玉米須水提取物對2型糖尿病小鼠的降血糖作用研究

黨 婷，曹 燕，李 雯，樊一橋

（中國藥科大學(xué)，江蘇 南京 210009）

研究發(fā)現(xiàn)，玉米須里的黃酮、皂苷、多糖、生物堿、脂肪油、多種維生素和氨基酸等活性成分，具有降糖降壓、益氣生精、滋腎養(yǎng)陰、清熱利尿等藥理作用[1]。本實(shí)驗(yàn)通過腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）的方法構(gòu)建2型糖尿病小鼠模型，探究玉米須水提取物對2型糖尿病小鼠的影響，為玉米須的降血糖作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品與器材

玉米須（湖北金貴中藥飲片有限公司，產(chǎn)品批號：A170101，為成熟期干燥品）。STZ（Sigma公司，產(chǎn)品批號：WXBC2544V）；鹽酸二甲雙胍片（中美上海施貴寶制藥有限公司，產(chǎn)品批號：H20023370，規(guī)格 0.5 g/片×20 片/瓶）；檸檬酸（分析純，南京化學(xué)試劑有限公司，生產(chǎn)批號：071130675）；檸檬酸二鈉（分析純，南京化學(xué)試劑有限公司）；血糖儀及試紙（三諾生物傳感股份有限公司GA-3型，生產(chǎn)批號：170477）；低溫恒溫反應(yīng)鍋（產(chǎn)品型號DFV-S/30，南京大衛(wèi)儀器設(shè)備有限公司）；循環(huán)水真空泵（南京大衛(wèi)儀器設(shè)備有限公司，SHB-3A）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級ICR雄性小鼠，體重（20±2）g，周齡4周，購自南京市江寧區(qū)青龍山動(dòng)物繁殖場，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證：SCXK（蘇）2017-0001。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 玉米須水提取物的制備

稱取500 g玉米須，切短，在室溫下10倍量水中浸泡約10 h，80℃水浴下浸提2次，每次浸提3 h后過濾，合并兩次濾液，于80℃水浴旋蒸并真空干燥，保存于-5℃條件下備用。使用時(shí)取適量加蒸餾水溶解配制成0.021 3 g/ml的溶液[2]。

2.2 STZ檸檬酸緩沖液的配制

2.2.1 檸檬酸緩沖液的配制 將2.10 g檸檬酸加入100 ml蒸餾水中配成A液；將檸檬酸二鈉2.94 g加入100 ml蒸餾水配成B液。

2.2.2 STZ檸檬酸緩沖液的配制 使用時(shí)將A、B液以1∶1的比

例混合，加入STZ配制成0.01 g/ml的STZ檸檬酸緩沖液。

2.3 2型糖尿病小鼠模型的構(gòu)建

SPF級ICR雄性小鼠60只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后分成6組，每組10只，每天稱重并記錄。其中，5組禁食12 h后，按照60 mg/kg的劑量腹腔注射STZ，第6組作為正常對照組，注射等量STZ檸檬酸緩沖液，均連續(xù)注射5天。STZ檸檬酸緩沖液配制完成后須于30 min內(nèi)注射完畢，之后正常飲食和飲水[3]。STZ檸檬酸緩沖液全部注射完成后的第二天，取小鼠尾部靜脈血檢測非空腹血糖值，如＞16.7 mmol/L視為2型糖尿病小鼠模型造模成功[2]。

2.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

選取造模成功的50只小鼠按體重隨機(jī)分為模型對照組，二甲雙胍組，玉米須低劑量組[150mg/（kg·d）]，玉米須中劑量組[300 mg/（kg·d）]，玉米須高劑量組[600 mg/（kg·d）]。正常對照組給予0.2 ml/d生理鹽水灌胃，二甲雙胍組以200 mg/（kg·d）玉米須水提取物灌胃，玉米須低、中、高劑量組亦按上述劑量給藥，連續(xù)14天。

2.5 檢測指標(biāo)

2.5.1 一般情況 每天觀察小鼠狀態(tài)，如外觀體征、行為活動(dòng)、糞便性狀等。

2.5.2 血糖 建模成功后每4天檢測一次血糖。

2.5.3 體重 實(shí)驗(yàn)期間每天監(jiān)測小鼠體重并記錄。

2.5.4 進(jìn)食量 每天給藥之前稱重每組所剩飼料，之后各組給予等量且足夠的飼料。

2.6 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有顯著性。

3 結(jié)果

3.1 玉米須水提取物對2型糖尿病小鼠進(jìn)食量的影響

與正常對照組相比，給藥第14天時(shí)，模型對照組小鼠進(jìn)食量顯著增加（P＜0.01）。與模型對照組相比，給藥第14天時(shí)，二甲雙胍組、玉米須高劑量組小鼠的進(jìn)食量均顯著減少（P＜0.05）；而玉米須低、中劑量組小鼠的進(jìn)食量無明顯變化（見圖1）。

圖1 玉米須水提取物對小鼠進(jìn)食量的影響

3.2 玉米須水提取物對2型糖尿病小鼠體重的影響

給藥14 d時(shí)，二甲雙胍組小鼠體重與模型對照組有顯著性差異（P＜0.01）；玉米須水提取物雖能緩解2型糖尿病小鼠體重的下降趨勢，但差異不明顯（見圖2）。

圖2 玉米須水提取物對2型糖尿病小鼠體重的影響

3.3 玉米須水提取物對2型糖尿病小鼠血糖的影響

模型對照組小鼠血糖值在給藥第0、4、8、14天時(shí)均明顯高于正常對照組（P＜0.01）。在建模后即給藥（第0天）時(shí)，模型對照組，二甲雙胍組，玉米須低、中、高劑量組血糖值均無顯著性差異。與模型對照組相比，給藥第8、14天時(shí)，二甲雙胍組和玉米須高劑量組小鼠血糖值顯著降低（P＜0.01）。給藥第14天時(shí)，玉米須中劑量組小鼠與模型對照組相比，血糖值顯著降低（P＜0.01），見表 1。

表1 玉米須水提取物對小鼠非空腹血糖的影響（±s，mmol/L）

表1 玉米須水提取物對小鼠非空腹血糖的影響（±s，mmol/L）

注：與模型對照組比較，*P＜0.01，**P＜0.05

組別 第4天5.32±0.42*27.38±2.22 21.63±1.24*27.62±2.38 27.94±2.10 26.37±3.14**第0天正常對照組模型對照組二甲雙胍組玉米須低劑量組玉米須中劑量組玉米須高劑量組5.28±0.88*17.91±0.98 18.14±0.95 19.83±2.86 19.00±1.42 19.41±2.20第8天5.02±0.49*27.65±3.26 19.52±7.25*28.61±2.92 25.67±3.03 25.44±1.70*第14天5.42±0.28*29.07±4.53 18.83±4.58*28.68±2.18 24.81±1.94*24.00±0.82*

4 討論

近年來，糖尿病發(fā)病率不斷升高，并且由于飲食結(jié)構(gòu)不合理以及其他因素（如環(huán)境影響）使得該病逐漸呈現(xiàn)發(fā)病人群年輕化、平民化趨勢[4]。鏈脲佐菌素是一種胰島β細(xì)胞毒劑，可特異性損壞胰島β細(xì)胞，導(dǎo)致血清胰島素出現(xiàn)不同程度的下降、血糖升高，我們以此建立DM2小鼠模型。

本次實(shí)驗(yàn)通過對小鼠進(jìn)食量、體重以及非空腹血糖值進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)低、中、高劑量的玉米須水提取物均能在一定程度上降低STZ致2型糖尿病小鼠的血糖水平，且隨著劑量的升高降血糖作用逐漸增強(qiáng)，玉米須高劑量組降糖效果最好（P＜0.01）。研究表明，玉米須水提取物能夠降低STZ所致的2型糖尿病小鼠血糖水平，對防治糖尿病具有積極意義，也為玉米須在預(yù)防及治療糖尿病方面提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]王英平，李向高.玉米須化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].特產(chǎn)研究，2004，43（2）：42-46.

[2]溫憲春，周麗，李曉明.玉米須水提取物對2型糖尿病大鼠糖脂代謝及氧化應(yīng)激的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2010，17（5）：24-26.

[3]劉璋楠，魏志潘，劉宇軒，等.2型糖尿病小鼠對旋毛蟲易感性的研究[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2015，82（3）：181-183.

[4]劉娟，韓曉強(qiáng)，姜博，等.玉米須多糖治療糖尿病作用機(jī)制的研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2006，17（4）：242-244.