶牛養(yǎng)殖中心,北京大興100076)
乳房炎是成年奶牛最常見的一種疾病,發(fā)病率可達(dá)30%(Gardner等,1990),奶牛生產(chǎn)單位每年因乳房炎導(dǎo)致的淘汰率約10%,占牛群總淘汰率的1/2左右[1]。乳房炎可以降低奶牛產(chǎn)奶量(下降10%~15%)、增加醫(yī)療費(fèi)用支出,從而造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失;此外,乳房炎還會(huì)降低牛奶品質(zhì)、造成牛奶的公共衛(wèi)生安全隱患[1-3]。
臨床型乳房炎是指患病奶牛乳腺和/或乳汁存在肉眼可見異常的病例,最常見于泌乳期,特別是泌乳早期,但也可發(fā)生于非泌乳的乳腺[1,4-5]。發(fā)病乳腺可表現(xiàn)為腫脹、發(fā)熱、疼痛和發(fā)硬;乳汁可能形成凝塊,呈現(xiàn)漿液性,甚至呈水樣,有時(shí)帶有血液。急性病例還表現(xiàn)出全身癥狀,包括發(fā)熱、厭食等[1,4]。
目前國(guó)內(nèi)外奶牛場(chǎng)主要采取抗生素療法治療臨床型乳房炎,通過乳房?jī)?nèi)注射藥物和/或全身注射藥物[1-2,8]。抗生素療法雖然可以起到有效抗菌治療、提高奶質(zhì)及產(chǎn)奶量等作用[1];但同時(shí)也具有很多缺點(diǎn),如耐藥性菌株的產(chǎn)生,使抗生素治療效果不確實(shí),牛奶中抗生素殘留會(huì)危害消費(fèi)者的身體健康,造成食品公共衛(wèi)生安全隱患,抗生素奶的廢棄以及大量醫(yī)療費(fèi)用造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2-3,11]。
生物氧(醫(yī)用臭氧)是指純氧氣和純臭氧的混合物,濃度范圍為1~ 100 μ g/mL,醫(yī)用臭氧可由氧氣通過生物氧發(fā)生器(如赫爾曼生物氧化治療儀)生成。主要具有以下特性:(1)能殺滅微生物(殺滅細(xì)菌、真菌和抑制病毒)。(2)作為親電分子的選擇反應(yīng)性(pH≤7時(shí))。(3)氧化作用和活化氧的形成[12]。其治病原理主要在于臭氧分子的不穩(wěn)定性,能分解產(chǎn)生氧化能力極強(qiáng)的單原子氧(O)和羥基(OH),對(duì)細(xì)菌、真菌、病毒具有強(qiáng)烈的殺滅作用,甚至可以破壞肉毒桿菌毒素[12-13]。此外,臭氧還可以使紅細(xì)胞發(fā)生形態(tài)學(xué)上的變化,提高紅細(xì)胞的柔韌性,改善血液流動(dòng)性;降低血管阻力,促進(jìn)局部血液循環(huán)[12]。
醫(yī)用臭氧局部應(yīng)用時(shí),主要利用其殺滅微生物、強(qiáng)氧化性、促進(jìn)傷口愈合的特性。全身應(yīng)用時(shí)主要是激活細(xì)胞代謝的能力,對(duì)紅細(xì)胞和免疫活性細(xì)胞有激活作用[12]。
生物氧療法在人醫(yī)已有130多年的歷史,目前在人醫(yī)臨床的應(yīng)用范圍相當(dāng)廣泛,如治療結(jié)腸炎、各種皮膚病、病毒性肝炎、椎間盤突出等疾病[12-13]。在國(guó)外該方法也已被廣泛應(yīng)用于馬、牛等動(dòng)物疾病的治療,并取得了豐富的成功經(jīng)驗(yàn)[14-15]。然而,國(guó)內(nèi)獸醫(yī)臨床還從未使用過生物氧療法。據(jù)國(guó)外相關(guān)報(bào)道顯示,生物氧療法在治療奶牛乳房炎中具有很多優(yōu)勢(shì)[14-15]。本試驗(yàn)旨在評(píng)價(jià)生物氧療法在奶牛乳房炎治療中的效果與應(yīng)用前景。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及分組 于北京三元綠荷奶牛養(yǎng)殖中心長(zhǎng)陽(yáng)二場(chǎng)(成乳牛約600頭),依據(jù)臨床癥狀(乳腺出現(xiàn)紅、腫、熱、痛,乳汁形成凝塊或顏色異常等癥狀),選取臨床型乳房炎患牛30頭,將其分為兩組:其中15頭為試驗(yàn)組,采取抗生素治療結(jié)合生物氧療法;另外15頭為對(duì)照組,采取抗生素療法。
1.2 試驗(yàn)儀器 德國(guó)赫爾曼(HERMAN)生物氧化治療儀(由北京達(dá)威德科技發(fā)展有限公司提供)。
1.3 操作方法
1.3.1 病原菌分離培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn) 每組選取臨床新發(fā)病患牛各5頭,按操作規(guī)范采集患病乳區(qū)奶樣,進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)、染色鏡檢以及藥敏試驗(yàn)。
本次藥敏試驗(yàn)選用青霉素、鏈霉素、慶大霉素、林可霉素、四環(huán)素、頭孢曲松等15種臨床常見抗生素進(jìn)行。
1.3.2 治療 每日上午8:00至12:00,待試驗(yàn)患牛擠奶結(jié)束后,牽入六柱欄內(nèi)或移動(dòng)式保定架上,經(jīng)保定后,對(duì)患牛全身狀態(tài)及體溫、呼吸、心跳等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)患病乳區(qū)病情變化情況進(jìn)行詳細(xì)檢查并記錄。然后對(duì)患病乳區(qū)乳頭進(jìn)行消毒處理(先用臭氧水清洗,然后用75%酒精棉擦拭),對(duì)擠奶不凈或排乳不暢者,可用通乳針放奶。處理完畢后對(duì)患病乳區(qū)進(jìn)行治療,方法如下。
抗生素療法:根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,選用鹽酸林可霉素(300 mg/10mL·支,3支/患區(qū))或硫酸慶大霉素(0.2 g/5mL·支,5支/患區(qū)),乳頭內(nèi)注射,每日2次,對(duì)有全身癥狀的患牛,結(jié)合全身肌肉注射抗生素進(jìn)行治療,直至臨床治愈。
生物氧療法:使用生物氧化治療儀,按操作說明進(jìn)行。
乳區(qū)內(nèi)注氧療法:使用1次性無菌塑料管連接生物氧化治療儀與乳頭導(dǎo)管,將消毒好的乳頭導(dǎo)管輕柔地插入乳頭管內(nèi)(見圖1),生物氧濃度設(shè)定為10~ 35 μ g/mL(通常為 15~ 20 μ g/mL,根據(jù)病例嚴(yán)重程度可適當(dāng)增減),每個(gè)患病乳區(qū)注入1~2 L(通常1.5 L)的臭氧、氧氣混合氣體。該方法在乳房炎發(fā)作時(shí)即開始應(yīng)用,每天上午進(jìn)行1次,直至臨床治愈。
生物氧大自血療法:利用生物氧化治療儀配套的1次性無菌塑料導(dǎo)管連接好消毒過的20號(hào)針頭,從患牛頸靜脈采集血液約400 mL,收集于含有100 mL 5%氯化鈣抗凝劑的專用輸血瓶中,生物氧濃度設(shè)定為 25~ 40 μ g/mL(通常為 30 ~ 35 μ g/mL),以緩和的圓周運(yùn)動(dòng)將血液-臭氧混合物充分搖晃,待血液變成鮮紅色的含氧血后(約1 min),通過頸靜脈緩慢回輸入機(jī)體,每次1 000~1 500 mL(2~3瓶),隔日1次,共3~4次。

圖1 07245患牛右后乳區(qū)治療第3天,乳區(qū)異常明顯減輕,圖為正在進(jìn)行乳區(qū)內(nèi)注入生物氧(15 μ g/mL,1 L)
采用生物氧療法時(shí),因?yàn)樾枰杉约已约笆褂萌轭^導(dǎo)管插入乳頭管,在進(jìn)行治療操作時(shí),應(yīng)注意以下幾個(gè)方面,以免造成對(duì)奶牛的損傷。
大自血療法時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)抽取血液的量必須和抗凝劑的使用量相匹配,否則存在形成微血栓的危險(xiǎn)。(2)必須使用純凈的臭氧和氧氣混合物,不能混入任何空氣,以免產(chǎn)生有毒的亞硝氣。(3)血液回輸入機(jī)體時(shí),輸血速度必須緩慢,以免引起溶血反應(yīng)。(4)在人醫(yī),生物氧大自血療法禁用于孕婦,因此本試驗(yàn)選用的試驗(yàn)組患牛均為空懷牛。
乳區(qū)注氧療法時(shí)必須注意以下幾點(diǎn):(1)乳頭導(dǎo)管一定要充分消毒,可采取高壓蒸汽滅菌,或使用高濃度臭氧水(例如經(jīng)80 μ g/mL高濃度臭氧充分處理后的自來水)消毒。(2)乳頭導(dǎo)管插入乳頭管前,一定要將乳頭用75%酒精棉擦拭干凈。(3)插入乳頭導(dǎo)管的動(dòng)作要輕柔,以免造成乳頭內(nèi)黏膜損傷,造成愈合減緩甚至病情惡化。
此外,因?yàn)樵囼?yàn)儀器中有氧氣瓶,因此在治療操作時(shí)要注意遠(yuǎn)離火源,以免發(fā)生意外。
1.3.3 試驗(yàn)指標(biāo)監(jiān)測(cè) 本試驗(yàn)主要通過患牛臨床癥狀變化進(jìn)行評(píng)價(jià),每天詳細(xì)記錄患牛精神狀態(tài)、體溫 、呼吸 、心跳 、飲食欲,以及患病乳區(qū)紅 、腫 、熱 、痛等炎癥表現(xiàn),乳房硬度,乳汁顏色以及有無凝塊等指標(biāo)[1-2,6]。療效判定標(biāo)準(zhǔn)如下[2,6]。
治愈:治療后,乳區(qū)紅、腫、熱、痛、堅(jiān)硬等癥狀消失,乳汁無明顯異常,患牛體溫、飲食欲恢復(fù)正常;無效:治療后,乳區(qū)、乳汁無明顯改善,甚至病情加劇。
2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)分離培養(yǎng)結(jié)果以及染色鏡檢特性,可判定這些病例的主要病菌為鏈球菌屬或腸桿菌屬或二者混合感染。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果以及奶牛場(chǎng)現(xiàn)有藥物情況,選用林可霉素治療鏈球菌性乳房炎,而對(duì)腸桿菌性乳房炎則采用慶大霉素治療,或者兩者聯(lián)合使用。
2.2 治療結(jié)果 試驗(yàn)組患牛15頭,患病乳區(qū)18個(gè),經(jīng)治療,臨床治愈患牛13頭,治愈乳區(qū)15個(gè),另外兩頭患牛原發(fā)病為乳頭損傷,治療無效后淘汰。故試驗(yàn)組治愈率為86.67%(13/15),乳區(qū)治愈率為83.33%(15/18),治療所用平均時(shí)間為7.5 d(4~11 d)。對(duì)照組患牛15頭,患病乳區(qū)19個(gè),患牛臨床治愈率為73.33%(11/15),乳區(qū)治愈率為 68.42%(13/19),治療所用平均時(shí)間為12 d(6~28 d)(詳見圖2)。

此外,試驗(yàn)組病例平均治愈時(shí)間較對(duì)照組縮短4.5 d,為奶牛場(chǎng)節(jié)省了治療費(fèi)用減少了抗生素廢棄奶所造成的經(jīng)濟(jì)損失,據(jù)計(jì)算每頭患??梢怨?jié)省約500元人民幣。
3.1 隨著人們生活水平的提高,對(duì)奶制品的要求也不斷提高,因此開發(fā)無抗生素殘留,對(duì)人體及環(huán)境無害的乳房炎治療方法勢(shì)在必行。
3.2 鑒于生物氧療法在國(guó)內(nèi)獸醫(yī)領(lǐng)域尚未應(yīng)用,奶牛場(chǎng)不同意單獨(dú)使用生物氧療法進(jìn)行治療,而奶牛乳房炎絕大多數(shù)是由病原微生物引起,目前國(guó)內(nèi)外普遍采用抗生素治療,故本試驗(yàn)保守地采用生物氧結(jié)合抗生素對(duì)乳房炎進(jìn)行治療,以判斷生物氧療法在治療奶牛乳房炎時(shí)的輔助效果。
3.3 生物氧在水中的作用產(chǎn)物(單原子氧和羥基)具有無毒無害和無殘留等特點(diǎn),用于治療奶牛乳房炎時(shí),不存在藥物殘留的問題,因此不會(huì)危害公共衛(wèi)生安全。但由于本次試驗(yàn)在使用生物氧療法的同時(shí)還結(jié)合了抗生素療法,治療過程中的乳汁仍需按抗生素奶處理,這樣就使得生物氧療法的無藥殘的優(yōu)點(diǎn)無法體現(xiàn)。
3.4 從試驗(yàn)結(jié)果可以看出,試驗(yàn)組無論是治愈率還是平均治愈時(shí)間上都具有明顯優(yōu)勢(shì),從而證實(shí)生物氧療法對(duì)治療奶牛乳房炎具有明顯的輔助作用;同時(shí)在所有試驗(yàn)病例中,未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng),因此生物氧療法在輔助治療奶牛乳房炎時(shí)是安全可靠的;此外,生物氧療法使用原料非常簡(jiǎn)單(醫(yī)用氧氣),每罐氧氣能使用很長(zhǎng)時(shí)間,價(jià)格相當(dāng)經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。由此可以證實(shí):生物氧療法對(duì)治療奶牛乳房炎有明顯的輔助療效,同時(shí)也是既安全又經(jīng)濟(jì)的新療法。此外,本方法操作簡(jiǎn)便,因此生物氧療法在治療奶牛乳房炎中具有很大的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用前景。
[1]Andrews A H,Blowey R W,Boyd H,et al.牛病學(xué)-疾病與管理[M].韓博,蘇敬良,吳培福,等主譯.2版.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2006:301-373.
[2]趙月蘭,左玉柱,秦建華,等.不同治療方法對(duì)奶牛臨床型乳房炎的療效觀察[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2008:44(7):53-55.
[3]胡秘華,俞斌.乳房炎治療后牛奶中的抗生素殘留[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,1999:25(5):52.
[4]Cao L T,Wu J Q.Efficacy of nisin in treatment of clinical mastitis in lactating dairy cows[J].Journal of Dairy Science,2007,90:3980-3985.
[5]McDougall S,Parker K I,Heuer C,et al.A review of prevention and control of heifer mastitis via non-antibiotic strategies[J].Veterinary Microbiology,2009,134:177-185.
[6]鐘永曉.銀翹瓜蔞散治療家畜急性乳房炎[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2008,44(1):73.
[7]袁康文,沈留紅,曹隨忠,等.中西藥結(jié)合治療奶牛急性乳房炎[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2008,44(1):72-73.
[8]Daley Furda M J G,Doughe Y R,Coyle P A,et al.Potentiation of Antibiotic Therapy for M astitis by recombinant Bovine Interleukin[J].Journal of Dairy Science,1992,75:3330-3338.
[9]呂淑榮,李瑞斌,李春杰,等.魚腥草注射液治療臨床型乳房炎的效果觀察[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2008,44(6):33.
[10]金忠明,徐敏華,高雪群,等.奶牛乳房炎非抗生素療法[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2009,45(2):81-82.
[11]Stephen C.Nickerson.Control of heifer mastitis:Antimicrobial treatment-An overview[J].Veterinary Microbiology,2009,134:128-135.
[12]Velio Bocci.臭氧治療學(xué)[M].李慶祥,王燕申,主譯.北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2006.
[13]何曉峰,李彥豪.臭氧治療:歷史、現(xiàn)狀與未來[J].中國(guó)介入影像與治療學(xué),2005,2(5):389-391.
[14]Ablondi M,Pogliacomi B.Oxygen-ozone therapy in bovine mastitis.Field experiences[J].Italiana di Buiatria(Italy),2004,36:347-351.
[15]Ogata A,Nagahata H,Ogata A,Intramammary application of ozone therapy to acute clinical mastitis in dairy cows[J].Journal of Veterinary Medical Science,2006,2(7):681-686.