血清CAM、GDF-15、ox-LDL在急性缺血性腦卒中患者中的變化及其與神經功能的關系

趙連江 亓法英 任 萍

(臨沂市第三人民醫院神經內科，山東 臨沂 276000)

急性缺血性腦卒中時動脈栓子在血管內由近心端推移至遠心端的過程中及治療后血管再通時均會導致機體腦組織缺血發生再灌注損傷，從而引發腦細胞再損傷，加重病情〔1，2〕。因此，及時有效對老年急性缺血性腦卒中患者進行診斷和干預在減輕機體腦組織損傷、降低患者相關死亡的危險性中尤為重要。相關研究表示，血清標志物由于其便捷性、快速性，已被應用于評價神經系統疾病病情嚴重程度〔3〕。近年來研究顯示，血清鈣調蛋白(CAM)、血清生長分化因子(GDF)-15及血清氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)在急性缺血性腦卒中疾病中具有關鍵作用，可用于反映疾病進展，但其具體機制尚未明確〔4〕。本研究通過對急性缺血性腦卒中患者血清CAM、GDF-15及ox-LDL水平的觀察，探討其與病情之間的關系，并利用受試者工作特征(ROC)曲線分析診斷效能。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2016年1～12月臨沂市第三人民醫院接診的經磁共振成像確診為老年急性缺血性腦卒中患者80例。按照入院時美國國立衛生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分分為A組(≤15分)和B組(>15分)，各40例。納入標準〔5〕：①所有患者符合全國第4屆腦血管病學術會議通過的診斷標準；②首次發病；③無家族遺傳史；④發病前無嚴重殘疾；⑤對本研究均知情同意。排除標準：①患有心、肝、腎等重要器官性疾病；②合并腦出血；③近期有手術史、妊娠史、外傷史等；④患有嚴重內分泌疾病；⑤近期有降脂藥物、炎癥抑制藥物等服用史；⑥資料不全者。另選擇同期接受體檢的健康志愿者40例作為對照組。所有受試者知情同意此研究，且研究已獲得倫理委員會批準實施，三組一般資料見表1，且各指標差異無統計學意義(P>0.05)。

表1 三組一般資料比較

1.2方法

1.2.1一般資料及標本采集 患者入院時對其年齡、體重、家族疾病史、生活習慣等進行了解，于次日晨起采集所有患者空腹靜脈血進行血糖檢測，同時檢測患者肝、腎功能及相關生化指標。采集所有患者靜脈血5 ml，經低溫離心(3 000 r/min，10 min)后，提取血清置于冷凍箱內保存。

1.2.2血清CAM、GDF-15、ox-LDL水平檢測 ①血清CAM水平檢測：選擇瑞士哈美頓公司生產的全自動酶標儀，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)進行檢測，試劑盒購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司；②血清GDF-15水平檢測：采用ELISA法進行檢測，試劑盒購自北京義翹神州科技有限公司；③血清ox-LDL水平檢測：采用生物素雙抗體夾心ELISA檢測，試劑盒購自武漢默沙克生物科技有限公司。所有操作嚴格按照試劑盒說明進行。

1.2.3NIHSS量表評分〔6〕入院時對所有患者進行評分，內容包括意識水平、凝視、視野、上下肢運動、肢體共濟失調、感覺、語言、構音障礙及忽視共11個項目，0～1分表示正常或近乎正常，15分以下為輕中度腦卒中，15～42為重度腦卒中，分數越高，則表示病情越嚴重。

1.3統計學方法 以SPSS18.0軟件進行方差分析、t及χ2檢驗，相關性分析使用Pearson相關，采用ROC分析診斷效能。

2 結 果

2.1各組血清CAM、GDF-15、ox-LDL水平及NIHSS評分比較 A組、B組及對照組血清CAM分別為(235.26±61.85)ng/ml、(152.62±31.36)ng/ml、(87.85±22.32)ng/ml，差異有統計學意義(F=123.437，P<0.05)；A組、B組及對照組血清GDF-15分別為(967.22±75.28)pg/ml、(648.14±50.26)pg/ml、(417.14±47.03)pg/ml，差異有統計學意義(F=492.206，P<0.05)；A組、B組及對照組血清ox-LDL分別為(516.35±122.38)mg/L、(420.47±75.04)mg/L、(332.58±68.23)mg/L，差異有統計學意義(F=5.387，P<0.05)；A組、B組及對照組NIHSS評分分別為(23.25±3.36)分、(12.73±2.28)分、(1.05±0.69)分，差異有統計學意義(F=872.351，P<0.05)。

2.2急性缺血性腦卒中患者血清CAM、GDF-15、ox-LDL水平與NIHSS評分的相關性 血清CAM、GDF-15、ox-LDL水平與NIHSS評分呈正相關(r=0.517，P<0.05，r=0.851,P<0.05，r=0.338，P<0.05)。

2.3血清CAM、GDF-15、ox-LDL水平對急性缺血性腦卒中的臨床診斷價值 血清CAM預測急性缺血性腦卒中的ROC曲線下面積為0.824，95%CI為0.731～0.918，敏感度為72.71%，特異性為74.00%，準確率為78.94%；血清GDF-15預測急性缺血性腦卒中的ROC曲線下面積為0.876，95%CI為0.800～0.952，敏感度為71.23%，特異性為70.48%，準確率為76.25%；血清ox-LDL預測急性缺血性腦卒中的ROC曲線下面積為0.709，95%CI為0.594～0.824，敏感度為67.25%，特異性為58.43%，準確率為64.41%；聯合診斷預測急性缺血性腦卒中的ROC曲線下面積為0.956，95%CI為0.913～0.998，敏感度為97.59%，特異性為88.36%，準確率為96.66%(均P<0.05)。

3 討 論

我國新發腦卒中患者中60%～80%為缺血性腦卒中，且病殘率高達76%，已嚴重威脅患者的生命安全〔7〕。因此，在對急性缺血性腦卒中的處理中，需早診斷、早治療、早康復〔8〕。相關研究認為，急性缺血性腦卒中的發病機制有鈣離子穩態失衡、炎癥反應、氨基酸興奮及蛋白酶激活等方面〔9〕，故對腦卒中患者血清相關細胞因子水平進行測定有助于了解其病情，并及時干預。

CAM屬于真核生物細胞中的胞質溶膠蛋白，由148個氨基酸組成單條多肽，其相對分子質量為16.7 kD，存在于各種真核生物細胞內，是細胞內功能中最為重要的鈣受體蛋白〔10〕。CAM作為Ca2+的受體蛋白，對神經細胞內鈣超載有較為關鍵的調控作用，可對生物體內多種Ca2+依賴細胞功能及酶體進行調節，從而參與到疾病的進展過程中，在多種疾病的病理進程中Ca2+/CAM信號通路均有重要作用〔11〕。相關研究顯示，CAM與高濃度的Ca2+相結合后，可有效激活CAM依賴性激酶Ⅱ，從而促進一氧化氮合酶的表達，加重血管損傷〔12〕。張芳等〔13〕對外傷性大鼠模型進行研究，發現其前額內側皮質的Ca2+濃度會隨著外傷性應激而增加，且高濃度的Ca2+會激活CAM信號轉導通路，繼而對記憶、行為等認知功能造成一定影響。以往關于CAM與急性缺血性腦卒中的相關研究較少，且多是局限于動物缺血再灌注模型的研究，其結果顯示神經元細胞內Ca2+超載，繼而引發CAM活性、含量均有所增加〔14〕。本研究中，急性缺血性腦卒中患者CAM呈明顯上升，且CAM水平與NIHSS評分呈正相關，分析可能是與鈣超載具有一定關系，因鈣離子通過與CAM結合發揮生理病理作用，故鈣超載會引發CAM表達的增高。

GDF-15是轉化生長因子-β超家族成員之一，屬于分泌蛋白，具有保護心腦血管、抗腫瘤、抗炎、促進凋亡等作用，在心肌缺血和缺血再灌注所引起的心肌損傷的病程中有所參與，可抗心肌肥厚〔15〕。因GDF-15對血細胞具有不依賴性，因此其表達較為穩定且容易檢測。相關研究表明，在腦卒中小鼠模型中，GDF-15與腦卒中關系密切，當小鼠大腦中動脈被阻斷24 h時，其GDF-15蛋白水平異常升高〔16〕。本研究中，急性缺血性腦卒中患者GDF-15水平明顯上升，且與NIHSS評分呈正相關，分析可能與GDF-15的抗動脈粥樣硬化、抗炎等作用機制相關。當機體發生缺血性腦卒中時，GDF-15因其具有調節器官生長及分化特點，從而在抑制機體的炎癥反應中起到了重要作用，同時隨著腦損傷的發生，其自我保護功能則會啟動，機體會自動釋放大量GDF-15，以抑制損傷后的炎癥反應對腦組織進行再次損傷，因此病情越嚴重，GDF-15表達水平越高。

動脈粥樣硬化斑塊的不穩定性是急性缺血性腦卒中的發病機制之一，ox-LDL在動脈粥樣硬化斑塊的形成、發展及消失中具有重要作用〔17〕。ox-LDL是由自由基介導、細胞氧化LDL而形成，可通過巨噬細胞表示的SR-A被攝取，從而導致巨噬細胞內的膽固醇脂質顆粒逐漸聚集，形成團體，同時還會通過自身的毒作用對巨噬細胞進行刺激，誘導巨噬細胞集落刺激因子產生，進而導致巨噬細胞逐漸凋亡，直至轉變為泡沫細胞〔18〕。泡沫細胞會因攝取的ox-LDL超出其清除能力而死亡，從而形成脂質斑塊〔19〕。本研究中，急性缺血性腦卒中患者ox-LDL水平明顯上升，且與NIHSS評分呈正相關，分析可能是ox-LDL水平表達升高，在誘導巨噬細胞凋亡轉變為泡沫細胞的同時對組織因子、促凝血因子表達等均有所刺激，同時會導致內膜損傷進一步增厚，使得動脈出現狹窄或狹窄加重，繼而導致動脈粥樣硬化斑塊的不穩定性上升，故ox-LDL表達水平越高，則表示病情越嚴重。

國外研究證實〔20〕，血清CAM、GDF-15、ox-LDL在急性缺血性腦卒中患者的疾病進展及預后均存在重要預測價值。本研究結果與之一致。

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