海參皂苷抑制腫瘤細(xì)胞生長機(jī)制的研究

劉永平

（師宗縣人民醫(yī)院，云南 師宗 655700）

海參是海洋中常見的一種生物，具有非常高的營養(yǎng)價(jià)值。相關(guān)的藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，海參具有增強(qiáng)免疫力、抗菌、抗病毒、降血糖、抗氧化等作用，其主要有效成分為海參多糖、海參皂苷（echinoside A，EA）等。李甜甜等[1]研究指出，海參EA具有良好的防癌、抗癌等作用。為了研究海參EA抑制腫瘤細(xì)胞生長的機(jī)制，筆者進(jìn)行了以下研究。

1 方法

1.1 實(shí)驗(yàn)方法

將干海參粉碎成粉末狀，使用濃度為60%的乙醇溶液對(duì)海參粉進(jìn)行提純，制備出EA單體。使用濃度為10%的胎牛血清溶液作為培養(yǎng)基。將人肝癌細(xì)胞株HepG2（細(xì)胞A）、人結(jié)腸癌細(xì)胞株Caco-1（細(xì)胞B）分別加入不同的培養(yǎng)基中，然后將培養(yǎng)基置入二氧化碳培養(yǎng)箱中（將培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度設(shè)置為37℃），對(duì)其進(jìn)行恒溫培養(yǎng)。取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞A、細(xì)胞B，將其接種于24孔板中（每孔含1.5×104個(gè)細(xì)胞）進(jìn)行24 h的貼壁培養(yǎng)，之后將其加入到完全培養(yǎng)基中。將濃度為1.2 mmol/L、2.4 mmol/L海參EA溶液加入到不同的完全培養(yǎng)基中。選取1個(gè)無海參EA溶液的完全培養(yǎng)基作為對(duì)照組。經(jīng)過12 h、24 h的培養(yǎng)后，收集完全培養(yǎng)基中的細(xì)胞A、細(xì)胞B，然后將其置入無血清培養(yǎng)基中進(jìn)行孵化。去除未粘附的細(xì)胞后，計(jì)算各個(gè)細(xì)胞A樣品、細(xì)胞B樣品的粘附率（計(jì)算方法是：粘附率=樣品組A值/對(duì)照組A值×100%）。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0軟件對(duì)本文中的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在進(jìn)行培育12 h后和進(jìn)行培育24 h后，與未加入海參EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品相比，加入濃度為1.2 mmol/L EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品的粘附率均更低（P＜0.05）。與加入濃度為1.2 mmol/L EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品相比，加入濃度為2.4 mmol/L EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品的粘附率均更低（P＜0.05）。詳見表1。

表1 比較不同濃度的海參EA溶液對(duì)細(xì)胞A、細(xì)胞B粘附能力的影響（±s）

表1 比較不同濃度的海參EA溶液對(duì)細(xì)胞A、細(xì)胞B粘附能力的影響（±s）

注：與未加入海參EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品相比，*P＜0.05。

EA濃度（mmol/L）細(xì)胞A樣品的粘附率（%）細(xì)胞B樣品的粘附率（%）培育12 h 培育24 h 培育12 h 培育24 h 0 99.9±6.8 100.0±3.0 99.8±5.5 99.9±11.2 1.2 88.6±5.1*50.1±4.8*84.6±7.2*71.2±1.3*2.4 52.2±6.9*30.2±2.5*68.4±9.6*34.6±5.0*

3 討論

海參屬于棘皮動(dòng)物門海參綱生物，在全球范圍內(nèi)有1200多種。海參生活在廣闊的海洋中，具有較高的食用價(jià)值和醫(yī)用價(jià)值，是一種十分珍貴的海洋生物。相關(guān)的藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，海參具有抗癌、提高免疫力、抗真菌等作用，其主要有效成分包括海參多糖、海參EA、腦苷脂和神經(jīng)節(jié)苷等[2-3]。海參EA是海參體內(nèi)特有的一種三萜皂苷。羅臻等[4]研究發(fā)現(xiàn)，海參EA具有提高胰島細(xì)胞的活性、降血糖的作用。童靜靜等[5]研究指出，海參EA具有抑制腫瘤細(xì)胞生長和擴(kuò)散的作用[5]。近年來，海參EA在治療癌癥方面得到了廣泛的應(yīng)用。尹藝等[6]研究指出，海參EA具有防輻射、延緩衰老、預(yù)防骨質(zhì)疏松癥、提高免疫力及記憶力、改善尿頻癥狀等多重功效[6]。何麗霞等[7]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，海參EA的活性與其硫酸基的含量關(guān)聯(lián)密切；通常情況下，海參EA的活性與其硫酸基的含量呈正相關(guān)。本研究的結(jié)果顯示，在進(jìn)行培育12 h后和進(jìn)行培育24 h后，與未加入海參EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品相比，加入濃度為1.2 mmol/L EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品的粘附率均更低。與加入濃度為1.2 mmol/L EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品相比，加入濃度為2.4 mmol/L EA溶液的細(xì)胞A樣品和細(xì)胞B樣品的粘附率均更低。可見，海參EA能夠有效地降低腫瘤細(xì)胞的粘附能力，從而可抑制其生長[8]。

綜上所述，海參EA可通過降低腫瘤細(xì)胞粘附能力的方式抑制其生長。抗癌藥研發(fā)人員應(yīng)對(duì)上述情況予以關(guān)注。