豬偽狂犬疫苗及評(píng)估

賴 志，高俊鋒，馬晶晶，吳碧青，韓相敏

（上海創(chuàng)宏生物科技有限公司，上海 201619）

偽狂犬病（Pseudorabies，PR）是偽 狂 犬 病 病 毒（Pseudorabiesvirus，PRV）引起的高度接觸性傳染病，主要通過接觸和空氣傳播，家畜的主要癥狀有奇癢、發(fā)熱、腦脊髓炎和繁殖障礙等癥狀，一旦疫病發(fā)生，該病毒可感染腦神經(jīng)，形成“潛伏感染”，終身帶毒，很難根除，給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

1　豬偽狂犬疫苗的分類

目前，對(duì)該病的防控，國(guó)內(nèi)外均以疫苗免疫預(yù)防為主，結(jié)合偽狂犬病毒gE抗原和gE抗體檢測(cè)淘汰、凈化野毒感染豬。國(guó)內(nèi)外臨床應(yīng)用的PR疫苗大體可分為以下兩類：一是滅活疫苗，滅活疫苗又分為兩種。其中將分離的野毒或強(qiáng)毒經(jīng)甲醛滅活后，加佐劑乳化制成油乳劑“全病毒”滅活疫苗，因?yàn)闊o(wú)法做到疫苗毒和野毒感染的鑒別診斷，已經(jīng)不再批準(zhǔn)新疫苗生產(chǎn)；另一種是將分離的流行毒株進(jìn)行g(shù)E基因缺失后經(jīng)滅活劑滅活后加佐劑制成的基因缺失滅活疫苗，這類滅活疫苗安全、免疫原性好，還可以做到鑒別診斷，有利于豬偽狂犬病的凈化，將是豬偽狂犬疫苗研發(fā)的主要方向。二是基因缺失活疫苗，活疫苗也分為兩種。一種是將分離的野毒經(jīng)低溫、高溫或變溫復(fù)傳代致弱研制的基因缺失弱毒疫苗，稱為“自然基因缺失活疫苗”；另外一種是利用基因工程技術(shù)構(gòu)建的基因缺失疫苗，稱為“人工基因缺失活疫苗”。這些疫苗在PR的防控方面起到非常重要的作用。

2　豬偽狂犬病免疫程序的設(shè)計(jì)及疫苗的選擇

根據(jù)豬偽狂犬病感染和發(fā)病特點(diǎn)，我們需要從這幾方面進(jìn)行設(shè)計(jì)免疫程序和選擇相應(yīng)的疫苗。

2.1 黏膜免疫

豬偽狂犬病主要通過空氣和鼻腔接觸傳播，鼻腔接種是防控豬偽狂犬病的最佳免疫途徑。由于鼻腔免疫是提升黏膜免疫，所以需要接種活疫苗。鼻腔接種活疫苗不僅可以提升黏膜免疫，還可以促使疫苗毒株，進(jìn)入腦神經(jīng)細(xì)胞提前“占位效應(yīng)”，抵抗野毒感染，為豬偽狂犬病凈化打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。所以，在感染壓力大的豬偽狂犬病陽(yáng)性豬場(chǎng)，必須進(jìn)行滴鼻免疫（一般建議在1～3日齡進(jìn)行）。黏膜免疫效果如何，與疫苗毒株、接種劑量、佐劑成分等有關(guān)。尤其是佐劑，最好選擇非油性佐劑。據(jù)研究納米佐劑可以提升豬偽狂犬病黏膜免疫的水平，例如使用于豬偽狂犬耐熱保護(hù)劑活疫苗（C株）上的AD04納米佐劑。

表1　新注冊(cè)PR疫苗和檢測(cè)試劑盒統(tǒng)計(jì)表

表2　PR疫苗生產(chǎn)企業(yè)統(tǒng)計(jì)表

2.2 細(xì)胞免疫

豬偽狂犬病毒有很強(qiáng)的細(xì)胞免疫效果，接種后可以產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子和干擾素，迅速壓制感染的病毒。這就是豬群暴發(fā)偽狂犬病毒感染時(shí)，進(jìn)行緊急接種，可以在短時(shí)間內(nèi)控制疫情的原因。偽狂犬細(xì)胞免疫效果與接種抗原含量、毒株毒力強(qiáng)弱等因素有關(guān)系，因此，一旦暴發(fā)疫情，建議使用抗原含量高（每頭抗原含量≥106.0TCID50）的新流行毒株偽狂犬活疫苗。

2.3 體液免疫

體液免疫是控制豬群排毒和再感染的主要環(huán)節(jié)，豬群排毒的主要環(huán)節(jié)在種豬，因此，核心群一定要做好豬偽狂犬病的免疫。體液免疫的主要指標(biāo)是中和抗體。高水平中和抗體的母豬不僅可以消除豬偽狂犬病的垂直傳播，而且有高的母源抗體傳遞給仔豬，抵抗偽狂犬野毒的感染，這也是豬偽狂犬病陽(yáng)性母豬可以產(chǎn)出豬偽狂犬病陰性的仔豬（后備母豬）的原因。做好種豬免疫，提高豬偽狂犬病體液免疫是豬場(chǎng)偽狂犬病凈化的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。體液免疫效果好壞與PR疫苗毒株、抗原含量、佐劑等等有直接關(guān)系。種豬結(jié)合免疫“滅活疫苗”和“活疫苗”的目的也在于此。

2.4 PR免疫程序設(shè)計(jì)

一般根據(jù)豬場(chǎng)種豬、商品豬的gE、gB抗體檢測(cè)結(jié)果來制定免疫程序。由于疫苗毒株缺失gE基因，因此，免疫后不會(huì)產(chǎn)生gE抗體，如果檢測(cè)到豬群的gE抗體，可以確定為PR野毒感染。從而區(qū)分PR疫苗毒感染和野毒感染。

1）種豬免疫程序制定：公豬和母豬免疫程序，每年需要全群普免3～4次PR基因缺失活疫苗，提高豬群的中和抗體水平，以確保豬群不排毒或不被感染，減低豬場(chǎng)的感染壓力和感染風(fēng)險(xiǎn)。如果母豬陽(yáng)性率比較高，可以在產(chǎn)前4～5周加強(qiáng)免疫一次PR基因缺失滅活疫苗，目的是控制母豬排毒，同時(shí)提升仔豬的母源抗體，PR陽(yáng)性母豬可以生產(chǎn)出陰性的仔豬（后備母豬）。

2）商品豬免疫程序制定：PR陽(yáng)性豬場(chǎng)，仔豬1～3日齡需要滴鼻免疫0.5～1頭份PR基因缺失活疫苗。由于PR母源抗體持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng)，一般可以持續(xù)至9～12周齡。此時(shí)，需要進(jìn)行g(shù)B抗體檢測(cè)，以確定保育豬PR的免疫時(shí)間。建議時(shí)間定在母源抗體下降至80%陽(yáng)性率的時(shí)候，一般是安排在8～10周進(jìn)行首免。此外，大量的PR抗體水平檢測(cè)結(jié)果告訴我們，肥豬15～17周齡再次加強(qiáng)免疫1頭份PR基因缺失疫苗，可以防控PR在肥豬階段暴發(fā)的呼吸道疾病。

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2.5 PR疫苗選擇原則

1）gE基因缺失疫苗，可以進(jìn)行與野毒的鑒別診斷。為豬場(chǎng)凈化PR打下基礎(chǔ)。

2）抗原含量（以農(nóng)業(yè)部發(fā)布的質(zhì)量標(biāo)注為準(zhǔn)）高的PR疫苗，每頭份抗原含量≥106.0TCID50。

3）安全性好的基因缺失活疫苗，一般認(rèn)為自然基因缺失的活疫苗會(huì)更安全。

4）副作用小的滅活疫苗，親水性佐劑的滅活疫苗副作用會(huì)輕一些。

5）近年來，PR出現(xiàn)新的流行變異毒株，因此，選擇最新流行毒株的PR疫苗。

根據(jù)公開信息，目前國(guó)內(nèi)新注冊(cè)了3種豬偽狂犬病相關(guān)生物制品（2種疫苗及1種檢測(cè)試劑盒）（見表1），共47家企業(yè)獲得9種豬偽狂犬病相關(guān)生物制品（包括7種疫苗和2種檢測(cè)試劑盒）有效批準(zhǔn)文號(hào)65個(gè)，見表2。

2.6 PR疫苗評(píng)估要點(diǎn)

1）安全性：不管活疫苗還是滅活疫苗，安全性是第一要素，因此，免疫后的副作用成為PR疫苗免疫的主要指標(biāo)。

2）有效性：PR疫苗免疫后， gE、gB抗體的陽(yáng)性率、中和抗體等都是評(píng)估PR疫苗和免疫程序的有效性指的重要指標(biāo)。

綜上所述，選擇合適的PR疫苗和制定正確的免疫程序是防控豬偽狂犬病的重要手段。