蒙藥漏蘆花總木脂素的含量測定

蘇日塔拉圖 王曉琴 韓國慶 劉麗穎

(1.內蒙古民族大學附屬醫院臨床蒙藥劑部，內蒙古 通遼 028007；2.內蒙古醫科大學藥學院，內蒙古 呼和浩特 010110)

蒙藥漏蘆藥材來源于菊科植物祁州漏蘆Rhaponticum unifLorum (L.)DC.的干燥花序，又名野蘭、鬼油麻、狼頭花等，廣泛分布在中國東北、西北、華中等地區，生于山坡丘陵地、松林下或樺木林下、海拔390 ～ 2700米，頭狀花序單生莖頂，花序梗粗壯[1]。主治黏疫，腸刺痛，炭疽，白喉，麻疹，毒熱，心熱，訌熱，熾熱，血熱，傷熱[2-3]。《蒙醫藥選編》記載：“漏蘆花清疫熱，毒熱，心熱”。

課題組前期的研究表明漏蘆花主要的次生代謝產物為黃酮類和木脂素類化合物，其中，以泥胡木脂素B為代表的木脂素類化合物含量很高[4]。目前對蒙藥漏蘆花的研究主要集中在黃酮含量的測定等方面，對其總木脂素含量測定未見報道，本文建立了漏蘆花序的總木脂素含量測定方法，以期為蒙藥漏蘆花的進一步研究和開發利用提供參考依據。

1 材料與儀器

9批漏蘆花藥材分別采集于內蒙古地區和購買于藥材公司和醫院；泥胡木脂素B對照品為實驗室自制，經1H-NMR和13C-NMR鑒定結構，HPLC面積歸一化法純度≥98%。所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。

AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)；UV1000雙光束紫外可見分光光度計(上海天美科學儀器有限公司)；超聲波提取器(昆山市超聲儀器有限公司)。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備:精密稱取干燥至恒重的泥胡木脂素B對照品5.1 mg，用60%乙醇溶解，定容于25 mL容量瓶，得濃度為0.204 mg·mL-1泥胡木脂素B對照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備: 取漏蘆花粉末約0.1g，精密稱定，置于150 mL具塞錐形瓶中，精密加入60 %乙醇溶液20 mL，稱重，用超聲(功率100W)提取30 min，再次稱重，用60%乙醇補足失重，過濾。精密吸取續濾液1 mL至25 mL容量瓶中，定容，搖勻待用。

2.3 最大吸收波長確定:分別精密量取對照品溶液和供試品溶液1mL，置于25 mL容量瓶中，定容至刻度，充分搖勻，以隨行試劑做空白對照，在200 ～ 400 nm波長范圍內進行全波長掃描，結果二者均在340 nm波長處呈現最大吸收，且空白對照無干擾，結果見圖1。

2.4 標準曲線的繪制: 分別精密量取對照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置于25mL容量瓶，定容搖勻。分別得泥胡木脂素B濃度為11.6、17.4、23.2、29、34.8、40.6 μg·mL-1的對照品溶液，于340 nm波長處測定各吸光度，得線性回歸方程：Y = 0.02307X+0.00007(r = 0.9993)。表明泥胡木脂素B在11.6 ～ 40.6 μg·mL-1范圍內與吸光度呈良好線性關系。

2.5 重復性試驗 : 按2.2項下方法平行制備6份供試品溶液，在340 nm處測定吸光度。結果表明總木脂素含量的RSD為0.62%，表明方法重復性良好。

2.6 精密度試驗: 按2.2項下的方法制備供試品溶液，在340 nm處連續測定吸光度6次，結果總木脂素含量的RSD為0.41%，表明儀器的精密度良好。

2.7 穩定性試驗: 按2.2項下的方法制備供試品溶液，在340 nm處于0、1、2、4、6、8 h測定吸光度，結果總木脂素含量的RSD為0.48%，結果表明樣品溶液在8 h內穩定性良好。

2.8 加樣回收率試驗：取已知含量的同一藥材粉末6份，各約0.05 g，精密稱定。分別按藥材粉末已知總木脂素含量的80%、100%、120%3個水平精密加入泥胡木脂素B對照品，按2.2項下的方法制備供試品溶液，按2.3項下的方法在340 nm處測吸光度，計算含量及回收率，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

3 含量測定

取9批漏蘆花藥材粉末，按2.2項下的方法制備供試品溶液，在340 nm處測定吸光度，平行測定3次，取平均值。結果見表2。

表2 含量測定結果

4 討論

4.1 對最佳提取溶劑進行考察，取漏蘆花粉末0.1g，精密稱定5份，置具塞錐形瓶中，分別精密加入20 mL 50%、60%、70%、80%、90%乙醇，按2.2項下的供試品溶液制備方法，在340 nm處測定吸光度,結果60%乙醇對總木脂素的提取率最大，確定最佳提取溶劑為60%乙醇溶液。

4.2 本研究建立了紫外分光光度法測定蒙藥漏蘆花中總木脂素含量的方法，并對野外采集實驗室陰干的藥材樣品以及收集于藥材市場和蒙中醫院的藥材樣品進行了檢測。9批漏蘆花樣品中總木脂素含量在83.75 ～103.36 mg/g。本方法快捷、準確，可望為漏蘆花藥材的質量評價和有效控制提供科學依據。

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M]. 北京:科學出版社,1990,78(1):184.

[2]中國醫學百科全書編輯委員會,中國醫學百科全書.蒙醫學[M]. 上海:上海科學技術出版社,1992:211.

[3]中華人民共和國衛生部藥典委員會. 中華人民共和國衛生部藥品標準·蒙藥分冊 [S].1998:54.

[4]杜月,王曉琴,包保全,等. 祁州漏蘆花化學成分研究[J]. 中草藥, 2016,47(16):2817-2821.