尿碘測定的注意事項及質量控制

(雅安市疾病預防控制中心，四川 雅安 625000)

1 采樣要求

1.1 采樣器具的準備 器具：可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，必須能夠用塞或蓋緊密密封，用前無碘化處理：10%鹽酸浸泡(必要時還可用硫代硫酸鈉溶液泡)，然后用自來水和去離子水沖洗，晾干備用。

1.2 采樣量 推薦50～100mL

1.3 樣品的采集與保存

1.3.1 依據GB/T5750.5～2006

1.3.2 采樣后應盡快送實驗室檢測，不能盡快檢測可4℃冰箱保存，若超過一周需低溫冷凍保存。

2 實驗前準備

2.1 實驗環境 防止碘污染，實驗室環境嚴格避免碘污染，實驗室內不允許常量碘測定或用存放其他碘試劑，實驗室與采血室間也要保持足夠距離，避免碘消毒劑影響。為防止碘污染，實驗前用1%硫代硫酸鈉溶液擦拭桌面。

2.2 儀器試劑

2.2.1 玻璃器皿的清洗 初次使用或長時間不用的玻璃器皿經1+1硝酸 浸泡24h后，先用去離子水沖洗2～3遍，再將這些玻璃器皿用1%硫代酸鈉溶液浸泡12h以上，然后用去離子沖洗干凈，在溫室下晾干備用。所有的玻璃皿不能用鉻酸洗液浸泡，同時還要慎用消毒劑和清洗劑。

2.2.1.1 器皿注意切不可與測定碘鹽的玻璃器皿混用；另外水質衛生檢驗的氨氮納氏比色法、砷的銀鹽比色法使用的試劑含高濃度的碘離子，這些檢驗工作所用的器皿不可與尿碘檢驗的混用，對此還須注意避免這些試劑對光度計比色皿的污染

2.2.1.2 配制試劑所用的氫氧化鈉、氯化鈉較可能碘雜質較高，所以宜選用合適的并留用(專用)；亦有發現某一過硫酸銨固體、三氧化二砷試劑中含較高碘雜質。

2.2.1.3 過硫酸銨的性質不是太穩定，見光容易分解，應該存放在4℃冰箱內；硫酸鈰試劑較易受潮，會影響配制濃度，將試劑放于干燥內或經100℃干燥后配制使用；三氧化二砷有劇毒，剩余的試劑不要隨便廢棄，溶液污染環境；碘標準使用液最好在臨用前配制，以防止低濃度的碘被存放容器吸附引起偏差，存放盡量不要與其他試劑一起存放。

2.2.1.4 試劑的純度要符合測定方法的要求，同批樣品的測定所用試劑必須是同一批號，且最好嚴格按要求一次性配好，而每一次試劑的配制做好由專人負責，盡可能避免配制條件的差異帶來的誤差。

2.2.2 實驗用水：建議使用電阻高于100萬歐姆的去離子水，而蒸餾水需要進行無碘化處理。

2.2.3 器皿校準 刻度吸管、移液管、加樣槍使用前要校準，才能保證結果準確。

3 分析過程的控制

3.1 水浴溫度 30℃，波動范圍正負1℃。

3.2 排管 因為砷鈰反應時褪色反應，碘濃度越高，褪色越快，因此將標準系列溶液按碘濃度由高到低排列，各試劑均按此順序加入。

3.3 取樣 取250ul尿樣最好用刻度吸管吸取，用加樣槍取樣尿液有可能打不干凈，塑料吸頭有時會吸附少許尿液，導致測定結果不準確。

3.4 消化 盡可能使用消解儀中部消化樣品，最好對全部消解儀孔進行溫度檢測，溫度相差大于1℃時應標出不用。

3.4.1 樣品消化時的消化管孔徑大小、管壁薄厚盡可能一致；以減輕少因受熱不均勻而產生的誤差；消解儀消化溫度適中，過高消化樣液損失過多，過低消化不完全；條件不允許時刻采用電熱恒溫鼓風干燥箱進行消化，因為箱體內裝有鼓風系統，樣品消化后消化液的最終體積也非常接近。

3.4.2 因消化過程無終點指示以及消化時間、溫度又批間差異，每批樣品消化要與標準系列及空白試驗同時進行，以減少誤差，提高試驗的標準性。如果兩臺恒溫消解儀同時消化，每臺消解儀應分別設置一套空白盒標準系列。

3.5 (1)加入硫酸鈰銨溶液時，要求準確、快速，加樣槍要求校準。由于硫酸鈰溶液容易附壁，所以加入時不能使硫酸鈰試劑接觸反應管內壁，加后必須立即充分搖勻放回水浴中，在吸取該溶液的時候要防止產生氣泡，以免影響加入量。(2)加入硫酸鈰銨溶液后的砷鈰反應還可在20～35℃之間的某一穩定的室溫(或控溫)條件中可進行；每管加入硫酸鈰銨的時間間隔不需要固定為30s,亦可以是1min，只要時間間隔保持一致即可，如果人手少，每次做樣不要超過80份，加入硫酸鈰銨溶液時間間隔大于30s,不超過1min，因為后面的管子在加硫酸鈰銨溶液時，前面的標準已經到比色時間。

3.6 終點判斷 反應時間以監控碘標準濃度300ug/L管的吸光度達到0.15～0.20時，依順序進行廣度測定[3]。實際操作時過早比色碘標準濃度300ug/L管的吸光度大于0.20，標準曲線相關系數r有可能達不到0.999，過遲比色碘標準濃度300ug/L管的顏色有可能退完，標準曲線做不出來，整個試驗得重做。

3.6.1 建議標準曲線碘標準濃度300ug/L做平行樣，筆者發現25分鐘時要密切注意300ug/L管顏色深淺，過深繼續在水浴反應，當300ug/L管淡黃色拿出來比色，如果吸光度在0.15～0.20時，開始比色；如果300ug/L管的吸光度大于0.20，重新把它放到水浴中繼續反應；如果300ug/L管的吸光度小于0.15，將這管舍去馬上將另一管300ug/L作為第一管開始比色。

3.7 比色 比色時，每管檢測的時間間隔應與加硫酸鈰銨溶液的時間間隔一致。

3.8 當按照尿碘測定方法操作結果出現工作曲線碘空白管的吸光值很小時(例如30℃條件下砷鈰反應30min時碘空白管的測定吸光度<0.7)。先檢查光度計波長是否準確；是否使用了已風化或潮解的過硫酸銨固體試劑；是否配制得的Ce4+溶液濃度偏低；再檢查檢測體系是否存在碘污染，并予以消除。這里的檢測體系包括：所用試劑、水、所用器皿、實驗室環境。

3.9 重視利用國家凍干尿碘標準物進行檢測質量控制，以便發現誤差，采取措施消除誤差。

4 總結

尿碘砷鈰催化分光光度法測定干擾因素很多，實驗前一定要保證環境無碘，所用的器具要進行無碘化處理，所用的試劑和水不得含碘，保持消化溫度100℃，過高過低測得的碘含量都會偏低，每管比色的時間間隔應與加硫酸鈰銨溶液的時間間隔一致，碘標準濃度300ug/L做平行樣，終點判斷在加入硫酸鈰銨25分鐘時密切觀察300ug/L管顏色深淺，以它的吸光度達到0.15～0.20時開始比色，每次實驗要帶內部質控[4]，這樣才能保證檢測結果準確可靠。

[1]李紅梅. 尿碘測定的質量控制— 過硫酸銨消化砷鈰催化分光光度法[J].基層醫學論壇，2009, 13(17) : 1672-1673.

[2] 孫亞維,陳科杰,等. 尿碘檢測實驗室的質量控制分析[J].中國衛生檢驗雜志，2011(4):1016-1016.

[3]中國疾病預防控制中心地方病控制中心 WS/T107-2006尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法[R].地方病學，2008.6.102-104.

[4] 顧儀, 郭威. 尿碘實驗室檢測質量保證的現狀及對策[J].中國公共衛生2001.17(3)：268-268.