眾談各類疫苗的免疫方案及免疫效果評估

本刊編輯/薛惠莉

疫苗免疫已經成為豬場疾病防控的重要手段之一，關于疫苗的選擇、免疫程序的制定以及免疫效果的評估常常困擾著廣大養豬同仁，借助本次主題，我們邀請到了北京中科基金技術有限公司總經理朱連德博士、新疆天康生物股份有限公司制藥事業部全國市場部總經理周緒斌博士、環山集團養豬事業部健康管理部總經理曲向陽博士、廣東省農科院動物衛生研究所蔡汝健老師就相關問題進行探討。

圖1　北京中科基金技術有限公司總經理朱連德博士

圖2　新疆天康生物股份有限公司制藥事業部全國市場部總經理周緒斌博士

圖3　環山集團養豬事業部健康管理部總經理曲向陽博士

圖4　廣東省農科院動物衛生研究所蔡汝健老師

本刊：“預防為主、防治結合”的理念已經深入養豬生產者的心中，在國家和企業的推廣下，疫苗免疫工作已成為國內豬場日常工作內容的“標配”，那么關于疫苗的選擇及免疫程序的制定是基于什么樣的一個標準呢？

朱連德博士：1）判定區域內或本豬場內有沒有疾病病原的存在？有沒有疾病流行的風險？如果有，就應該免疫預防；

2）選擇疫苗。疫苗應安全、有效、使用方便及性價比高；

3）了解豬群疾病感染狀態。豬場生產模式、豬群流動、生物安全措施等；

4）確定免疫目的。免疫控制，還是免疫凈化；

5）制定免疫程序。根據以下6點：①豬群感染節點——發病時間和疾病潛伏期，感染發病率；②免疫途徑；③疫苗免疫后起效時間；④疫苗免疫保護期；⑤疫苗與其他疫苗的干擾；⑥其他疾病對疫苗免疫的影響，制定個性化免疫程序；

6）臨床和實驗室評估免疫效果，以校正免疫程序。

周緒斌博士：疾病防控確實應遵循“預防為主、防治結合”，但豬病的預防最重要的第一關還是生物安全。疫苗免疫是豬病防控的重要手段和環節，免疫的方案和免疫程序的制定沒有普天下統一的模式，但有一些原則要遵循。包括：

1）了解地區流行的疾病類型。比如存在豬口蹄疫威脅，是O型還是A型，還是二者兼有？從而決定使用疫苗的種類；

2）政府的要求。有些疾病屬強制免疫內容；

3）生物安全的水平。比如生物安全條件很高，地理位置優越，離周邊村莊和農場5 km之外，有空氣過濾裝置，不受空氣傳播性疾病的威脅，則豬藍耳病疫苗可以考慮不用注射；

4）養殖模式。是從分娩-育肥一條龍的模式，還是分娩-斷奶的多點式生產？如果是多點式生產，則豬藍耳病，豬偽狂犬病的危害要低很多，仔豬免疫的疫苗種類和頻率都要低。而一條龍的豬場則對豬藍耳病，豬偽狂犬病要加強免疫；

5）豬群健康狀況。從而確定免疫疫苗的種類和頻率；

6）母源抗體的消長規律，這對于豬瘟弱毒苗，豬偽狂犬病弱毒苗，豬口蹄疫疫苗都十分重要；

7）疫苗本身的免疫原性和疫苗的生產工藝。比如豬細小病毒疫苗，免疫原性非常好，甚至是終生免疫，而比如病毒性腹瀉疫苗，本身的免疫原性存在疑惑，并且有效保護持續的時間比較有限，就需要多次免疫。

曲向陽博士：完整的免疫程序需要涵蓋疫苗種類、疫苗品牌、接種途徑、免疫時機、免疫次數、免疫劑量等幾個要素。同時應做好免疫后的效果監控。

1）疫苗種類：主要取決于豬群所面臨的疾病風險種類及商品化疫苗的效果、可獲得性、經濟性等要素。如：圓環病毒普遍存在，商品化疫苗公認效果較好，但價格相對較高或價差大且評價周期較長，故科學、客觀的疫苗效果評價方案尤為關鍵。豬流感在冬春季節威脅較大，會造成母豬流產與育肥豬高熱、嚴重呼吸道問題，但商品化疫苗國內剛上市，效果有待驗證，經濟性尚未評估，故此類在制定程序時，需要重點根據疫苗效果判斷免疫必要性；

2）疫苗品牌：目前主流豬用疫苗的備選產品過多，給臨床獸醫決策帶來很多困擾，急需建立一套客觀、科學的疫苗品質評價方案或第三方機構；

3）接種途徑：不同的疫苗有不同的接種途徑要求，如有的可噴鼻，有的必須注射，在免疫程序中需要明確；

4）免疫時機：對母豬群而言，有些疫苗主要保護母豬群，如：豬瘟、口蹄疫、豬偽狂犬病等，此類疫苗以群體免疫為主，每年2～4次，以取得母豬群免疫狀態的均一化，但可能會導致不同月份母源抗體持續期不同，可能影響到仔豬疫苗免疫時機的制定（如：口蹄疫、豬瘟等）。有些疫苗接種以保護仔豬為目的，如：大腸桿菌疫苗、PED疫苗等，此類疫苗應在臨分娩前免疫。對于保育、育肥群而言，多數疫苗接種時需要考慮母源抗體干擾與免疫后保護持續期，如：母源抗體對豬瘟、口蹄疫等免疫應答影響比較嚴重，需根據監測結果，重點考慮母源抗體的消減規律。母源抗體對支原體與圓環病毒疫苗的影響較小，需考慮臨床自然感染的時間點，免疫后保護產生所需要時間及免疫保護的維持期等因素；

5）免疫次數：與疫苗保護持續期有關，為了覆蓋到臨上市肥豬的免疫保護，保育育肥豬的免疫項目，如：豬瘟、豬偽狂犬病、豬口蹄疫、支原體、豬圓環病毒病等，通常都加強免疫一次。但研究一針型疫苗對降低勞動量、減少豬群應激與免疫成本的意義很大；

6）免疫劑量：疫苗免疫與治療注射給藥不同，注射給藥劑量與體重成正比，但疫苗免疫的抗原量與體重之間是正相關，而非成正比，接種疫苗抗原的目的是啟動機體的免疫應答，而非是抗原量越多越好。對于品質合格的疫苗而言，免疫時嚴格依照說明書推薦劑量，1頭份/豬即可。

朱連德博士：1）豬藍耳病疫苗選擇應以安全性、效果、性價比和便利原則進行。目前，一般選擇弱毒疫苗而不是滅活疫苗。在生產上不要太注重毒株基因相似性，也沒有太大必要做毒株同源性高低的測序分析；

2）疫苗效果評估，以臨床上控制癥狀表現為基本要素衡量，實驗室條件下，可以了解豬群病毒血癥時間、豬群排毒時間（如口腔液檢測病原）是否縮短，豬場內豬藍耳病毒株基因類型是否減少；

3）免疫程序一定要根據豬群感染狀態、豬群流動及周邊情況等制定，仔豬免疫時要考慮母源抗體的影響以及下游豬群發病時間，種豬群要根據感染狀態和疫苗保護期確定免疫次數。通常，仔豬在2周齡或以上免疫，母豬群3～4次/年普免（安全性高的疫苗），后備豬群在配種前間隔3～4周免疫2次。①仔豬在何日齡免疫，可以由下游豬群發病時間來定，如在8周齡表現出臨床癥狀，那么通常是6周齡感染，疫苗起效時間是2周，欲達到好的保護的時間大概4周，通過倒推法，可以算出仔豬群應該在2～4周齡免疫。那具體哪一周呢？發病率越高越要早免疫：如8周齡豬群發病率在3%左右，可以4周齡免疫；若8周齡豬群發病率在5%左右，可以3周齡免疫；10%以上發病率，則要在2周齡免疫。當然，上述3種情況，都可以在2周齡免疫，可以根據豬場其他疫苗免疫和生產安排而適當予以調整；但不能1周齡或更早，以免母源抗體干擾。②母豬群是普免還是跟胎免疫，要根據疫苗安全性和母豬群對疫苗的敏感程度而定。安全性高的疫苗，母豬沒有不良反應，也不影響胎兒發育，可以普免；若疫苗安全性不高，母豬應用后容易產弱仔，可以考慮跟胎免疫，如妊娠6～8周，分娩1周后。對于一個豬場開始使用安全性高的疫苗，也可以跟胎免疫半年后，改為普免。不管普免還是跟胎免疫，同一棟舍內的豬群，要同時免疫（小于1周內完成）；

4）免疫劑量，應該按廠家推薦劑量免疫。不要以為弱毒疫苗可在動物體內繁殖，而隨意減量。在一個豬藍耳病穩定不活躍的豬場，減量也許在短時間內沒有差異，但在感染壓力較大的豬場，疫苗接種也許就不起作用了；

5）弱毒疫苗和滅活疫苗是否可以配合應用，按目前已有研究文獻所知，本人認為沒有意義。因為普通滅活疫苗基本沒有免疫保護作用。當然，有的陽性豬場也這樣用了，但似乎還沒有一貫良好的證據予以推廣。在一個陰性豬場，可否應用滅活疫苗，防止野毒感染帶來暴發式發病，減少損失，也是值得進一步觀察研究的；

6）同一個豬群/豬場，應該用同一個毒株的疫苗。一個豬場，不管是疫苗毒株，還是野毒毒株，多樣性增加，豬場會生產成績低下或發病幾率增加。不應該母豬群用一個毒株的疫苗（如經典毒株），仔豬群用另一個毒株的疫苗（如高致病性毒株）；也不應該一個時期全場用經典毒株疫苗，一個時期用高致病性毒株疫苗。經常更換不同毒株不同廠家的疫苗，豬場的豬藍耳病總是難以控制，生產也難以恢復；

7）引進后備種豬的疫苗毒株與本場使用疫苗毒株不同，應該在隔離馴化后備豬群期間，免疫兩次本場使用的疫苗，間隔3～4周，第二次免疫至少4周后混群，最好是在第一胎后混群。

周緒斌博士：豬藍耳病疫苗確實存在比較大的爭議和混亂。這一方面是這個病毒本身的致病機理和免疫劑量到目前為止科學家們還未研究清楚，第二是PRRSV本身的變異性也非常大，第三，中國的豬藍耳病疫苗市場也非常復雜，疫苗毒株種類繁多，生產疫苗的廠家也比較多，質量也參差不齊，導致對疫苗的選擇存在困惑。

綜上所述，我國社會發展日新月異，在這種情況下電力施工成本的控制方法也需要通過不斷改進來適應輸變電工程的變化。在輸變電工程施工成本的管理和控制工作中，我們要吸取專業人員的建議，并在施工過程中對施工成本進行及時清算和核對，以免發生收支不平衡的狀況，管理人員和財務人員還應該努力改變傳統的成本管理理念，建立健全成本管理體系，擴大成本控制系統的受力面，使更多的工作人員共同參與到成本控制工作中，最重實現對輸變電工程施工成本的更好控制。

1）至于免疫的劑量，按照疫苗的研發過程和規程的要求，所有的試驗規程應該就是1頭份，之所以要減量或加量，一是因為有些疫苗生產過程中可能抗原含量不足，二是有些疫苗本身的殘余毒力還比較強，所以我們要關注豬藍耳病弱毒疫苗的安全性，如果1頭份疫苗注射健康懷孕母豬或健康仔豬出現繁殖障礙或生長不良，這是疫苗本身的安全性存疑，而不應簡單地通過劑量的改變來解決，而精確的劑量確認需要通過細胞培養，測定TCID50（半數感染量）來確認；

2）仔豬的接種時間，是要綜合考慮飼養模式，比如單點式一條龍還是多點式生產，以及母源抗體的持續時間和滴度，還需要考慮育肥豬的可能感染時間，因為豬藍耳病疫苗通常需要在免疫4～6周中和抗體才會達到較高水平，因此需要在感染前4～6周免疫；

3）按照大量的研究結果，豬藍耳病滅活苗效果非常有限，但這是由于滅活疫苗本身的抗原含量的原因還是由于生產工藝的原因仍需要進一步研究，對豬藍耳病的滅活苗還需要在毒株篩選和生產工藝以及佐劑技術方面進行深入的研究，豬藍耳病活疫苗有效性已經在實驗室和臨床上得到了廣泛的證明?；钜呙缒芊衿彰?，取決于疫苗毒本身的安全性，比如TJM-F92毒株安全性就相對有保證，另外，也取決于我們應用的目標，面對種豬群的感染和發病，利用安全的弱毒苗進行全群接種也是有效的選擇之一；

4）對于豬藍耳病弱毒苗的應用，原則上我們應該堅持一個豬場使用一種豬藍耳病弱毒苗，即讓豬群接觸到的毒株種類最小化，使豬群的免疫力達到最大化。豬藍耳病弱毒疫苗的應用不是一個單純的技術問題，更是一個現實的經濟問題，即對于豬藍耳病陽性場，注射疫苗與不注射疫苗的經濟效益如何？只要注射疫苗能降低感染壓力，減輕臨床癥狀，提高健康水平，降低發病損失，降低料重比，是否應用疫苗的決策就比較容易做出；

5）對于引種，種豬疫苗和自己本場不同的情況，引種應該進行充分的隔離與馴化，因為豬藍耳病病毒無論是野毒還是疫苗毒的感染都不是終生的，我們可以選擇合適的疫苗以達到豬場疫苗毒株的統一性；

6）豬高致性藍耳病弱毒苗和經典疫苗的效果評估都是類似的，其他疫苗也是一樣，攻毒試驗始終是評價疫苗效果的“黃金標準”，事實證明，我們并不能通過序列測定和比對來預測疫苗的效果，也不能通過抗體檢測來評估疫苗的效果。評估豬藍耳病弱毒疫苗包括最重要的3個方面，即安全性、攻毒保護效果以及疫苗毒的病毒血癥時間長短。

曲向陽博士：目前我國已經批準上市的商品化PRRSV疫苗有10個品種，其中7個減毒活疫苗（包括CH-1R、Ingelvac MLV、R98等3種美洲型經典株及JXA1-R、HuN4-F112、TJM-F92、GDr180等4類高致病性毒株），3個滅活疫苗（CH-1a與SD1兩種經典毒株、JXA1高致病性毒株）。2015年又批準上市了PRRS V與豬瘟二聯活苗（TJM-F92株+C株）。隨著減毒活疫苗的使用，臨床流行毒株也日趨復雜，從1996年的CH-1a、BJ-4，到2006年以Nsp2缺失30個氨基酸為特征的HP-PRRSV，以及2014年以來流行的NADC30-like等，不同流行株或疫苗株之間的基因重組讓毒株變異加快，給臨床疫苗選擇帶來很多困擾。

PRRSV減毒活疫苗(MLV)選擇需重點考慮安全性，不合格的PRRSV MLV疫苗對母豬發情、胚胎著床及后期流產、斷奶仔豬致病力都有顯著的影響。

如何判斷疫苗株與臨床分離株之間的交叉保護性，目前國際上尚未形成統一的認識。國內一些專家推薦的以ORF5的同源性作為疫苗交叉保護力評價的標準，在臨床上并未得到驗證。不建議同一豬群中使用不同毒株的PRRSV疫苗，這會導致PRRSV遺傳演化日趨復雜。

通常認為PRRSV MLV疫苗可能誘導更好的免疫應答與免疫保護，特別對PRRSV陰性群，滅活疫苗免疫應答差。通常認為：PRRSV MLV疫苗對于后備母豬馴化與母豬群形成統一、均一的免疫力水平具有較好的效果，免疫母豬群一旦感染PRRSV野毒后，流產等繁殖障礙臨床損失較小，且可以更快地恢復正常生產水平，但對于哺乳仔豬的免疫時機與經濟性具有較大的爭議。對于已經感染PRRSV野毒的哺乳仔豬免疫PRRSV MLV疫苗沒有臨床價值。

PRRSV MLV疫苗免疫后的效果評估是個挑戰。因為當前廣泛使用的ELISA試劑盒所測定的抗體并非是中和性抗體，其數值高低與保護性之間并沒有直接聯系，可作為臨床PRRSV感染的輔助性判斷。而且對于臨床PRRSV穩定的母豬群，反復接種PRRSV MLV后，抗體S/P值會逐漸下降，甚至部分母豬抗體轉陰。

后備母豬引種是導致PRRSV入侵豬場的重要途徑，因為我國目前豬藍耳病陰性豬供應少，多數種豬群都已自然感染或接種PRRSV MLV疫苗，導致后備母豬PRRSV感染狀態評價難度增大。如何識別免疫PRRSV MLV后備母豬的PRRSV感染狀態是行業面臨的一大困擾，ORF5測序會有一定的幫助，但病毒血癥陰性的后備母豬并不意味著未攜帶PRRSV野毒。

本刊：圓環病毒疫苗不同毒株是否有交叉保護，目前PCV3，PCV2a,PCV2b是否和目前疫苗匹配，保護力如何，如何評估圓環病毒疫苗效果，抗體高低，離散度，豬病料抗原檢測？精液唾液帶毒情況，肺淋巴結PCR，血液病毒載毒量如何評估，原核細胞和真核細胞表達的圓環病毒CAP蛋白疫苗，全病毒疫苗如何進行評估，如何進行檢測和現場效果的評估。試劑盒目前是否可靠？

朱連德博士：目前的豬圓環病毒疫苗有全病毒滅活疫苗、桿狀病毒表達和大腸桿菌表達的亞單位疫苗，抗原多為PCV2b，對PCV2a和PCV2b有很好的保護作用；其Cap蛋白與新近發現的PCV3毒株的Cap蛋白分子結構差異較大，有限的文獻和臨床檢測數據表明現有疫苗對PCV3感染發病的交叉保護力不足。

評估豬圓環病毒疫苗的手段主要是看豬只生產成績和臨床癥狀表現，其次是實驗室檢測免疫后病毒載量，病毒血癥時間；唾液檢測病原也是可以嘗試的；在陽性豬場通過檢測抗體評估免疫效果不足以說明問題。當然，在實驗室條件下，可以免疫后攻毒，檢測病毒血癥和熒光定量檢測淋巴結帶毒量。

過去認為大腸桿菌原核表達系統沒有桿狀病毒真核表達系統更容易讓Cap蛋白組裝出病毒樣粒子，但隨著可溶性蛋白表達、高純度Cap蛋白提取、病毒樣顆粒（VLP）組裝技術的進步，原核表達系統跟真核表達系統在病毒樣粒子生成上已經沒有多少差異了。不管是亞單位疫苗還是全病毒疫苗，只要抗原含量足夠，純度達標，批次穩定，都是可以選擇應用的。

檢測抗體的ELISA試劑盒，可以用來了解PCV2感染情況；用其檢驗疫苗免疫保護效果，有不確定性和局限性，需要更多的摸索和經驗積累。目前市面上出現PCV2抗原定量和定性膠體金測試卡，可以幫助遴選疫苗。

周緒斌博士：應該說所有豬圓環病毒毒株疫苗都有交叉保護作用，但近幾年出現的PCV3確實是一個新的挑戰，其危害程度、致病機理、免疫機理都值得高度關注?？贵w檢測在圓環病毒疫苗的效果評估中的作用非常有限，疫苗效果評估在實驗室檢測中體現的是降低病毒血癥，降低病毒載量以及通過淋巴組織的切片和免疫組化的檢測方法，降低對免疫細胞的損傷，而從臨床上疫苗效果最終還是要體現在生產性能的改善，特別是豬只成活率，日增重和料重比。全病毒與基因工程圓環病毒疫苗的評估方法應一致。

本刊：豬病毒性腹瀉疫苗目前很多客戶不認同，認為效果不好，原因在哪里？現有情況下，如何發揮疫苗最大效果，減少豬場損失，目前疫苗種類、毒株、免疫途徑很多爭議，如何評估疫苗效果？試劑盒檢測是否可靠？滅活疫苗和活疫苗如何配合使用？返飼效果和風險，目前很多豬場返飼和疫苗相配合使用，如何減少風險和增強免疫效果？

周緒斌博士：豬病毒性腹瀉的疫苗豬場不認同，一方面與疾病本身的特性相關，另外也與疫苗的生產工藝相關，當然也與豬場管理相關。由于豬病毒性腹瀉的免疫主要還是依靠黏膜免疫，IgA在免疫過程中起主要作用，而滅活疫苗注射免疫所產生的循環抗體作用是有限的，第二是病毒本身的培養有一定困難，抗原含量對免疫起關鍵作用，第三就是豬場的生物安全很重要，因為病毒性腹瀉的免疫持續期是非常短暫的，要防止外源病毒的傳入。所以目前返飼仍是控制PED的重要手段，單純依賴疫苗很難完全防控病毒性腹瀉。返飼也應注意病料的選擇，應該選用急性發病期的病毒或人工攻毒發病的病料，監測病毒的含量并確保無外源病毒污染，正確處理病毒以及保證返飼的效果。定期監測母豬的PEDV抗體對保證母豬群的免疫效力和免疫效果有一定的指導作用。

本刊：簡單介紹一下豬偽狂犬病疫苗目前的毒株、差異性和交叉保護性，gE和gB抗體，PCR抗原檢測，如何評估豬場乳豬、保育豬、肥豬感染野毒，疫苗免疫程序的設計和哪些因素有關，如何評估免疫效果？

朱連德博士：1）毒株變異，毒力增強，這在業內已經形成共識。無論進口疫苗還是國產疫苗，毒株類型較多，多數廠家抗原是Bartha株，新毒株疫苗也有廠家已經注冊。目前對Bartha株等已經存在的毒株疫苗對現在流行毒株交叉保護的看法不一。實踐證明，現有疫苗仍有交叉保護作用，但保護力似乎卻有減弱。因此，可以通過調整免疫程序，加強生物安全措施，并用凈化豬偽狂犬病的手段予以減少其對生產的影響。

2）免疫效果主要通過是否控制了臨床發病予以評估；其次，檢測病毒血癥持續時間，是否體外排毒。長期免疫的效果要檢測gE抗體，看其陽性率下降情況。

3）可以通過檢測gE抗體和檢測病原，了解各個階段豬群感染和帶毒情況及臨床觀察發病情況，并以此制定或調整免疫程序。斷奶前后已有臨床發病，其他仔豬一定在出生當天，最遲不晚于3日齡，滴鼻免疫；母豬加強免疫。疫苗免疫程序設計與豬群感染情況、疫苗特點、免疫途徑、免疫劑量和豬群其他疾病干擾有關，當然也與豬群流動、飼養管理、生物安全措施等有關。

周緒斌博士：豬偽狂犬病的流行目前出現了新的變化，2012年之后出現了毒力變強的變異毒株。目前的疫苗毒株主要以傳統的Bartha-k61毒株為主，疫苗對變異毒株有一定的交叉保護作用，但不能提供完全保護，免疫方案要保證毒株的匹配性，以及母豬和仔豬都有較強的主動免疫保護作用，因此，母豬通常一年需要3～4次普免，仔豬如果存在早期感染風險則需要進行滴鼻免疫，并在育肥早期和中期加強免疫，免疫效果的評估主要是基于gE野毒抗體的監測，保證免疫后gE不轉陽或gE的陽性率逐漸下降，gB抗體監測對于免疫效果評估的作用非常有限，如果采用gE缺失的疫苗，各種豬群的感染都可以用gE-ELISA來評估是否有野毒感染，但要注意，70～100日齡前生長豬的gE-ELISA陽性可能來自母源抗體，因此需要輔助的PCR抗原檢測方法。

蔡汝健老師：疫苗效力通常通過疫苗的保護率指標來衡量。疫苗保護率的計算公式通?？杀硎緸椋篤E(%)=[1-(ARV／ARC)]×100%。其中VE是指疫苗保護效力，ARC和ARV分別是對照組和疫苗組的終點事件發生率。只要疫苗可以提供某種程度的保護，那么疫苗組的終點事件發生率一定會低于對照組，疫苗組和對照組的相對危險度小于1，使得最終VE的范圍在0～100之間，VE值越高則說明保護效果越好，則疫苗的效力越高。

研究制定疫苗效力評估的臨床試驗方案時，臨床試驗終點的選擇和判定最為重要。選擇什么樣的終點，是感染還是發?。吭谝呙缢槍Φ牟≡w感染后并不一定導致發病的情況下（隱性感染），這個選擇就顯得尤為重要。所以我通常采用兩者相結合的方案對疫苗效力進行評估，通過以上理論結合豬偽狂犬病毒疫苗的試驗經驗進行探討。

1）在豬偽狂犬病毒疫苗的效力評價試驗中，以偽狂犬病毒所致的疾?。ǔ霈F的臨床癥狀）為主要判斷終點。豬場接種豬偽狂犬疫苗后，仍然出現偽狂犬病毒所致的臨床癥狀：仔豬表現為發熱、嘔吐、呼吸因難、間歇性痙攣等癥狀， 病死率很高；母豬發生流產及產木乃伊胎、死胎等臨床癥狀，通過疫苗保護率的計算公式最后得出疫苗的保護效力；

2）成年豬感染該病毒后不發病而呈隱性感染， 造成長期帶毒、排毒， 成為極危險的傳染源，所以我們在發病為判斷終點結合病毒感染為終點，以便全面評估豬偽狂犬疫苗的效力。即在觀察期內，所有出現任何可疑臨床癥狀或沒有出現任何臨床癥狀時采樣送往實驗室進行檢測。通過病毒分離、特異性核酸PCR診斷或豬偽狂犬病毒野毒（gE）抗體試劑盒檢測來判斷疫苗的效力。當前豬場偽狂犬病毒感染規律主要表現為10～14周齡豬群偽狂犬病毒野毒感染，導致偽狂犬病毒野毒（gE）抗體轉陽，所以我曾提出可以以中大豬偽狂犬病毒野毒（gE）抗體轉陽率來評價豬偽狂犬疫苗的效力，轉陽率越高說明疫苗免疫效果不佳，轉陽率為0說明疫苗免疫效果很好，能夠阻斷豬偽狂犬病毒的感染。

唐利：根據各種最新的研究報告顯示，臨床感染的某些偽狂犬病毒存在毒力增強的現象以及部分疫苗交叉保護不好的情況。但從我自己控制豬偽狂犬病以及多次成功實施豬偽狂犬病凈化的經驗來看，暴發豬偽狂犬病時使用豬偽狂犬滅活疫苗作為補充緊急免疫方案，清走肥豬群，以及嚴格消毒空欄和減少針頭傳播等措施很有效，具體實施流程要根據每個豬場的具體情況而定。一般來說，兩點式飼養，補充陰性后備，確保公豬陰性，強化免疫，嚴格批次生產以及嚴格的生物安全等措施依然是控制豬偽狂犬病以及保持豬偽狂犬病陰性的幾個關鍵的管理措施。

本刊：豬瘟疫苗對母豬是否需要普免或者跟胎免疫？疫苗毒是否會有胎盤感染？能否介紹一下豬瘟的免疫程序設計及免疫效果的評估？

朱連德博士：1）普免或跟胎免疫，主要是根據豬群管理和生產安排來確定。目前，商品疫苗不存在安全問題，不會通過胎盤感染胎兒；

2）免疫程序制定主要依賴抗體檢測，因為國內臨床發病較少見。通過抗體包括母源抗體消長情況確定免疫時間和免疫間隔；

3）免疫效果評估，主要是通過ELISA試劑盒檢測了解抗體合格率?？乖瓩z測也可作為一個補充。

周緒斌博士：豬瘟疫苗包括活疫苗和即將上市的E2基因工程亞單位滅活疫苗?；钜呙缢枚局隇橥没醵綜株，C株是非常安全有效的弱毒苗，C株生產出的疫苗包括脾淋苗、牛睪丸細胞苗以及ST傳代細胞苗。活疫苗免疫母豬是否會有胎盤感染也沒有定論，取決于母豬本身的狀態，免疫狀態低下的母豬有可能存在垂直傳播。基因工程亞單位滅活苗免疫母豬不存在垂直感染。豬瘟免疫程序的制定核心的要點是防止母源抗體的干擾，因為弱毒苗受母源抗體干擾是很多豬場豬瘟免疫失敗的重要原因，豬瘟的抗體監測有很多的商業化ELISA試劑盒可供選擇，但這些試劑盒大多數不能區別野毒抗體和疫苗抗體。對于無豬瘟野毒感染的豬場，應確保豬瘟抗體陽性率高于90%，阻斷率高于85%。

本刊：檢測單位、實驗室、科研工作人員如何從現場檢測情況和疫苗免疫情況來分析疫苗免疫程序和免疫方案是否合理？如何評估免疫合格和有效？

朱連德博士：1）采樣科學合理，檢測方法正確；

2）依據正確的檢測結果，了解現場生產和臨床情況，生物安全措施實施情況，甚至免疫操作細節；

3）熟悉所用疫苗的質量、性能、理化特點及可能影響疫苗效果發揮的其他疾病或營養因素。

周緒斌博士：檢測單位和實驗室的監測需要非常專業化的水平，準確的實驗室操作以及對檢測結果的正確解讀，絕不能簡單地從檢測結果來評估疫苗免疫效果，也同樣需要正確的采樣方法，并了解所使用疫苗的種類，綜合血清學的監測方法和抗原的分子生物學和病理學的診斷方法。不同的疾病，不同的疫苗都有特定的診斷和評價方法，并需要將實驗室檢測結果與現場的生產結合起來進行分析和評價，如果只是通過實驗室來評估免疫程序，免疫方案，疫苗效果那就是紙上談兵。

本刊：您認為目前有效的評估疫苗免疫方案免疫效果的方法有哪些？

朱連德博士：1）臨床癥狀；

2）生產成績；

3）抗體消長；

4）病毒血癥，或唾液、鼻分泌物、排泄物、咽喉拭子等檢測病原；

5）組織采樣進行病理觀察，抗原檢測。

周緒斌博士：評估免疫方案和免疫效果包括血清學方法，檢測抗體的變化情況，了解野毒感染的變化情況，了解抗原檢出率和豬群帶毒率的變化，最重要的是了解豬群生長性能。