8個不同產地絞股藍多糖含量的測定

吳秀麗 馬澤剛 鐘輝云

摘 要 為比較8個不同產地絞股藍中多糖含量的差異，采用水加熱回流提取法提取絞股藍中多糖，采用蒽酮-硫酸比色法測定不同產地絞股藍中多糖含量。結果發現，不同產地的絞股藍中多糖含量分別為7.85%、6.18%、7.47%、6.31%、4.84%、6.25%、6.04%、3.87%。本試驗建立的絞股藍中多糖含量測定方法簡便、穩定、可行，不同產地絞股藍中多糖含量存在差異，該結果為今后絞股藍的開發利用和深入研究提供一定的參考。

關鍵詞 絞股藍；多糖；含量測定；不同產地

中圖分類號：R284.1 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.09.055

絞股藍[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.） Makino]系葫蘆科（Cucurbitaceae）絞股藍屬（Gynostemma）多年生草質藤本植物[1]?！吨兴幋筠o典》名七葉膽，別名小苦藥、遍地生根、五葉參，日本名甘茶蔓等[2-4]。該屬植物基源復雜、品種繁多，我國有14種和3變種[5]，廣泛分布于陜西、四川、湖北、福建、云南等地。絞股藍中含有皂苷、多糖、黃酮類等化合物及鐵、鋅、銅、錳、硒等20多種微量元素[6]，有“南方人參”“第二人參”的美譽[7-9]，其中絞股藍皂苷是絞股藍主要的藥效成分[10-11]，國內外對其研究較多。目前對絞股藍多糖的研究相對較少，但有研究表明絞股藍多糖具有抗癌、抗疲勞、抗氧化、抗衰老等顯著作用[12]。本研究采用蒽酮-硫酸法比較了8個不同產地絞股藍多糖的含量，以期為絞股藍今后的開發利用和深入研究提供一定的參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

7200型可見分光光度計（尤尼科儀器有限公司）。

1.2 材料

8種不同產地的絞股藍購自于成都藥材市場，經四川衛生康復職業學院副主任藥師鐘輝云鑒定為葫蘆科絞股藍屬植物絞股藍；所用試劑均為國產分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

準確稱取葡萄糖對照品22.5 mg、12.5 mg、8.3 mg、6.2 mg、3.1 mg加水定容至50 mL。

2.2 供試品溶液的配制

分別取1 g不同產地絞股藍干燥粗粉，加10 mL 95%乙醇，80 ℃條件下回流提取2次，每次2 h，過濾。藥渣用10 mL水90 ℃回流提取2次，每次2 h，過濾，濾液定容至25 mL，得供試品溶液。

2.3 顯色劑配制

取硫酸190 mL，緩慢加入含有約50 mL水的250 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。準確稱取蒽酮50 mg置于50 mL容量瓶中，逐漸加入上述硫酸溶液至刻度，搖勻即得。

2.4 線性關系的考察

分別準確量取1 mL對照品溶液，加入 5 m L顯色劑，同法操作為空白對照，然后沸水浴，10 min后冷卻至室溫，在625 nm處測吸光度[13]。以吸光度為縱坐標，葡萄糖的濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程Y=

2 278.3X+0.407 4，R2=0.999 1，線性范圍62～450 μg/mL。

2.5 精密度試驗

準確量取同一對照品溶液，依2.4項下方法操作，連續測定5次，對照品吸光度RSD為0.53%。

2.6 穩定性試驗

準確量取同一供試品溶液，按2.4項下方法操作，分別于0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h測定吸光度，樣品吸光度RSD為0.82%，表明供試品溶液在5 h內穩定。

2.7 重復性試驗

準確量取同一供試品溶液6份，依2.4項下方法操作，在相同條件下測定并計算多糖的含量，結果RSD為0.75%。

2.8 回收率試驗

取63 mg葡萄糖加入1 g云南絞股藍中，按2.2項操作，平行6份。依2.4項下方法操作，樣品吸光度RSD為0.63%。

2.9 多糖的含量測定

按照2.2項下制備供試品溶液，分別準確量取1 mL，按2.4項下方法測定吸光度，由回歸方程計算多糖含量，不同產地絞股藍中多糖的含量見表1。

由表1可見，多糖由多至少依次為陜西、內蒙古、云南、江西、四川、廣東、湖北、福建。

3 討論

多糖是絞股藍藥理活性的有效成分，多糖的開發利用具有廣闊的市場前景，選擇多糖含量高的絞股藍品種可提高絞股藍的經濟價值。采用水加熱回流提取法對絞股藍中多糖進行提取，采用蒽酮-硫酸比色法對不同產地絞股藍中多糖含量進行測定，不同產地絞股藍總多糖含量為：陜西>內蒙古>云南>江西>四川>廣東>湖北>福建。不同產地的絞股藍多糖含量存在一定的差異，可能是由于生長環境的不同造成的，比較8個不同產地絞股藍多糖含量，對今后絞股藍的開發利用和深入研究有一定的參考意義。

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（責任編輯：趙中正）