八角茴香干燥前后揮發油成分G C-M S分析*

★ 熊耀坤 曾文雪 王雅琪 慕澤涇 王學成 伍振峰 朱根華*（.江西中醫藥大學 南昌 33 00 04；.創新藥物與高效節能降耗制藥設備國家重點實驗室 南昌 33 00 04）

八角茴香Illiciumverum Hook. f.為木蘭科植物八角茴香的干燥成熟果實，別名大茴香、茴香八角珠、大八角，為藥材和香料兼用的植物，主產于廣西、廣東、云南等地［1］。八角茴香味辛、性溫，有溫陽散寒、理氣止痛功效［2］。用于寒疝腹痛、腎虛腰痛、胃寒嘔吐、脘腹冷痛等癥。現代藥理研究表明八角茴香有抗菌、鎮痛、抗病毒等作用［3］。其中，揮發油部位是其主要藥效部位［4-7］。目前，八角茴香在產地加工仍采用太陽曬干、殺青曬干、簡易土炕干燥、硫熏干燥等干燥方法，采收期遇陰雨、多雨天不能及時干燥八角果而引起的變質腐爛的問題，普遍未進行藥材的質量控制，在干燥過程中過度干燥，過高的溫度和過長的低效干燥，致使藥材色澤劣變、芳香物質損失以及藥用有效成分分解，甚至促使性味改變，藥效喪失［8-9］。本文模擬八角茴香產地加工干燥的方式對鮮八角茴香進行干燥，采用水蒸氣蒸餾法提取干燥前后八角茴香揮發油，應用GC-MS方法進行分離和分析鑒定，探究在干燥前后八角茴香揮發油含量及化學差異，為八角茴香產地加工干燥過程質量控制提供參考依據。

1 儀器與試藥

Agilent7890A/5975C型氣相色譜-質譜聯用儀（GC-MS）（美國安捷倫公司）；色譜柱為DB-5石英毛細管柱（0.25μm×250μm×30.0m）；KDM型調溫電熱套（山東鄄城華魯電熱儀器有限公司）；YHC-11002B電子天平（瑞安市英衡電器有限公司）；TG328A型萬分之一電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；SZ-93自動雙重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）無水硫酸鈉（西隴科學股份有限公司），乙酸乙酯（上海安譜實驗科技股份有限公司）均為市售分析純；蒸餾水（自制）。八角茴香，2017年10月采購于廣西玉林市容縣石頭鎮，經江西中醫藥大學張壽文教授鑒定為Illiciumverum Hook. f.的新鮮果實，批次為20171009，購買后，貯存于陰涼處備用。

2 方法與結果

2.1 鮮藥材的干燥 按2015版《中國藥典》對鮮藥材進行晾干［10］，取500g新鮮藥材揀凈，置于太陽底下進行晾曬，得到干燥藥材138g。

2.2 揮發油提取 按2015版《中國藥典》提取揮發油的方法［11］，稱取八角茴香200g（鮮藥材按干燥前重量計算），加水600mL于1000mL電熱套中，于揮發油提取器中提取5h，取0.1mL精油用少量乙醚將析出的揮發油反復溶出，并用無水硫酸鈉脫水過夜，并經0.45μm的微孔濾膜濾過，裝入樣品瓶中，密封保存。

對干燥前后八角茴香揮發油的色澤、相對密度、pH值、藥材中含量等進行測定和表征，結果見表1?？梢娫诟稍锴昂蟀私擒钕銚]發油的理化性質無明顯變化，干品中含油量比鮮品的含油量低0.34%。

表1 八角茴香藥材干燥前后理化性質的變化

2.3 氣相色譜條件 氣相色譜條件：DB-5MS毛細石英管柱（30m×250μm×0.25μm）；載氣He為恒流模式，柱流器為1.0mL/min，平均線速為37cm/s，進樣量為1.0μl，進樣口為分流模式，分流比為50∶1，進樣口溫度為250℃；升溫程序為初始溫度60℃，以5℃/min升至150℃，再以10℃/min升至250℃，保持5min，共計33min。

2.4 質譜條件 電子轟擊源分析（EI），電離能量為70ev，電子倍增管為1905V，離子源溫度為230℃，四極桿溫度為150℃，接口溫度為250℃，掃描范圍m/z 40～550amu，全掃描方式，NIST11質譜庫。

2.5 氣質結果分析 實驗中通過對升溫程序進行系統優化，得到了2.3項下的色譜分離條件。如圖1所示，化合物各成分得到了較好的分離，峰形分布較好，各化合物的鑒定過程如下：總離子流色譜圖中的各峰經質譜掃描后得到相應的質譜圖，經過計算機質譜數據系統檢索（質譜數據庫：NIST11庫），再結合保留時間及查閱的相關文獻資料，確定其成分歸屬。在默認的積分設置下，鮮品八角茴香揮發油中檢測到19個化學成分，干品八角茴香揮發油中檢測到20個化學成分，推測在干燥的過程中有新的揮發油生成。結果見表2，表2中所給出的各種化合物的鑒定結果，其所對應的匹配度均大于85%，相對含量為默認積分設置下的歸一化所得的相應的計算結果。

表2 八角茴香藥材干燥前后化學成分和相對含量的變化

從實驗的數據可以看出，八角茴香干燥前后揮發油成分以及相對含量都無較明顯的變化，再根據相似度評價軟件進行分析，發現鮮品八角茴香和干品八角茴香峰值相差也不大，從物質含量數據結果顯示，干品中含有1個獨有成分，經鑒定為2-甲氧基苯甲酸甲酯，含量為0.07%。鮮品中雙戊烯含量為5.69%，干品含量為2.71%；5，6，7，8-四氫喹喔啉鮮品含量為0.68%，干品含量為0.45%；茴香腦鮮品含量為87.77%，干品含量為92.37%；3-蒈烯鮮品含量為0.86%，干品含量為0.48%；四者占揮發油總量的95.00%和96.01%。干品中雙戊烯要比鮮品中含量低2.98%，干品中茴香腦要比鮮品中高4.60%，可能在干燥的過程中發生了某些化學或物理變化，使得雙戊烯含量減少，同時茴香腦的含量有所增加。推測在酶促反應下，鮮品中部分雙戊烯轉化為干品中的茴香腦，綜合整體測量數據來看八角茴香中其他組分在測定前后的含量無明顯差異。

圖1 八角茴香藥材干燥前后揮發油成分G C-M S總離子流圖

3 討論

通過對干燥前后八角茴香揮發油氣質譜的特有屬性進行分析處理，八角茴香干燥前后其揮發油化學成分及含量均發生顯著變由。試驗結果對比表明鮮品中揮發油的含量要高于干品含量。在本實驗中，由于八角茴香揮發油的主要成分茴香腦，雙戊烯等具有易揮發性，且對溫度比較敏感，屬于熱敏性物質，考慮到加熱干燥過程可能會導致易揮發的成分大量揮發，最終造成揮發油總含量的降低，因此在實驗過程中選用陰干、涼干等干燥方法。此外，本實驗還模擬產地加工的初步處理方法，保證新鮮藥材在不發生霉變的狀態下，使得干燥前后八角茴香中揮發油中有一些成分在含量上存在差異。以便進行干燥前后該所得實驗數據的對比處理。

通過GS-MS分析結果，結合文獻參考［12］，揮發油鑒定的成份為19個，而干品中成分為20個，干品中有1個獨有成分為2-甲氧基苯甲酸甲酯，2-甲氧基苯甲酸甲酯的含量為0.07%。此外，干品中主要藥效成分茴香腦要比鮮品中高4.60%，干品中雙戊烯要比鮮品中低2.98%，推測在酶促反應下，鮮品中部分雙戊烯轉化為干品中的茴香腦，從而使得兩者成分發生較大變化。關于該轉變過程的發生是否和干燥時的溫度成正相關或成其他相關關系，有待進一步的研究進行證明。另外，本文所涉及的樣品數量雖然較少，但仍然具有一定的代表性和參考價值，對八角茴香中揮發油的合理開發利用具有一定的指導作用。

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