血清軟骨寡聚基質(zhì)蛋白對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值

呂超昌，馮少杰，張續(xù)德，劉鳳霞

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)是近年來研究較多的一種軟骨代謝標(biāo)記物[1]，主要由軟骨細(xì)胞和滑膜細(xì)胞分泌，表達(dá)于所有關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)中，包括韌帶、肌腱和滑膜等。關(guān)節(jié)軟骨一旦損傷，COMP首先釋放入滑液，隨后進(jìn)入血液。因此，血清和關(guān)節(jié)液中的COMP 水平可以反映軟骨的降解破壞程度和滑膜炎的嚴(yán)重程度[2]。已有研究發(fā)現(xiàn)，血清COMP水平可以作為風(fēng)濕性疾病關(guān)節(jié)軟骨破壞的新型標(biāo)記物，并且能作為觀察關(guān)節(jié)炎患者療效的指標(biāo)[3]。本研究采用ELISA方法，定量檢測(cè)RA患者和健康人群中的COMP及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(anti-cyclic citrullinated peptide antibody，抗CCP抗體)水平，評(píng)價(jià)COMP對(duì)RA的診斷價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取2011-01至2013-02在山東濰坊市人民醫(yī)院就診的RA患者82例，均符合2010年修訂后的ACR推薦的RA診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，其中男21例，女61例，平均(49.93±11.15)歲，且符合下列要求：年齡>18歲，未經(jīng)任何治療，無(wú)其他風(fēng)濕性疾病或嚴(yán)重疾病，自愿參加本次實(shí)驗(yàn)，在濰坊居住時(shí)間≥1年。健康對(duì)照人群選取同一時(shí)間內(nèi)在山東濰坊市人民醫(yī)院查體中心進(jìn)行體檢的健康人34例，其中男10例，女24例，平均(47.60±15.49)歲，且符合下列要求：無(wú)免疫風(fēng)濕疾病、腫瘤、慢性感染等病史，與患者無(wú)親屬關(guān)系，與患者平均年齡差距在2歲以內(nèi)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，所有對(duì)象均簽署了知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 分組 根據(jù)體格、實(shí)驗(yàn)室檢查將患者分為活動(dòng)期組和緩解期組。活動(dòng)期組患者滿足下列標(biāo)準(zhǔn)中的4或5條：(1)晨僵時(shí)間≥1 h；(2)有中度靜息痛；(3)腫脹關(guān)節(jié)≥3個(gè)；(4)壓痛關(guān)節(jié)≥8個(gè)；(5)紅細(xì)胞沉降率(ESR)>30 mm/h。緩解期患者滿足下列要求且時(shí)間超過2個(gè)月：(1)晨僵時(shí)間≤15 min；(2)無(wú)靜息痛；(3)無(wú)關(guān)節(jié)腫脹和壓痛；(4)ESR<30 mm/h(男)或20 mm/h(女)。

根據(jù)患者手部X線表現(xiàn)和參考文獻(xiàn)[5，6]將患者分為兩組：骨關(guān)節(jié)異常組和骨關(guān)節(jié)無(wú)異常組。

1.2.2 血樣采集及試劑來源 所有患者(治療前)及健康人群采集靜脈血5 ml入含有分離膠的真空黃頭管，室溫自然凝固20 min，3800 r/min離心20 min后將血清移至EP管-80 ℃保存至待檢。COMP試劑盒由美國(guó)神谷生物公司提供，抗CCP抗體試劑盒和標(biāo)準(zhǔn)品均由上海富藥科芯生物技術(shù)有限公司提供。兩種試劑均采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法測(cè)定, 酶標(biāo)儀判讀結(jié)果。所有操作步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書。COMP和抗CCP抗體最低檢測(cè)濃度分別為0.4 ng/ml和0.1 U/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)或Mann-Whitney U-test。繪制ROC曲線，選取最佳截?cái)嘀挡⒂?jì)算AUC、靈敏度和特異度，分析COMP和抗CCP抗體的最佳截?cái)嘀岛驮\斷效果。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 COMP、抗CCP抗體、ESR、CRP、RF水平的比較 RA患者COMP、抗CCP抗體水平高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；ESR、CRP、RF差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。

分組例數(shù)COMP(ng/ml)抗CCP抗體(RU/ml)ESR(mm/h)CRP(mg/dl)RF(U/ml)RA組8229.51±9.2165.57±58.6210.94±6.854.90±3.30125.10±65.84健康組3417.85±5.5521.48±24.458.35±6.533.87±2.76101.50±60.36t8.375.721.881.601.80P0.0000.0000.0630.1120.075

2.2 RA患者活動(dòng)期和緩解期COMP水平的比較 46例RA患者活動(dòng)期COMP水平(33.08±8.80) ng/ml和36例緩解期COMP水平(24.94±8.80) ng/ml的比較得出兩組COMP水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.4，P<0.05)，RA患者COMP水平活動(dòng)期組高于緩解期組。

2.3 RA患者骨質(zhì)破壞組和骨質(zhì)未破壞組COMP水平的比較 44例RA患者骨關(guān)節(jié)異常組COMP水平(31.77±8.21) ng/ml高于38例骨關(guān)節(jié)無(wú)異常組COMP水平(26.88±9.71) ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.471，P=0.0156)。

2.4 ROC曲線分析 COMP檢測(cè)的ROC曲線下面積為0.864(95%CI為0.790,0.937)，最佳截?cái)嘀禐?1.51 ng/ml，其對(duì)RA患者診斷的靈敏度為0.817，特異度為0.882;抗CCP抗體ROC曲線下面積為0.746(95%CI為0.674,0.854)，最佳截?cái)嘀禐?4.76 RU/ml，其對(duì)RA患者診斷的敏感性為0.610，特異性為0.824(表2)。

表2 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎COMP和抗CCP抗體檢測(cè)的

3 討 論

RA是以侵蝕性、對(duì)稱性多關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的慢性、系統(tǒng)性自身免疫性病，影響世界0.5%～1.0%的人口[7]，最顯著的特點(diǎn)是外周關(guān)節(jié)出現(xiàn)炎性滑膜炎[8]，常伴隨有關(guān)節(jié)軟骨和骨關(guān)節(jié)的進(jìn)展性和不可逆性損傷，可引起關(guān)節(jié)畸形和致殘，因此早期診斷對(duì)RA治療和預(yù)后具有重要影響[9]。COMP由二巰鍵相連的五聚蛋白, 屬于凝血栓蛋白家族, 是一類軟骨基質(zhì)破壞降解過程中釋放到血液和滑膜的大分子物質(zhì)[10]，成為研究骨與關(guān)節(jié)損傷的熱點(diǎn)。本研究發(fā)現(xiàn)：(1)RA患者COMP水平高于健康組，且活動(dòng)期組高于緩解期組、骨關(guān)節(jié)異常組高于骨關(guān)節(jié)無(wú)異常組，表明COMP不僅可以區(qū)分RA患者和健康人群，還可判斷疾病的嚴(yán)重性，與國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道一致[11-14]。雖然有研究表明RA患者的COMP水平顯著高于健康對(duì)照人群，在早期骨關(guān)節(jié)損害患者中也有意義，但其實(shí)驗(yàn)結(jié)果受年齡、病程、體質(zhì)指數(shù)等影響較大[15]。(2)RA患者和正常人ESR、CRP、RF差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與沈榮春等[16]研究結(jié)果一致。雖然ESR和CRP可以反映RA的疾病活動(dòng)度，但以此為實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)來診斷RA時(shí)其靈敏度和特異度較差[17]。(3)經(jīng)ROC曲線分析得出：當(dāng)COMP以21.51 ng/ml為最佳截?cái)嘀祦碓\斷和排除RA患者時(shí)，其AUC(0.864)、靈敏度(0.817)、特異度(0.882)均高于抗CCP抗體以34.76 RU/ml為最佳截?cái)嘀祦碓\斷和排除RA患者時(shí)的AUC(0.764)、靈敏度(0.610)、特異度(0.824)。但也有研究結(jié)果顯示COMP為指標(biāo)來診斷RA時(shí)只有15%～48%的靈敏度和66%～69%的特異度[18]，因此COMP作為診斷指標(biāo)的實(shí)用性仍需研究[19]。

綜上所述，本研究首次證明用COMP的最佳截?cái)嘀禐?1.51 ng/ml來鑒別RA患者和健康人群，推測(cè)COMP可以作為RA患者實(shí)驗(yàn)室診斷的最新指標(biāo)，但需要注意COMP水平受肌肉含量、年齡、性別、飲食等因素的影響[20]。

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