乙型肝炎肝硬化患者肝功能分級與過敏毒素C3a水平的相關性

謝亮 王姝 嚴德輝 雷俊陽

川北醫學院附屬醫院 1肝膽外科，2泌尿外科（四川南充 637000）

肝硬化是一種常見的慢性、進行性、彌漫性肝病，是慢性肝損傷后的一種損傷修復反應，是肝臟內的細胞外基質累積以及活化的肝星狀細胞過度增生的結果［1-2］。乙型肝炎肝硬化是我國肝硬化最常見的類型［3-4］。肝硬化術前必須評價肝臟儲備功能，目前最廣泛應用的是肝功能Child?Pugh分級法，但其所包含5項指標并不能全面反映肝臟儲備能力及整體情況，并且受“腹水”和“肝性腦病”參數主觀評估的影響而顯得并不完全準確，亟待新的客觀評價指標加以完善［5］。血清補體主要在肝臟合成，肝硬化時，肝細胞破壞而導致血清補體水平下降，尤其是C3水平的下降［6］。C3a也稱為過敏毒素，其濃度與C3濃度呈高度正相關，但其在血液中的穩定性優于C3，檢測C3a濃度可以直接方便地反映血清補體的水平［7］。現通過研究乙型肝炎肝硬化患者肝功能分級與過敏毒素C3a水平的相關性，并繪制ROC曲線測定界值，來探索過敏毒素C3a在乙型肝炎肝硬化嚴重程度評價及術前風險評估中的臨床意義。

1 對象及方法

1.1 研究對象 納入2016年2月至2017年8月在川北醫學院附屬醫院擬行門體靜脈斷流術或分流術的乙型肝炎肝硬化失代償期患者195例，已排除曾有肝臟及脾臟手術史、有酒精性肝炎或者酗酒史、有其他肝臟疾病病史的患者。另門診取20例乙肝病毒攜帶者作為對照組。本課題已經本院醫學倫理委員會批準，所有納入對象知情同意參加此項研究。

1.2 實驗方法

1.2.1 檢查指標 所有納入患者及對照組均檢查記錄了血液過敏毒素C3a值、總膽紅素值、白蛋白值、凝血酶原時間及腹水與肝性腦病情況；C3a值使用美國GBD公司C3a ELISA試劑盒行雙抗體夾心法ELISA測定。

1.2.2 肝硬化患者肝功能分級標準 肝功能分級采用Child?Pugh改良分級法［5］。通過測定患者的總膽紅素值、白蛋白值、凝血酶原時間及腹水與肝性腦病情況來計算其肝功能分級，其中A級5～6分，肝功能較好；B級7～9分，肝功能中等；C級10～15分，肝功能損害嚴重。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0進行統計學分析。將納入患者按肝功能分級分為A級、B級、C級3組，LSD法比較各組及對照組中C3a的差異。將血液中C3a濃度值與肝功能分級評分行Pearson相關分析，并繪制ROC曲線判斷C3a水平用于診斷乙肝肝硬化患者肝功能受損程度的價值。

2 結果

2.1 研究對象一般情況 195例乙型肝炎肝硬化患者年齡31～64歲，平均45歲；男106例（54.4%），女89例（45.6%）；肝功能分級：A級組69例（35.4%）、B級組75例（38.4%）、C級組51例（26.2%）。對照組20例，年齡26～61歲，平均43歲；男11例（55.0%），女9例（45.0%）。病例組與對照組的性別及年齡差異均無統計學意義（P＞0.05）。

2.2 乙型肝炎肝硬化患者及對照組中C3a的差異 乙型肝炎肝硬化患者及肝功能分級各組、對照組C3a濃度值見表1。行LSD法對比發現：肝功能C級組C3a水平較B級組降低（P＜0.01）；兩組均較肝功能A級組及對照組降低（均P＜0.01）；肝功能A級組與對照組C3a水平差異無統計學意義（P＞0.05）。肝功能受損程度越重，乙型肝炎肝硬化患者血液中C3a濃度越低；但肝功能輕度受損的乙型肝炎肝硬化患者血液中C3a濃度較乙肝病毒攜帶者未見明顯降低。

2.3 血液中C3a濃度用于診斷乙型肝炎肝硬化患者肝功能受損程度的價值 Pearson相關分析顯示：血液中C3a濃度與患者肝功能Child?Pugh改良分級法評分呈負相關（r=-0.649，P＜0.01）；提示肝功能評分越高，血液中C3a濃度越低。根據肝功能A級組與B級組ROC曲線（圖1）得知，如果其界值為411.5 ng/mL時，則其靈敏度為0.804，特異度為0.547，Youden指數為0.351。根據肝功能B級組與C級組ROC曲線（圖2）得知，如果其界值為342.6 ng/mL，則其靈敏度為0.787，特異度為0.493，Youden指數為0.279。

表1 全部病例及肝功能分級各組、對照組C3a濃度值Tab.1 C3a value in all cases（Group A，B，C）and control group ±s,ng/mL

表1 全部病例及肝功能分級各組、對照組C3a濃度值Tab.1 C3a value in all cases（Group A，B，C）and control group ±s,ng/mL

組別A級組B級組C級組全部病例對照組例數51 75 69 215 20 C3a 515.29±142.85 410.73±111.08 351.08±119.92 416.96±138.22 489.01±68.71

圖1 肝功能A級組與B級組ROC曲線Fig.1 The ROC curve of Child?Pugh group A and group B

圖2 肝功能B級組與C級組ROC曲線Fig.2 The ROC curve of Child?Pugh group B and group C

3 討論

肝臟作為一種免疫器官已得到越來越多的重視，研究免疫學指標在肝臟疾病中的意義也顯得更加重要。補體是機體非特異性免疫的重要體液因素，人體內肝細胞和巨噬細胞是補體的主要產生細胞［8］。補體C3是激活補體系統兩條途徑的共同終末通路，主要在肝臟內合成；肝臟功能與補體C3血液濃度水平關系密切，在乙型肝炎肝硬化患者中，隨著肝功能不斷惡化，肝臟細胞合成補體能力下降，血液中補體C3水平可能降低［6］。補體系統激活后C3裂解產生過敏毒素C3a，其具有增加血管通透性、免疫抑制、收縮平滑肌等作用［9-10］。過敏毒素C3a在血液中的穩定性較好，易于測量，是衡量血液補體水平的良好指標。

本研究發現，肝功能C級組C3a水平較B級組降低（P＜0.01）；兩組均較肝功能A級組及對照組降低（均P＜0.01）。肝功能受損程度越重，患者血液C3a水平越低。乙型肝炎肝硬化的發生是由于乙型肝炎病毒在肝內復制繁殖，引起淋巴細胞浸潤，釋放大量炎性介質和細胞因子，在清除病毒的同時，又使肝細胞變形壞死，如此反復，肝小葉中出現纖維隔和再生結節，形成假小葉，發生肝硬化。隨著肝硬化的加重，假小葉中會發生肝細胞脂肪變形、肝細胞壞死、淤膽、肝細胞不典型增生等，進一步導致患者血液膽紅素升高、白蛋白合成能力下降、凝血功能下降，肝功能惡化，肝功能Child?Pugh分級評分升高；同時肝細胞的壞死也會影響肝臟合成補體C3的能力，導致血液中C3及C3a濃度的下降。研究［11-13］表明，補體的激活參與了肝臟的再生與修復過程，而肝硬化后血液補體水平的不斷下降，也降低了肝臟的再生與修復能力，阻礙了肝臟的受損后自我修復，使肝功能進一步惡化，形成惡性循環。

國外最新研究提示：Child Pugh C期肝硬化患者血液中C3水平顯著低于Child Pugh B期肝硬化患者［14］，這也進一步佐證了本研究的結論：乙型肝炎肝硬化患者肝功能評分越高，血液中C3a濃度越低。說明肝功能的嚴重損傷影響了補體在肝細胞中的合成，導致血液中補體成分下降。本研究發現：若分別以血液中C3a濃度411.5、342.6 ng/mL為界值來界定乙型肝炎肝硬化患者肝功能Child?Pugh A/B級、B/C級，靈敏度較高，可以初步判斷其肝臟再生及修復能力；然其特異度較差，但不妨礙其成為乙型肝炎肝硬化患者肝功能術前評級的一個輔助檢查指標。研究表明血液中C3a濃度與炎癥、病毒感染、缺血再灌注、纖維化等多種因素有關［11，15-17］，這可能是特異性較差的原因之一；下一步，筆者將繼續完善試驗、擴大樣本量，剔除干擾因素，繪制更平滑的ROC曲線，尋找一個更準確的界值，用于指導乙型肝炎肝硬化患者的臨床肝功能評估。

綜上：乙型肝炎肝硬化患者肝功能Child?Pugh分級與其血液中過敏毒素C3a水平呈逆相關性，Child?Pugh分級評分越高，肝功能越差，C3a濃度越低。臨床工作中，血液中C3a水平可作為乙型肝炎肝硬化患者肝功能損傷嚴重程度評價及術前風險評估的一個參考指標。

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