進展期和靜止期尋常型銀屑病患者Th17細胞表達差異的Meta分析

喬 霞 陳官芝 趙正偉

尋常型銀屑病按皮損表現分為三期：進展期、靜止期和退行期。該病確切病因尚未清楚，大多數研究發現銀屑病發病機制的核心是免疫功能異常，主要是T細胞為主的免疫功能紊亂。而Th17細胞是一種新型的CD4+T細胞，越來越多的研究支持Th17細胞是銀屑病發病中的關鍵性效應細胞[1,2]。

輔助性T細胞17(T helper cell 17，Th17)是近年來發現的一種不同于Th1、Th2細胞的CD4+效應性T細胞亞群，通過分泌IL-17、IL-22、IL-21等多種效應因子介導炎癥反應而發揮作用，與自身免疫性疾病、腫瘤及感染性疾病的發生機制密切相關。

Th17細胞與銀屑病相關性研究有很多，但與進展期及靜止期相關性的研究較少，我們對此進行全面、系統的分析，探討進展期和靜止期銀屑病患者外周血及皮損組織中Th17細胞表達的差異，進一步揭示Th17細胞與尋常型銀屑病病情進展的關系。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 研究資料 納入尋常型銀屑病與外周血及皮損組織Th17細胞表達關系的臨床對照研究的相關臨床研究文獻。

1.1.2 觀察對象 為臨床確診為尋常型銀屑病，并根據臨床特征診斷為進展期及靜止期銀屑病的患者，具體診斷標準見《臨床皮膚病學》[3]。

1.1.3 測量指標 外周血及皮損組織中Th17細胞的比例。

1.1.4 排除標準 ①關于尋常型銀屑病與Th17細胞關系的綜述、個案報道及動物研究；②重復的研究；③未進行尋常型銀屑病分期的研究；④病例中合并本病以外的系統性或免疫性疾病以及其他皮膚病、合并2周內接受系統治療或1周內大面積應用強效糖皮質激素。

1.2 檢索策略 以“銀屑病、Th17”為檢索詞檢索中國知網、萬方、維普、CBM數據庫，以“psoriasis、psoriases、Th17、T helper cell 17”為檢索詞檢索PubMed、Embase數據庫所有文獻。

1.3 質量評價 采用Jadad評分量表從隨機、盲法、失訪三個方面對各研究進行評價，由2位作者進行質量評價，分歧通過討論以及查閱相關資料解決，匯總后得出最終評分結果。

1.4 資料提取 由一位作者提取和錄入資料，另一位作者進行核對。

1.5 統計學方法 采用Rev Man5.3進行Meta分析。計量資料采用SMD及其95%CI，計數資料采用RR及其95%CI為相關性分析的統計量。首先對納入研究進行臨床異質性和方法學異質性分析，按照臨床同質性和方法學同質性對各研究進行亞組分析，然后分析亞組內的統計學異質性。統計學異質性分析采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.1；同時采用I2定量分析異質性大小，其檢驗水準設定為50%，即I2> 50%時，認為研究結果間的異質性較大，結果采用隨機效應模型合并分析，并進行亞組分析進一步討論。無統計學異質性的研究結果采用固定效應模型進行合并分析。

2 結果

2.1 結果檢索 初檢到985篇文獻，通過閱讀題目和摘要，排除無法獲取以及重復的文獻，最終納入12篇，所有納入文獻均以中文或英文發表。

2.2 納入研究文獻的特點 見表1。納入文獻的例數從9～68例不等，共納入尋常型銀屑病834例，其中進展期419例，靜止期415例。上述研究采用流式細胞學或雙標記免疫熒光法檢測Th17細胞比例，均采用病例對照研究設計。

2.3 納入文獻的質量評價 根據Jadad評分量表對12篇文獻由2人進行質量評分，結果兩人評分一致(1～3分視為低質量，4～7分視為高質量)，見表2。

2.4 Meta分析結果 所納入的12項研究中，有1項研究采用雙標記免疫熒光法對Th17細胞進行定量測定，其余研究均采用流式細胞學檢測方法。各研究結果之間差異性較大(2.12%～53.83%)，有統計學異質性(P<0.00001，I2=96%)，采用隨機效應模型進行合并，結果顯示進展期銀屑病組患者外周血及皮損組織中Th17細胞比例明顯高于靜止期銀屑病組，有統計學差異[SMD=2.15,95%CI(1.28,3.02)]。見圖1。

表1 納入研究文獻的基本特征

表2 納入研究文獻的質量評價

圖1 外周血和皮損組織中Th17細胞表達差異的Meta分析

圖2 皮損組織中Th17細胞的比例的Meta分析

圖3 外周血中Th17細胞的比例的Meta分析

2.4.1 以皮損組織為標本的研究 1項研究采用免疫熒光法對銀屑病患者皮損組織中Th17細胞的比例進行測定，結果顯示進展期銀屑病患者皮損組織中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統計學意義[SMD合并=3.77,95%CI(1.92,5.62)]。見圖2。

2.4.2 以外周血為標本的研究 11項研究均采用流式細胞學法對銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例定量測定，各研究間差異較大，研究間有統計學異質性，(P<0.00001，I2=96%)，采用隨機效應模型進行分析，結果顯示進展期銀屑病患者皮損組織中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統計學意義[SMD合并=2.04,95%CI(1.14,2.93)]。見圖3。按觀察指標的表示方法不同，分為四個亞組：Th17/CD3+T細胞組納入3個研究，研究間無統計學異質性(P=0.85，I2=0%)，合并結果分析顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例有高于靜止期銀屑病組的趨勢，但差異無統計學意義[SMD合并=0.29,95%CI(-0,05,0.63)]；Th17/CD4+T細胞組納入2個研究，各研究間無統計學異質性(P=0.21，I2=37%)，合并結果分析顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統計學意義[SMD合并=1.53,95%CI(0.88,2.18)]；Th17細胞的比例組納入4個研究，各研究結果差異較大(3.26～18.18%)，有統計學異質性(P<0.00001，I2=95%)，合并分析結果顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統計學意義[SMD合并=2.79,95%CI(1.61,3.97)]；CD4+IL-17+T細胞的比例組納入2個研究，研究間有統計學異質性(P<0.00001，I2=98%)，結果顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例有高于靜止期銀屑病組的趨勢，但差異無統計學意義[SMD合并=6.16,95%CI(-6.12,18.45)]。見圖3。

3 討論

3.1 本系統評價的局限性 本次研究納入文獻質量略差，所有文獻均提到隨機選擇對象，但并未提及具體的隨機方法，并且所有文獻均未提及測量結果是否采用盲法，有3篇文獻[4，7，12]未詳細闡述具體的觀察指標。因此，所有文獻均存在選擇性偏倚及測量偏倚可能性。

3.2 結論 本系統評價納入研究主要采用流式細胞術(FlowCytometry，FCM)檢測Th17細胞的濃度，此方法具有速度快、精確度高、準確性好等優點，缺點是結果的重復性欠佳，且操作技術要求高，使測定值差異較大，且由于抗原質量穩定性和抗體親和力不一，使測定值差異較大。檢測時的操作過程亦未規范化，檢測值各不相同，缺乏良好的重復性，可能導致測量性偏倚。這也是研究結果不一致的可能原因。

本研究表明，Th17細胞與銀屑病病情進展有一定關系，其在進展期銀屑病患者的外周血及皮損組織中比例高于靜止期銀屑病患者外周血中的比例，且差異有統計學意義。但由于各研究可能存在發表偏倚，所以未來研究應致力于提高隨機對照臨床試驗(randomized controlled clinical trials, RCT)的方法學質量，做好樣本估算，隨機分組，做好分配隱藏，采用盲法研究。

本次研究僅納入12項病例對照研究，如需更準確的了解Th17細胞與銀屑病病情進展的關系還需要更多、更高質量的隨機對照臨床試驗來提供更高質量的證據。

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