松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)條件優(yōu)化探討

陳紹威

摘 要：松杉靈芝數(shù)子菌綱多孔菌科目中的內(nèi)容，又被稱為木靈芝，多產(chǎn)于黑龍江區(qū)域、吉林區(qū)域與甘肅區(qū)域，具備較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與保健價(jià)值，對(duì)人體有著潤(rùn)肺平喘、抑制血脂與提升免疫力的作用，在抗腫瘤方面的應(yīng)用較為廣泛。因此，為了滿足人們的健康需求，應(yīng)針對(duì)松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)進(jìn)行分析，針對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，生產(chǎn)質(zhì)量較高的營(yíng)養(yǎng)保健產(chǎn)品。

關(guān)鍵詞：松杉靈芝；液體發(fā)酵培養(yǎng)；營(yíng)養(yǎng)條件優(yōu)化

在松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)的過(guò)程中，需根據(jù)具體內(nèi)容進(jìn)行處理，掌控相關(guān)作用，并利用合理方式分析問題與解決問題，建立多元化與現(xiàn)代化的管理機(jī)制，保證在實(shí)際處理的過(guò)程中，針對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件進(jìn)行合理優(yōu)化，滿足當(dāng)前的發(fā)展需求。

1 分析材料與方式

對(duì)于松杉靈芝而言，其生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，且生長(zhǎng)的效率很低，在產(chǎn)品制作的過(guò)程中，質(zhì)量呈現(xiàn)不穩(wěn)定的特征，會(huì)導(dǎo)致研究效果受到影響。因此，需做好試驗(yàn)工作，利用合理的方式對(duì)其處理。

1.1 試驗(yàn)材料分析

本次試驗(yàn)主要采用的為松杉靈芝1號(hào)菌株，由某生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)其進(jìn)行保存與處理。所選擇的試劑為葡萄糖試劑、乙醇試劑、蛋白胨試劑、菌母浸膏試劑、蔗糖試劑、瓊脂試劑、磷酸二氫鉀試劑、硫酸鎂試劑、維生素B1。聯(lián)合玉米粉產(chǎn)品、麥麩產(chǎn)品、豆餅粉產(chǎn)品對(duì)其處理，并選擇丙酮、無(wú)水乙醚對(duì)其進(jìn)行研究與試驗(yàn)，通過(guò)合理方式做好工作。在選擇儀器設(shè)備的過(guò)程中，主要應(yīng)用燒杯，三角瓶、往復(fù)式振蕩篩、無(wú)菌操作箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀設(shè)備、冷凍離心機(jī)設(shè)備、冷凍干燥機(jī)設(shè)備、超凈工作臺(tái)設(shè)備、電子分析天平設(shè)備、真空干燥箱設(shè)備等。在實(shí)際使用的過(guò)程中，需針對(duì)機(jī)械設(shè)備質(zhì)量進(jìn)行全面管理與嚴(yán)格協(xié)調(diào)，保證其使用價(jià)值，增強(qiáng)管理效果，滿足當(dāng)前的實(shí)際使用要求，達(dá)到預(yù)期的處理目的。

對(duì)于斜面培養(yǎng)基而言，主要使用的為綜合PDA培養(yǎng)基，其中為去皮馬鈴薯（200g）、葡萄糖（20g）、瓊脂（20g）、水（1000ml），在120攝氏度的環(huán)境下滅菌30分鐘。選擇種子培養(yǎng)基，其中為土豆200g、葡萄糖30g、蛋白胨2g、酵母浸膏2g、磷酸二氫鉀（1g）、硫酸鎂（1g）、維生素B1（10mg）1片、水，在120攝氏度的環(huán)境中滅菌30分鐘。在選擇發(fā)酵培養(yǎng)基的過(guò)程中，其中為葡糖糖、玉米粉、麥麩、蛋白胨、酵母浸膏、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、維生素B1、水，在120攝氏度的環(huán)境中滅菌30分鐘。

1.2 試驗(yàn)方式

在試驗(yàn)的過(guò)程中，需做好種子培養(yǎng)工作，明確為液體的發(fā)酵培養(yǎng)方式，全面收集菌絲體，以便于提升試驗(yàn)效果。

第一，在種子培養(yǎng)的過(guò)程中，需針對(duì)活化斜面的菌種進(jìn)行分割，使其形成蠶豆大小的塊體，并在無(wú)菌環(huán)境中對(duì)其進(jìn)行接種，以便于將其融入液體中更好的進(jìn)行培養(yǎng)，將液體的劑量控制在250ml，將三角瓶的液量設(shè)置成為80ml，在28攝氏度的環(huán)境中保存七天左右。第二，在對(duì)液體發(fā)酵進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程中，可將已經(jīng)培養(yǎng)成功的種子篩選10%的劑量，并接種在500ml劑量的三角瓶中，保證裝液量為180ml，并在相同條件之下對(duì)其進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)，時(shí)間為六天左右。第三，在收集菌絲的時(shí)候，應(yīng)將發(fā)酵液放置在離心杯設(shè)備中，將其規(guī)格設(shè)計(jì)在4000r每分鐘左右，離心的時(shí)間為十分鐘，并針對(duì)菌絲進(jìn)行沉淀處理，使用蒸餾水對(duì)其沖洗，保證實(shí)際處理的效果。同時(shí)，還要做好蒸餾水的沖洗工作，將其設(shè)置在六十?dāng)z氏度溫度環(huán)境中衡量重量，做好生物量的計(jì)算工作，保證可以提升處理效果，滿足菌絲的實(shí)際處理符合規(guī)定。第四，在胞外粗多糖提取的過(guò)程中，需針對(duì)過(guò)濾之后的發(fā)酵液實(shí)施真空濃縮處理，使其轉(zhuǎn)變成為原來(lái)體積的20%，并在濃縮期間，在發(fā)酵液中添加3倍左右體積的乙醇，保證在4攝氏度環(huán)境中放置處理，在過(guò)夜之后，需對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行離心處理，將規(guī)格設(shè)置在4000r每分鐘左右，離心時(shí)間為五分鐘，使其形成沉淀反應(yīng)。針對(duì)沉淀冷凍干燥情況，獲得粗多糖提取物，然后對(duì)其獲得率進(jìn)行計(jì)算，以此提升處理效果。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素與水平分析

2 相關(guān)結(jié)果分析

在試驗(yàn)之后，需針對(duì)結(jié)果進(jìn)行全面的分析，明確各方面要求與原則，利用合理的方式解決問題，創(chuàng)建現(xiàn)代化與多元化的控制機(jī)制，保證能夠創(chuàng)建良好的營(yíng)養(yǎng)條件。

2.1 不同碳源對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件的影響

在實(shí)際處理的過(guò)程中，可將葡萄糖試劑、可溶性淀粉產(chǎn)品、蔗糖產(chǎn)品、玉米粉產(chǎn)品與乳糖產(chǎn)品等融合在一起，替代培養(yǎng)基中的碳源，并保證其他成分沒有變化，以便于對(duì)生物量進(jìn)行測(cè)量，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。在實(shí)際培養(yǎng)的過(guò)程，不同碳源會(huì)對(duì)菌絲的生長(zhǎng)產(chǎn)生不同影響，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行合理的分析與明確，根據(jù)菌絲生物量進(jìn)行分析，并對(duì)玉米粉與蔗糖等全面了解。雖然將玉米粉作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)不能保證可溶性淀粉的使用效果，但是，能夠提升發(fā)酵液的處理水平，保證菌球的均勻性與合理性，明確具體的內(nèi)容。對(duì)于玉米粉而言，其中含有較多核苷酸物質(zhì)與纖維素物質(zhì)，可以誘導(dǎo)靈芝中的胞外多糖的良好合成，明確具體的情況。在此期間，需針對(duì)培養(yǎng)成本進(jìn)行綜合的探討，明確具體內(nèi)容與要求，并將玉米粉作為碳源進(jìn)行處理，以便于增強(qiáng)各方面的處理效果，協(xié)調(diào)相關(guān)工作之間的關(guān)系。

2.2 不同氮源對(duì)于營(yíng)養(yǎng)條件的影響

在對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化的過(guò)程中，應(yīng)選擇合理的碳源，并對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格的控制，將蛋白胨成分、麥麩成分、氯化銨成分、硝酸銨成分等作為液態(tài)培養(yǎng)期間的培養(yǎng)基氮源，利用搖床對(duì)其進(jìn)行，在成分不變的情況下，能夠更好的測(cè)定生物量與相關(guān)粗多糖的數(shù)量。經(jīng)過(guò)相關(guān)研究可以得知，不同氮源對(duì)于松杉靈芝液體培養(yǎng)會(huì)造成一定影響，應(yīng)合理篩選相關(guān)氮源進(jìn)行處理，保證實(shí)際使用量。對(duì)于蛋白胨與麥麩成分而言，在使用期間多糖獲得率較高，由于麥麩成分在實(shí)際采購(gòu)的過(guò)程中成本較高，因此，需對(duì)培養(yǎng)基的造價(jià)進(jìn)行綜合探討，明確具體的多糖情況，并利用資源控制的方式對(duì)其處理，將麥麩作為最主要的氮源進(jìn)行處理，以此增強(qiáng)分析與控制效果，滿足當(dāng)前的發(fā)展需求[1]。

2.3 無(wú)機(jī)鹽對(duì)于菌絲生物量的影響

經(jīng)過(guò)相關(guān)研究可以得知，在最合適的氮源與碳源之下，無(wú)機(jī)鹽會(huì)對(duì)菌絲的生物量產(chǎn)生一定影響，應(yīng)明確具體成分的情況，并在成分不變的情況下，測(cè)定其中的粗多糖成分，明確含量信息與數(shù)據(jù)，保證工作效果。在實(shí)際處理期間，應(yīng)添加少量的無(wú)機(jī)鹽成分，對(duì)其合理的研究與分析，明確成分特點(diǎn)[2]。

2.4 正交試驗(yàn)對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件的影響

在實(shí)際培養(yǎng)的過(guò)程中，應(yīng)科學(xué)使用正交試驗(yàn)的方式對(duì)其處理，利用科學(xué)的培養(yǎng)基方式形成現(xiàn)代化的管理機(jī)制，在與無(wú)交試驗(yàn)與正交試驗(yàn)相互作用的情況下，形成準(zhǔn)確的結(jié)果。在此期間，需針對(duì)玉米粉的濃度進(jìn)行嚴(yán)格控制，保證麥麩的濃度符合相關(guān)規(guī)定，并合理使用搖瓶的方式對(duì)其處理，明確具體多糖獲得率，對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格的分析，保證形成良好的營(yíng)養(yǎng)條件[3]。

3 結(jié)束語(yǔ)

對(duì)于松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)而言，與傳統(tǒng)培養(yǎng)方式相較的生產(chǎn)周期較短，省工省力，生物利用度高。且容易對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行控制，只需針對(duì)培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，從而得到優(yōu)質(zhì)的松杉靈芝產(chǎn)品。以便于將松杉靈芝產(chǎn)品應(yīng)用在食品領(lǐng)域、藥品領(lǐng)域與化妝品領(lǐng)域中。

參考文獻(xiàn)

[1]于海洋，彌春霞，陳歡等.松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)條件優(yōu)化[J].北方園藝，2015（4）：152-156.

[2]李愛欣，許利婷，張術(shù)影等.松杉靈芝發(fā)酵物對(duì)乙醇誘導(dǎo)小鼠胃潰瘍的保護(hù)作用研究[J].食品與發(fā)酵科技，2015，51（3）：37-40，43.

[3]于海洋.松杉靈芝多糖的發(fā)酵和提取條件優(yōu)化及抗氧化活性研究[D].牡丹江師范學(xué)院，2015.