兩種濾除白細胞方法對懸浮紅細胞指標的影響

陳棟才，羅玫玲，李雪群

(惠州市中心血站，廣東 惠州 516003)

由于輸血過程當中所產生的白細胞抗體有可能引發機體非溶血性發熱以及HLA同種異體免疫的不良反應，所以在臨床應用中白細胞被視為非治療成分需要進行過濾清除[1]。臨床輸血過程中如果白細胞含量較大，則極易變成一些嗜白細胞病毒的載體，如果將該種白細胞含量較大的血液用于患者的治療過程中，將會大幅度提高此類病毒的感染率[2]。正因如此，臨床用血的白細胞濾除工作對于輸血安全以及相關治療有著重要的意義。當前臨床中較為常見的濾白方法有洗滌法和過濾法，也就是通過洗滌或者過濾的辦法來消除血液當中的白細胞成分[3]。本研究對比分析兩種濾白方法對于紅細胞懸浮液在濾白前后各項檢測指標的變化情況，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料的選擇 采用隨機數字表法在惠州市中心血站選取2015年1—6月期間供臨床使用的懸浮紅細胞血液600袋，所有樣本均為采集2周以內的新鮮血液，并且統一使用CPDA-1型添加劑，在進行白細胞濾除前分別留取標本檢測。

1.2 實驗方法 首先進行標本留樣，將入組的600份懸浮紅細胞血液，每份提取10 mL分別置于試管中標本留樣；將剩余的600份懸浮紅細胞樣本進行平均分配，分別采用洗滌法以及過濾法進行濾白，在濾白結束后，再于每份懸浮紅細胞樣本中取10 mL分別置于試管中標本留樣。洗滌法濾白可以通過醫院與相關血站合作，利用血站的洗滌儀器濾白；過濾法濾白的操作應定為采血后冷藏保存6～24 h之后，在進行過濾之前需要檢查血袋和導管是否出現破損或者斷裂的情況，實驗時，關閉排氣導管止流夾，搖勻抗凝劑后將血袋懸掛于4～6 ℃的低溫操作臺中開始過濾，過濾過程中需要保障血液過濾通暢，過濾器流速定為120～150滴/min，讓血液勻速流過濾網直至最終完成過濾。

1.2.1 洗滌法濾白的原理 將入組血樣進行離心操作，完成離心操作之后在無菌條件下首先將血漿分出并去除白細胞，向紅細胞內加入無菌生理鹽水混勻，再離心去除殘余的白細胞，如此反復洗滌3次以達到最終去除98%以上的血漿和90%以上的白細胞、血小板的目的，同時也去除了保存過程中產生的鉀、氨、乳酸等代謝產物，保留了70%以上紅細胞，最后加入生理鹽水懸浮即可。

1.2.2 過濾法濾白的原理 使用相關器材濾除血液當中的白細胞，首先可以起到阻滯作用，由于濾器的過濾網孔徑均小于白細胞的直徑，同時又大于血液當中的其他細胞成分，所以濾器可以起到阻滯白細胞的作用，同時不影響紅細胞、血小板和血漿蛋白等血液成分的通過。其次白細胞具有一定的黏附性，在使用濾器濾白期間，白細胞會受到細胞間的相互作用，進而黏附于濾器的濾網和纖維之上。通常情況下，過濾器的濾網材料會選擇超細的聚酯纖維，該類材料在加工時，會形成交錯的網狀，這種特殊的結構也會使纖維之間的有效孔徑對通過纖維的密度進行更加精確的控制和改變。白細胞由于其體積較大，無法順暢通過，而血小板和紅細胞的體積較小且可塑性強，特別是在較為狹窄的位置，能夠變形為絲狀，這樣一來就能順利通過過濾器的濾網。

1.3 游離血紅蛋白的測定 血紅蛋白具有一定的過氧化物酶活性，因此可以催化過氧化氫使其分解釋放出氧氣，釋放出的氧氣可使鄰甲聯苯胺受到氧化作用而產生顏色變化，即從無色變化為藍紫色[4]。根據鄰甲聯苯胺的顯色情況對相關檢測指標進行比較，具體檢測公式：血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100，從而測出血紅蛋白含量；溶血率=游離Hb×(1-HCT)×100%÷總Hb。

1.4 統計學方法 通過SPSS 18.0軟件進行統計分析，計量資料比較采用t檢驗，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 洗滌法濾除白細胞前后各項指標的檢測 通過洗滌法進行懸浮紅細胞濾白后，RBC畸變率和RBC溶血率有所上升，而RBC攜氧能力有一定的下降趨勢，但是各個檢測指標的變化幅度較小，無統計學差異(P>0.05)。結果詳見表1。

表1 懸浮紅細胞洗滌法濾白前后各項指標檢測情況

2.2 過濾法濾除白細胞前后各項指標的檢測 經過過濾法進行懸浮紅細胞濾白后，RBC攜氧能力降低，但差異不具有統計學意義(P>0.05)，RBC畸變率有所上升，差異有統計學意義(P<0.01)。結果詳見表2。

表2 懸浮紅細胞過濾法濾白前后各項指標檢測情況

3 討 論

在臨床治療中，出現非溶血性輸血發熱的概率約為55%～75%，其原因主要包括：輸血用的血液或者血制品本身就含有致熱源；其次，患者在多次接受輸血治療之后，自身體內已經產生了種類相同的血小板抗體或者白細胞抗體；此外，在對患者進行輸血之后，其體內的循環動力系統就會相應發生改變，這種變化也有可能導致人體對病灶部位毒素的吸收，這也是誘發患者出現發熱癥狀的重要原因[5]。研究表明，輸血中血液白細胞成分的降低可有效控制非溶血性發熱的發生率[6]。

通過研究非溶血性發熱反應的病理變化，發現非溶血性血小板發熱反應和血小板活性物質主要在儲存過程中產生，該類物質包括組胺、脂質、補充裂解成分和各種細胞因子，主要與IL-1、IL-6、TNF-α、IL-8和MCP-1相關。紅細胞和血小板制劑中的這些活性成分具有延長儲存時間的作用。研究證實，時間越長，發熱反應的發生率越高。認為血小板介導的介質參與了HLA的非溶血性發熱反應[7]。本研究發現，利用洗滌法濾除白細胞可以引發紅細胞的畸變率和溶血率升高，同時紅細胞的攜氧能力會有所減弱，但差異不具有統計學意義。由表2所示數據也可以看出采取過濾法濾除白細胞同樣也會導致紅細胞的畸變率和溶血率升高，紅細胞攜氧能力減弱，濾白前后的紅細胞畸變率差異具有統計學意義。過濾法濾白的原理是通過濾網阻隔體積較大的白細胞，讓體積較小表面光滑變形能力強的RBC通過從而達到濾白的目的。在此過程中紅細胞通過濾網時會受到機械性的擠壓產生變形，成為更易通過的橢圓形或梭形，這也成為紅細胞畸變率提高的主要原因[8]。

綜上所述，采用洗滌法和過濾法對血液進行濾白，雖然過濾法會提升紅細胞的畸形率，但是不會對血液的安全性產生影響，由此可見，過濾法和洗滌法均為臨床上較為有效的濾白方法。在濾除白細胞時，還應注意基礎和臨床研究的應用，無論輸血工作者或者臨床醫師和研究人員應深入研究其應用材料，明確其適應證，根據患者的實際情況及供血方案選擇最適宜的濾

白方法，在滿足臨床治療需要的同時，最大限度地保證輸血的安全。應通過研究評定各濾白方法的優點以及適應情況，提高濾除白細胞輸血技術，在未來臨床實踐中為患者提供更好的服務。

參考文獻：

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