Sysmex XN-9000血細胞分析儀網織血小板檢測及臨床應用

孔令銀

菏澤市立醫院檢驗科，山東菏澤 274000

網織血小板（reticulated platelet,RP）是從骨髓釋放出來的一種比較新的血小板，該細胞中含有殘留的核糖核酸，且細胞的體積比較大，具有活性比其他的細胞更強，因此外周血的RP可以比較精確的反應骨髓血小板的動力學，為血液疾病的診斷提供參考[1]。傳統對于RP的檢查采取流式細胞儀，但是該種檢測方法具有操作復雜、檢查時間長等缺點，從而限制了臨床的應用。Sysmex XN-9000血細胞分析儀是2012年在日本推出的一款全新的自動血細胞分析儀器，它以半導體激光流式細胞術以及核酸熒光染色和鞘流電阻抗檢測等方法進行完美的融合，擁有特色的PLT-F通道、WPC通道以及RET通道，自動化檢測程度較高。因此，該次將使用Sysmex XN-9000血細胞分析儀分析血液疾病患者以及健康人群中的RP情況，并對相關結果進行分析總結，為后續的臨床診斷提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該院收治的96例血液疾病患者，按照患者的疾病情況分為A、B、C3組。A組患者為ITP疾病，為33例，男性患者17例，女性患者16例，年齡8～55歲，平均（32.2±17.0）歲，B 組為 AL 患者 25 例，男性患者 13例，女性患者 12例，年齡5～65歲，平均（33.2±10.2）歲，C組患者為AA，有38例，男性患者19例，女性患者 19 例，年齡 6～62 歲，平均（36.0±12.5）歲。 另選擇同期進行健康體檢的健康人群50名為對照組，男性29 名，女性 21 名，年齡 4～65 歲，平均（35.2±11.0）歲，其血小板正常，肝功能以及心電圖等檢查均正常，排除心血管疾病、糖尿病以及內分泌疾病患者。經統計分析以上4組人群中的年齡分布、性別構成比等均差異無統計學意義（P＞0.05），可以進行組間的互相比較。且該次的研究患者和家屬均知情并簽訂知情協議，該次方案通過倫理委員會的審核。

1.2 研究方法

1.2.1 試劑與儀器 Sysmex XN-9000血細胞分析為原裝進口，來自于日本東亞公司，96例血液疾病患者以及50名健康人群均來自該院，所有標本均為真空采血，使用EDTA-K2抗凝，采集血液后室溫放置，然后在4 h內完成網織血小板的檢測。

1.2.2 檢測方法 直接對相關受試人員的外周血進行檢測，使用特殊的熒光染料比如polymehtine以及Oxazine，與網織紅細胞或者網織血小板中的DNA結合。根據細胞的大小將紅細胞和血小板進行分開，并根據DNA的具體含量將細胞分為成熟以及未成熟，將成熟的血小板以及網織血小板給予不同的染色，通過分析獲得RP比例[2]。

1.3 統計方法

相關的數據納入SPSS 22.0統計學軟件中進行分析比較，（x±s）表示計量資料，并采取 t檢驗分析，率（%）表示等級資料，然后采取H檢驗分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 AA、ITP、AL組與對照組RP等指標比較

經過分析檢測，3組患者的RP水平值均明顯高于對照組，差異有統計學意義，A組及B組的水平值高于對照組，但C組的水平值明顯低于對照組；血小板計數（PLT）、平均血小板體積（MPV）也存在一定程度差異，見表1。

表1 3組患者與對照組RP比較(x±s)

2.2 3組患者的診斷準確性比較

血小板的相關抗體PAIgG、PAIgA以及PAIgM熒光百分率為（10.4±5.0）、（9.4±4.4）、（7.2±3.1），對于疾病的診斷準確性中，A組＞B組＞C組，差異有統計學意義，見表2。

表2 3組患者的診斷準確性比較

3 討論

RP是從骨髓中釋放出來的新的血小板，與成熟的血小板比較，他具有更大的體積因此更加容易觀察到，此外其活躍性更高，蛋白質的合成能力也更強，細胞質中含有較多的RNA，可以被核酸熒光染料染色，介于骨髓成熟的巨核細胞和成熟的血小板之間，是一種剛從骨髓釋放出來的未成熟的細胞[3]。RP計數可以比較準確的反應骨髓血小板的生成情況，但單純的血小板僅能反應外周血小板數量，不能反應骨髓血小板生程情況，因此在對于骨髓血小板的預測中，RP具有更高的價值。

3.1 RP對于ITP診斷應用

ITP為免疫系統反應引起的血小板破壞增加出血性的一種血液疾病，主要的特征為血小板減少以及骨髓巨核細胞增加。該疾病在育齡的階段女性發病高于男性，但其他階段兩者的差異不顯著[4]。該次對于33例ITF患者進行檢測RF，并與健康人群的計數進行比較，結果顯示ITF患者的計數明顯的高于正常的對照組，韓琳琳[5]流式細胞儀分析ITF患者中的RP情況，顯示ITP患者中的RP為（24.01±6.24）%，明顯高于正常人群的（7.20±1.87）%，提示了 TTF換種中血小板破壞增加，使得骨髓生產血小板的速度加快，外周新生的血小板增加，使得了RF的計數提高。

3.2 RP對于AL診斷應用

AL為造血干細胞惡性克隆性疾病，患者體內存在的正常克隆造血以及白細胞克隆造血兩組互相競爭的細胞群。在疾病發生時，機體內骨髓總的異常原始細胞以及白血病細胞就會大量的繁殖，從而抑制了其他細胞的正常造血，使得患者的機體免疫力下降容易出現感染、出血以及貧血等嚴重的并發癥，如果不能得到及時的治療會危及患者的生命。在該次的檢查中我們發現，AL患者中的RP計數高于正常的對照組，馮萍等[6]采用流式細胞儀檢查AL患者的RP情況，結果顯示在初診期患者的RP為 （5.4±4.25）%， 緩解期為 （16.54±2.64）%，在不同的時期其水平值差異明顯，而健康人群為（8.27±2.5）%，明顯低于患者的水平值，結果與該次報道基本一致。提示該疾病的血小板生產速度比較快。

3.3 RP對于AA診斷應用

AA是一組由于多種原因所導致的骨髓造血功能障礙性疾病，主要的臨床特征為骨髓造血干細胞增生的降低、外周全血細胞減少等，臨床表現為出血、貧血以及感染，研究顯示AA的發生與化學藥物、遺傳以及放射等相關。年齡在15～25歲為該疾病的高發時間段，男性一般多于女性。在該次的分析中發現，AA患者的RP計數低于正常人群，主要是因為造血細胞受到抑制，使得血小板的生成減少，最終使得骨髓血小板生產出現障礙。蔡力力等[7]采用XE-5000檢測AA患者中的RP 情況，結果為（1.87±1.63）%，正常為（5.83±3.10）%，結果與該次報道基本相近。

3.4 Sysmex XN-9000血細胞分析儀

Sysmex XN-9000血細胞分析儀是從日本發展而來的一種細胞分析儀，因為具有高效、快捷以及高準確度等優點，因此在臨床的應用中一直受到關注。但隨著實驗室檢查的不斷增加以及對于自動化要求的增加使得，一個實驗室通常會擁有多臺血細胞分析儀，而不同的品牌和不同的型號會使得結果存在一定的差異，因此在實驗室使用該儀器時建議要對儀器進行校正,對于該儀器一般測試的值與理論值比較時a值的范圍（1.0±0.05）范圍內，相關系數＞0.975[8-10]。 Sysmex XN-9000 血細胞分析儀具有較高的精密度和準確度，并且線性范圍較廣，相關性好，攜帶的污染率低，與其他的品牌儀器具有良好的可比性，分析的結果與廠家規定的性能基本一致，因此保證了相關的檢測結果的準確性[11-12]。此外該儀器的操作也比較簡單，適合于大批量的檢測，可以輔助臨床相關血液疾病等檢測，臨床應用范圍廣。

4 小結

在該次的資料分析中，采取XN-9000血細胞分析儀分析血液疾病中網織血小板的情況，結果發現在特發性血小板減少性紫癜以及再生障礙性貧血患者中，期體內的網織血小板計數明顯高于正常人群，而急性白血病的患者網織血小板計數明顯低于正常對照組，說明了網織血小板在不同的人群中其水平含量具有較大的差異，因此測定血液疾病患者的外周血網織血小板的水平值可以初步判斷患者的疾病類型，為后續的臨床診斷提供參考。3種疾病的準確性比較中，通過檢測網織血小板相關的抗體如PAIgG、PAIgA以及PAIgM熒光百分率可以得出，檢測特發性血小板減少性紫癜的準確率高于再生障礙性貧血以及急性白血病。說明取XN-9000血細胞分析儀在診斷不同疾病時具有不一樣的敏感性，臨床可以根據患者的具體情況選擇檢測的方法。3組患者的血小板計數均明顯的低于正常人群，說明以上3種血液疾病的患者外周血小板均較低，而均有ITP組患者的MPV稍微高于正常人群，提示以上3種血液疾病采取XN-9000血細胞分析儀平均血小板體積時獲得的結果無特征性，對于疾病的判斷不利，因此在后續的臨床應用中應該避免使用XN-9000血細胞分析儀檢測血液疾病患者的MPV。

綜上所述，Sysmex XN-9000血細胞分析儀可以比較準確的分析網織血小板的數量，從而反應骨髓巨核系統生成血小板的情況，對于血液疾病的診斷具有較高的應用價值。

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