番茄紅素對反式脂肪酸致雄性SD大鼠生殖毒性的作用

□ 姚名顏 沈 悅 劉 娟 朱樂玫 長沙醫學院公共衛生學院

天然的TFA來源于反芻動物（如牛、羊）脂肪、乳制品等，主要由飼料中的不飽和脂肪酸經反芻動物瘤胃酶促作用生成，而人工的TFA來源于蛋糕、餅干、棕櫚油等食物。Tsai 等[1-2]用14年的時間對45912名男性進行了TFA與膽石癥相關關系的前瞻性隊列研究，發現攝入TFA高的人群發生膽石癥的相對危險性較高。阿茲海默氏老年癡呆癥（Alzheimer"s Disease）研究表明，攝入TFA和飽和脂肪酸（Saturated Fatty Acid，SFA） 引 起老年癡呆[3]。

番茄紅素（LP）是一種天然類胡蘿卜素，具有強大的活性氧（ROS）清除活性， LP具有顯著的抗氧化特性，可以防止由氧化應激引起的精子改變，并保留雄性生殖細胞的功能[4]。番茄紅素防止精子和睪酮水平的數量和運動性減少，表明對ZEA誘導的睪丸損傷有保護作用。番茄紅素還有效地防止睪丸中由ZEA引起的谷胱甘肽-S-轉移酶、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽還原酶和δ-氨基乙酰丙酸脫水酶活性的降低[5]。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

6～8周齡，健康成年SD雄性大鼠48只，體重（300±10）g。

1.2 主要儀器與試劑

主要儀器：超凈工作臺、電子分析天平、微量加樣器、光學顯微鏡及攝像系統、熒光分光光度計、紫外分光光度計等。

主要試劑：生理鹽水、酒精溶液、甲醛溶液等。

1.3 動物分組與處理

將實驗48只SD大鼠隨機分成6組：對照組，TFA低、中、高劑量組和TFA低、中、高劑量加LP保護組與LP保護組均分別灌胃給藥。空白組和LP保護組均用蒸餾水溶解灌胃；其他各組按等體積不同濃度配成對應溶液灌胃，每天1次，總共灌胃時間8周；取血處死大鼠并取出睪丸以及附睪。

1.4 指標方法與指標

大鼠睪丸病檢：將部分睪丸固定于10%甲醛溶液中，乙醇梯度脫水，常規石蠟包埋，切片，蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察形態學變化。

1.5 統計學處理方法

用SPSS13.0統計學軟件進行分析，計算各組指標的均值和標準差，實驗結果以均數±標準差表示。實驗數據先進行正態性和方差齊性檢驗，再根據檢驗結果進行數據分析， 兩組之間進行比較時用兩獨立樣本t檢驗，多組之間進行比較且方差齊性時用方差分析，p＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

經TFA染毒致SD大鼠睪丸病理形態及對精子形態圖的影響，如圖1所示。

對照組：結構完整，無變性、壞死等病理改變。

TFA染毒組：部分生精上皮變性壞死，排列混亂，細胞形狀不明顯。

TFA+低劑量LP組：部分精管出現萎縮，細胞層次不明顯，基膜變薄、破損。

TFA+中劑量LP組：細胞層次不清晰，精子數量少。

TFA+高劑量LP組：細胞層次、生精量減少、基膜變薄有所恢復。

3 討論

近幾年國內外的研究還有TFA對生殖的影響，TFA可以增加婦女不孕的概率及減少男性荷爾蒙分泌，還可以引起大鼠精子的減少或損傷。本研究探討TFA對SD大鼠生殖毒性的影響以及LP對TFA致大鼠生殖毒性的保護機制。在2007—2017年關于膳食調味劑對人類生殖健康和胎兒壽命影響的研究中指出TFA攝入量與精子濃度和總精子數量成反比，并與弱精子癥呈正相關，并且與精子濃度和精液質量呈負相關[6]。研究結果表明，高TFA攝入量（超過1%的能量消耗）構成了男女不育的危險因素。

圖1 經TFA染毒致SD大鼠睪丸病理形態及對精子形態圖的影響

番茄紅素具有保護生殖細胞以及修復生殖細胞的作用，其機制可能與番茄紅素所具有抗脂質過氧化和清除氧自由基的作用有關。本實驗為應用番茄紅素修復反式脂肪酸致生殖損傷提供了依據，對進一步探究番茄紅素對過氧化致生殖損傷的修復機制有十分重要的意義。