香蔥中硒的檢測(cè)方法

朱巧 范菲菲

摘 要 近年來，富硒產(chǎn)品大批量投入市場(chǎng)，已成為人們廣泛關(guān)注的一個(gè)熱議話題，而在日常生活中，人們對(duì)硒的膳食補(bǔ)充幾乎全部來自食物，因此測(cè)定食品中的硒含量具有重要的意義。鑒于此，在介紹硒及富硒香蔥的生物學(xué)功能的基礎(chǔ)上，研究并討論了常見香蔥中硒的幾種檢測(cè)方法。

關(guān)鍵詞 硒;香蔥;檢測(cè)方法

中圖分類號(hào)：TS255 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.32.074

硒是一種人體必需微量元素，在人體組織中發(fā)揮著抗癌、預(yù)防多種疾病的作用。適量補(bǔ)硒具有增強(qiáng)人體免疫力、清除體內(nèi)自由基、拮抗重金屬等多種生物學(xué)功能。作為人體的14種必需微量元素之一，硒被譽(yù)為“生命火種”“抗癌之王”，對(duì)多種癌癥具有抑制和防護(hù)的作用。我國(guó)大部分地區(qū)都處于缺硒狀態(tài)，容易導(dǎo)致多種疾病，通過膳食是補(bǔ)硒的重要途徑之一，我國(guó)市場(chǎng)上近年來也出現(xiàn)許多富硒食品，如：富硒大米、富硒香蔥等。

香蒽作為餐桌上的必備食材之一，具有濃烈的香味，可以刺激食欲，受到廣大群眾的青睞。蔥有大蔥、香蔥、小蔥和青蔥之分，而香蔥葉嫩、性溫，含有豐富的礦物質(zhì)、胡蘿卜素以及多種微量元素，在日常餐桌上作為生食或者拌涼菜的調(diào)味品，具有健脾開胃、增進(jìn)食欲、除腥殺菌、提味增香和降壓消脂等功能。在人們?nèi)粘５氖匙V中，香蔥是不可缺少的調(diào)料品，市場(chǎng)對(duì)香蔥的需求也愈來愈大，香蔥中對(duì)人體有益的因素因此也變得被大眾熟知，食品安全也成為廣大公民關(guān)注的一大焦點(diǎn)，因此測(cè)定香蔥中硒的含量也變得尤為重要。

1 原子吸收光譜法（AAS）

在傳統(tǒng)的測(cè)硒方法中，AAS是主要方法之一，該方法由于具有靈明度高、取樣少、預(yù)處理簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)而獲得很多科研者的認(rèn)可，而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意。常見的方法有石墨爐原子吸收法、氫化物發(fā)生-原子吸收法等。

石墨爐原子吸收法（GF-AAS）靈明度高，但基體干擾復(fù)雜，消除基體干擾和選擇最佳條件是確保測(cè)定結(jié)果可靠的關(guān)鍵。而對(duì)于消除基體干擾，常用的措施就是基體改進(jìn)技術(shù)，它是使硒轉(zhuǎn)變?yōu)闊岱€(wěn)定化合物而提高原子化溫度或者將基體轉(zhuǎn)變?yōu)橐讚]發(fā)物質(zhì)，從而消除背景吸收，同時(shí)減少揮發(fā)。李明華等[1]使用10 mL 1 000 mg·L-1的鎳作基體改進(jìn)劑測(cè)定富硒食品中的硒含量。還有一種消除基體干擾的措施就是塞曼背景扣除，主要是消除對(duì)測(cè)硒干擾最大的鐵和磷，馮尚彩等[2]就采用硝酸鈀作為硒的改進(jìn)劑，用塞曼效應(yīng)扣除背景干擾，對(duì)消化后的血樣進(jìn)行測(cè)定。

氫化物發(fā)生-原子吸收法（HG-AAS）相對(duì)GF-AAS來說，其最大的特點(diǎn)在于精密度好，可以進(jìn)行大批量樣品測(cè)定，而且回收率高。余萬(wàn)俊等[3]利用HG-AAS測(cè)定了食品中的硒含量，其重復(fù)測(cè)定的變異系數(shù)小于10%，而且加入食品樣品中的無機(jī)硒回收率達(dá)到83%～112%，結(jié)果令人滿意。

2 原子熒光光譜法（AFS）

在現(xiàn)行中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB 5009.93—2017）食品中硒的測(cè)定中，原子熒光光譜法（Atomic Fluorescence Spectrometry）是第一法，是利用物質(zhì)經(jīng)原子化產(chǎn)生的蒸汽，利用被特征譜線吸收后發(fā)射出的熒光強(qiáng)度與硒濃度成正比的關(guān)系來測(cè)定硒，其中，氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法被用來測(cè)食品中的硒含量，具有簡(jiǎn)單有效、精密度高的優(yōu)點(diǎn)。其原理是將已粉碎的樣品先進(jìn)行微波消解，將樣品中的硒還原成Se（Ⅳ），使用硼氫化鉀（KBH4）作為還原劑，將Se（Ⅳ）在鹽酸介質(zhì)中還原成SeH4。覃東立等[4]在實(shí)驗(yàn)條件良好的情況下，采用氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法對(duì)水產(chǎn)品中的硒進(jìn)行測(cè)定，其線性范圍為0.5～20 μg·L-1，最低檢出限為0.06 μg·L-1，精密度（RSD）達(dá)到5%以內(nèi)。該法干擾少，測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，此外還可以用來測(cè)植物中的硒含量。茍?bào)w忠[5]等用該法對(duì)國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（灌木枝葉，GSV-1）進(jìn)行平行樣品多次分析測(cè)定，回收率為98.9%～101%，精密度為0.73%，線性關(guān)系為r=1.000 0。

3 分光光度法

分光光度法它以朗伯-比爾定律為基礎(chǔ)，即指被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光吸光度，是對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析的一種方法。在分光光度法測(cè)定中，3，3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）試法應(yīng)用最廣。賀立東[6]在HCL介質(zhì)中，使用3，3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）與硒反應(yīng)，生成黃色絡(luò)合物，測(cè)得硒的含量為0.5～50 μg·L-1，回收率為98%～101%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3%。熒光分光光度法最先使用的試劑也是DAB，不過現(xiàn)在被DAN[2，3-二氨基荼（簡(jiǎn)稱DAN）]所取代，它是利用Se（Ⅳ）與2，3-二氨基萘（DAN）在經(jīng)酸消化后生成4，5-苯并苤硒腦，以環(huán)己烷萃取該物質(zhì)，并于特定波長(zhǎng)內(nèi)的對(duì)硒進(jìn)行定量分析。紀(jì)慶憲等[7]使用該方法測(cè)定海藻中的硒含量。

4 電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）

電感耦合等離子體質(zhì)譜是近年來新興的探索痕量元素硒的分析技術(shù)，因具有樣品前處理方法豐富、提高復(fù)雜基體硒化學(xué)前處理的回收率、多元素同時(shí)檢測(cè)、同時(shí)降低檢測(cè)限等優(yōu)點(diǎn)，自20世紀(jì)80年代研發(fā)以來到現(xiàn)階段，在金屬方面已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用。

在ICP-MS測(cè)定的過程中，實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)受很多因素的干擾，其中，選擇消化劑是很關(guān)鍵的。因?yàn)檫^氧化氫是一種強(qiáng)氧化劑，與硝酸共用能提升消化能力，將有機(jī)質(zhì)完全破壞，所以試驗(yàn)過程優(yōu)先選擇HNO3+H2O2作為消解試劑。除此之外，質(zhì)譜干擾也是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一大因素，這個(gè)干擾主要有質(zhì)譜干擾和非質(zhì)譜干擾。質(zhì)譜干擾主要是氧化物和雙電荷干擾以及多原子干擾等，解決措施可以采用優(yōu)化實(shí)驗(yàn)儀器條件和動(dòng)態(tài)反應(yīng)池。非質(zhì)譜干擾主要是基體干擾，稀釋樣品是克服基體效應(yīng)的最有效方法，另外，采用內(nèi)標(biāo)校正，用內(nèi)標(biāo)定量可以克服儀器漂移，保證結(jié)果的可靠性[8]。劉軍等[9]采用微波消解-電感耦合等離子體質(zhì)普法測(cè)定靈芝孢子粉中的鍺和硒，在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件的情況下，以115In作內(nèi)標(biāo)，測(cè)得硒的檢出限為0.000 5 mg·L-1，標(biāo)準(zhǔn)曲線為0.001～0.25 mg·L-1（r=0.999 9），相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為1.7%，回收率達(dá)到93%～104%。

5 電化學(xué)分析法

電化學(xué)分析法是利用物質(zhì)在溶液中的電化學(xué)性質(zhì)和變化規(guī)律進(jìn)行分析的一類方法，是測(cè)定食品中的痕量硒的方法之一。測(cè)定硒的電化學(xué)分析法主要有極譜法、溶出伏安法以及電位分析法，其中，前兩種方法應(yīng)用范圍廣，靈敏度高，選擇性好。

溶出伏安法有陰極溶出伏安法和陽(yáng)極溶出伏安法之分，在實(shí)驗(yàn)過程中可以加入Cu來提高靈敏度[10]，但引入的量很關(guān)鍵。此外，在實(shí)驗(yàn)中加入Ag2+、Rh（Ⅳ）也可提高實(shí)驗(yàn)靈敏度，而對(duì)于極譜法，它是通過電解稀溶液得出極譜圖，對(duì)硒進(jìn)行定量分析。它需要在一定的酸性介質(zhì)中，使其他形態(tài)的硒變?yōu)闊o機(jī)硒，王瑞俠等[11]使用該方法測(cè)定食品中的硒含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明其催化波與硒含量呈良好的線性關(guān)系，相對(duì)偏差為2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意。

6 其他方法

目前，對(duì)于硒的檢測(cè)方法，除上述方法外，還有其他很多方法可以測(cè)定食品中的硒含量，根據(jù)硒元素的形態(tài)以及不同的方法，有多種不同的測(cè)定方法[12-14]。由于食品中硒的形態(tài)復(fù)雜多樣，很多檢測(cè)技術(shù)對(duì)無機(jī)硒的形態(tài)分析和含量測(cè)定已經(jīng)較為成熟，但有機(jī)硒的分析方法還需進(jìn)一步完善，所以現(xiàn)今更多側(cè)重于應(yīng)用聯(lián)用技術(shù)，如：高效液相色譜-ICP-MS（HPLC-ICP-MS）、氣相色譜-原子等離子發(fā)射光譜（GC-AEC）、離子色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜法（IC-ICP-MS）等多維技術(shù)聯(lián)用[15-18]，將分離方法和檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行有機(jī)結(jié)合，使硒的形態(tài)分析、檢測(cè)技術(shù)更加深入和廣泛。

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