子宮內(nèi)膜樣腺癌中酪氨酸蛋白激酶受體A7和星形膠質(zhì)細(xì)胞上調(diào)基因-1的表達(dá)及相關(guān)性

金艷霞 張曉蘭 冶俊玲

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤婦科，青海 西寧 810001)

子宮內(nèi)膜癌中最常見的類型是子宮內(nèi)膜樣腺癌，是由子宮內(nèi)膜異型增生轉(zhuǎn)變而來，這種轉(zhuǎn)化伴有基因和蛋白的表達(dá)失常〔1〕。酪氨酸蛋白激酶受體(Eph)蛋白構(gòu)成最大受體酪氨酸激酶亞家族，EphA7是家族中最重要的成員，參與發(fā)育過程，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附和細(xì)胞增殖過程〔2〕。星形膠質(zhì)細(xì)胞上調(diào)基因(AEG)-1是近年發(fā)現(xiàn)的癌基因，通過核因子(NF)及相關(guān)信號(hào)通路表達(dá)在多種腫瘤組織中〔3〕。本文檢測(cè)子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中EphA7和AEG-1的表達(dá)特征，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2016年1～12月青海大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的子宮內(nèi)膜樣腺癌并行手術(shù)根治的患者為觀察組57例，年齡41～81歲，平均56.2歲。診斷均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型。排除標(biāo)準(zhǔn)：①林奇綜合征；②伴有生殖系統(tǒng)畸形。子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生伴不典型增生21例為對(duì)照組1，年齡35～70歲，平均54.3歲。子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生不伴不典型增生21例為對(duì)照組2，年齡40～68歲，平均50.9歲。子宮脫垂后行子宮全切后15例為對(duì)照組3，年齡56～80歲，平均60.2歲。4組均留取術(shù)后子宮內(nèi)膜的蠟塊組織。4組年齡構(gòu)成差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，均知情同意。

1.2EphA7和AEG-1檢測(cè) 術(shù)后標(biāo)本常規(guī)甲醛溶液固定，常規(guī)取材，石蠟包埋，切取4 μm切片，采用免疫組化SP法檢測(cè)EphA7和AEG-1表達(dá)，行二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。嚴(yán)格質(zhì)量控制，并設(shè)陽性對(duì)照，嚴(yán)格按說明書操作，盡量減少誤差。

1.3結(jié)果判斷方法 EphA7定位于細(xì)胞質(zhì)，AEG-1定位于細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)，以出現(xiàn)淡黃色-棕褐色為顯色；按顯色強(qiáng)度分4個(gè)等級(jí)：0分，無顯色；1分，淡黃色；2分：棕黃色；3分，棕褐色。根據(jù)高倍鏡下(400倍視野)陽性細(xì)胞數(shù)的不同分為5個(gè)等級(jí)：0分，<5%；1分，5%～25%；2分，26%～50%；3分，51%～75%；4分，76%～100%。將顯色強(qiáng)度×陽性細(xì)胞數(shù)的得分作為最終評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，0～3分為陰性，>3分為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.14組EphA7和AEG-1陽性率比較 4組EphA7和AEG-1陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組EphA7和AEG-1陽性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組不同臨床特征中EphA7和AEG-1陽性率的比較 EphA7和AEG-1表達(dá)與腫瘤增殖指數(shù)、腫瘤最大徑相關(guān)；AEG-1的表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度密切相關(guān)。二者均與年齡、腫瘤分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性。見表2。

2.3觀察組中EphA7和AEG-1相關(guān)性 EphA7和AEG-1呈正相關(guān)(r=0.46，P=0.047)。

表2 觀察組不同臨床特征中EphA7和AEG-1陽性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

子宮內(nèi)膜樣腺癌的惡性腺體類似于正常增生期子宮內(nèi)膜腺體，具有惡性細(xì)胞學(xué)特征，同時(shí)還具有融合篩狀生長(zhǎng)、缺乏單個(gè)腺體完整性、絨毛腺管狀結(jié)構(gòu)，多數(shù)腫瘤是1、2級(jí)，即分化較好，但是少數(shù)腫瘤分化較差。病變形成中具有腫瘤基因的表達(dá)失常〔4，5〕。根據(jù)序列相似性將Eph受體分為兩種，即EphA和EphB，共有14個(gè)Eph受體，8個(gè)Ephrin配體，EphA7是重要成員〔6，7〕，其控制著一系列不同細(xì)胞間的相互作用，EphA7與相應(yīng)的配體結(jié)合后可以引起其結(jié)構(gòu)變化，能有效活化細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的酪氨酸激酶，引起自身的磷酸化，并活化底物分子，引發(fā)受體細(xì)胞的正向信號(hào)傳導(dǎo)，發(fā)揮生物學(xué)作用〔8，9〕。孟祥瑞等〔10〕通過觀察非小細(xì)胞肺癌中EphA7的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)EphA7在腫瘤中高表達(dá)，同時(shí)與腫瘤纖維化和腫瘤大小有關(guān)，并對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖有一定的影響。AEG-1的基因定位于染色體8q22上，包含11個(gè)內(nèi)含子和12個(gè)外顯子，分子量為80 kD。AEG-1可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，同時(shí)可以使腫瘤細(xì)胞逃逸凋亡的過程，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和播散〔11，12〕。余劍琴等〔13〕通過觀察AEG-1在子宮頸癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)AEG-1的表達(dá)水平與脈管浸潤(rùn)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，認(rèn)為AEG-1能促進(jìn)子宮頸癌間質(zhì)的微血管生成，其機(jī)制可能與NF-κB信號(hào)途徑引起血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)上調(diào)有關(guān)。

本研究結(jié)果提示在子宮內(nèi)膜腺體異型增生和癌變過程中，EphA7和AEG-1高表達(dá)起明顯的促進(jìn)作用，即子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生-不典型增生-癌變過程中的趨勢(shì)性作用強(qiáng)。本文提示EphA7和AEG-1高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的繁殖和腫瘤的生長(zhǎng)，此時(shí)腫瘤細(xì)胞異型性明顯，失控性增生明顯，細(xì)胞數(shù)量增多，細(xì)胞生長(zhǎng)加速，腫瘤的體積增大〔14，15〕。本文結(jié)果提示AEG-1高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤向肌層浸潤(rùn)，也提示腫瘤處于進(jìn)展?fàn)顟B(tài)(高侵襲性)。本實(shí)驗(yàn)提示EphA7和AEG-1二者對(duì)細(xì)胞由幼稚到成熟過程可能無明確的影響，也不對(duì)腫瘤的淋巴管形成及淋巴道播散有影響。EphA7和AEG-1二者具有正向協(xié)同作用，二者并無結(jié)構(gòu)上的同源性及互補(bǔ)性，但是二者均對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖有影響，也對(duì)腫瘤血管的新生有影響，因此二者的協(xié)同作用可能是與對(duì)細(xì)胞增殖和血管生成的間接橋梁作用實(shí)現(xiàn)的，但是其具體機(jī)制有待更多實(shí)驗(yàn)證實(shí)。也有學(xué)者認(rèn)為EphA7和AEG-1表達(dá)的變化能使腫瘤的浸潤(rùn)模式發(fā)生改變，使腫瘤生長(zhǎng)時(shí)細(xì)胞極性及構(gòu)象發(fā)生明顯異常，細(xì)胞的體積小，易于浸潤(rùn)和直接蔓延〔16，17〕。

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