陳紹威
摘 要:松杉靈芝數子菌綱多孔菌科目中的內容,又被稱為木靈芝,多產于黑龍江區域、吉林區域與甘肅區域,具備較高的營養價值與保健價值,對人體有著潤肺平喘、抑制血脂與提升免疫力的作用,在抗腫瘤方面的應用較為廣泛。因此,為了滿足人們的健康需求,應針對松杉靈芝液體發酵培養進行分析,針對營養條件進行優化,生產質量較高的營養保健產品。
關鍵詞:松杉靈芝;液體發酵培養;營養條件優化
在松杉靈芝液體發酵培養的過程中,需根據具體內容進行處理,掌控相關作用,并利用合理方式分析問題與解決問題,建立多元化與現代化的管理機制,保證在實際處理的過程中,針對營養條件進行合理優化,滿足當前的發展需求。
1 分析材料與方式
對于松杉靈芝而言,其生長周期較長,且生長的效率很低,在產品制作的過程中,質量呈現不穩定的特征,會導致研究效果受到影響。因此,需做好試驗工作,利用合理的方式對其處理。
1.1 試驗材料分析
本次試驗主要采用的為松杉靈芝1號菌株,由某生物實驗室對其進行保存與處理。所選擇的試劑為葡萄糖試劑、乙醇試劑、蛋白胨試劑、菌母浸膏試劑、蔗糖試劑、瓊脂試劑、磷酸二氫鉀試劑、硫酸鎂試劑、維生素B1。聯合玉米粉產品、麥麩產品、豆餅粉產品對其處理,并選擇丙酮、無水乙醚對其進行研究與試驗,通過合理方式做好工作。在選擇儀器設備的過程中,主要應用燒杯,三角瓶、往復式振蕩篩、無菌操作箱、旋轉蒸發儀設備、冷凍離心機設備、冷凍干燥機設備、超凈工作臺設備、電子分析天平設備、真空干燥箱設備等。在實際使用的過程中,需針對機械設備質量進行全面管理與嚴格協調,保證其使用價值,增強管理效果,滿足當前的實際使用要求,達到預期的處理目的。
對于斜面培養基而言,主要使用的為綜合PDA培養基,其中為去皮馬鈴薯(200g)、葡萄糖(20g)、瓊脂(20g)、水(1000ml),在120攝氏度的環境下滅菌30分鐘。選擇種子培養基,其中為土豆200g、葡萄糖30g、蛋白胨2g、酵母浸膏2g、磷酸二氫鉀(1g)、硫酸鎂(1g)、維生素B1(10mg)1片、水,在120攝氏度的環境中滅菌30分鐘。在選擇發酵培養基的過程中,其中為葡糖糖、玉米粉、麥麩、蛋白胨、酵母浸膏、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、維生素B1、水,在120攝氏度的環境中滅菌30分鐘。
1.2 試驗方式
在試驗的過程中,需做好種子培養工作,明確為液體的發酵培養方式,全面收集菌絲體,以便于提升試驗效果。
第一,在種子培養的過程中,需針對活化斜面的菌種進行分割,使其形成蠶豆大小的塊體,并在無菌環境中對其進行接種,以便于將其融入液體中更好的進行培養,將液體的劑量控制在250ml,將三角瓶的液量設置成為80ml,在28攝氏度的環境中保存七天左右。第二,在對液體發酵進行培養的過程中,可將已經培養成功的種子篩選10%的劑量,并接種在500ml劑量的三角瓶中,保證裝液量為180ml,并在相同條件之下對其進行繼續培養,時間為六天左右。第三,在收集菌絲的時候,應將發酵液放置在離心杯設備中,將其規格設計在4000r每分鐘左右,離心的時間為十分鐘,并針對菌絲進行沉淀處理,使用蒸餾水對其沖洗,保證實際處理的效果。同時,還要做好蒸餾水的沖洗工作,將其設置在六十攝氏度溫度環境中衡量重量,做好生物量的計算工作,保證可以提升處理效果,滿足菌絲的實際處理符合規定。第四,在胞外粗多糖提取的過程中,需針對過濾之后的發酵液實施真空濃縮處理,使其轉變成為原來體積的20%,并在濃縮期間,在發酵液中添加3倍左右體積的乙醇,保證在4攝氏度環境中放置處理,在過夜之后,需對發酵液進行離心處理,將規格設置在4000r每分鐘左右,離心時間為五分鐘,使其形成沉淀反應。針對沉淀冷凍干燥情況,獲得粗多糖提取物,然后對其獲得率進行計算,以此提升處理效果。
表1 正交實驗因素與水平分析
2 相關結果分析
在試驗之后,需針對結果進行全面的分析,明確各方面要求與原則,利用合理的方式解決問題,創建現代化與多元化的控制機制,保證能夠創建良好的營養條件。
2.1 不同碳源對營養條件的影響
在實際處理的過程中,可將葡萄糖試劑、可溶性淀粉產品、蔗糖產品、玉米粉產品與乳糖產品等融合在一起,替代培養基中的碳源,并保證其他成分沒有變化,以便于對生物量進行測量,保證結果的準確性與可靠性。在實際培養的過程,不同碳源會對菌絲的生長產生不同影響,應對其進行合理的分析與明確,根據菌絲生物量進行分析,并對玉米粉與蔗糖等全面了解。雖然將玉米粉作為碳源進行培養不能保證可溶性淀粉的使用效果,但是,能夠提升發酵液的處理水平,保證菌球的均勻性與合理性,明確具體的內容。對于玉米粉而言,其中含有較多核苷酸物質與纖維素物質,可以誘導靈芝中的胞外多糖的良好合成,明確具體的情況。在此期間,需針對培養成本進行綜合的探討,明確具體內容與要求,并將玉米粉作為碳源進行處理,以便于增強各方面的處理效果,協調相關工作之間的關系。
2.2 不同氮源對于營養條件的影響
在對營養條件進行優化的過程中,應選擇合理的碳源,并對其進行嚴格的控制,將蛋白胨成分、麥麩成分、氯化銨成分、硝酸銨成分等作為液態培養期間的培養基氮源,利用搖床對其進行,在成分不變的情況下,能夠更好的測定生物量與相關粗多糖的數量。經過相關研究可以得知,不同氮源對于松杉靈芝液體培養會造成一定影響,應合理篩選相關氮源進行處理,保證實際使用量。對于蛋白胨與麥麩成分而言,在使用期間多糖獲得率較高,由于麥麩成分在實際采購的過程中成本較高,因此,需對培養基的造價進行綜合探討,明確具體的多糖情況,并利用資源控制的方式對其處理,將麥麩作為最主要的氮源進行處理,以此增強分析與控制效果,滿足當前的發展需求[1]。
2.3 無機鹽對于菌絲生物量的影響
經過相關研究可以得知,在最合適的氮源與碳源之下,無機鹽會對菌絲的生物量產生一定影響,應明確具體成分的情況,并在成分不變的情況下,測定其中的粗多糖成分,明確含量信息與數據,保證工作效果。在實際處理期間,應添加少量的無機鹽成分,對其合理的研究與分析,明確成分特點[2]。
2.4 正交試驗對營養條件的影響
在實際培養的過程中,應科學使用正交試驗的方式對其處理,利用科學的培養基方式形成現代化的管理機制,在與無交試驗與正交試驗相互作用的情況下,形成準確的結果。在此期間,需針對玉米粉的濃度進行嚴格控制,保證麥麩的濃度符合相關規定,并合理使用搖瓶的方式對其處理,明確具體多糖獲得率,對其進行嚴格的分析,保證形成良好的營養條件[3]。
3 結束語
對于松杉靈芝液體發酵培養而言,與傳統培養方式相較的生產周期較短,省工省力,生物利用度高。且容易對其質量進行控制,只需針對培養液營養條件進行優化,從而得到優質的松杉靈芝產品。以便于將松杉靈芝產品應用在食品領域、藥品領域與化妝品領域中。
參考文獻
[1]于海洋,彌春霞,陳歡等.松杉靈芝液體發酵培養營養條件優化[J].北方園藝,2015(4):152-156.
[2]李愛欣,許利婷,張術影等.松杉靈芝發酵物對乙醇誘導小鼠胃潰瘍的保護作用研究[J].食品與發酵科技,2015,51(3):37-40,43.
[3]于海洋.松杉靈芝多糖的發酵和提取條件優化及抗氧化活性研究[D].牡丹江師范學院,2015.