青稞酒中塑化劑測(cè)定方法研究及方法確認(rèn)

馬淑珍，蔡林森，常立娟，王平平，王慧麗，秦文杰，王 茹，李 霞

（青海省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，青海西寧810001）

鄰苯二甲酸酯類，又稱增塑劑，俗稱塑化劑，是一類可以增強(qiáng)其可塑性、提高產(chǎn)品強(qiáng)度的有機(jī)物。目前廣泛應(yīng)用于高分子材料的助劑[1-3]，鄰苯二甲酸酯類也廣泛應(yīng)用在塑料制品中，可以通過空氣、水、存儲(chǔ)容器及包裝材料等直接或間接的轉(zhuǎn)移到食品中，從而污染食品[4-6]。國(guó)內(nèi)外試驗(yàn)研究表明，塑化劑可以導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞存活率降低、肝臟功能下降，具有突變性和致癌性[7]。

青稞酒生產(chǎn)過程產(chǎn)生的塑化劑主要來源于乳膠管、塑料輸酒管、酒桶以及塑料包裝材料等塑料制品。由于鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)能溶于乙醇，經(jīng)過一段時(shí)間，青稞酒中的鄰苯二甲酸酯類的含量會(huì)升高[8]。人們飲用后會(huì)在體內(nèi)積累，對(duì)人體的健康造成持續(xù)性的危害[9]。塑料制品中常用的塑化劑是鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)，因此，建立一種前處理方法簡(jiǎn)單、操作方便、測(cè)量準(zhǔn)確、精密度好的檢測(cè)青稞酒中DBP的方法是非常重要的。

1 材料、儀器和試驗(yàn)方法

1.1 試劑

鄰苯二甲酸二丁酯（DBP），濃度為100 μg/mL；正己烷（色譜純）；青稞酒（青海青稞酒生產(chǎn)企業(yè)）。

1.2 儀器

7890A-7000C三重四極桿氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀（安捷倫科技有限公司）；超純水機(jī)（GWA-UN4-20普析通用）；平行蒸發(fā)儀（BUCHI Synlore）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 色譜和質(zhì)譜條件

色譜柱：DB-5毛細(xì)管氣相色譜柱（30m×0.25mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度為260℃；程序升溫：初始溫度80℃，保持2 min，以20℃/min升溫到230℃，保持5 min，再以5℃/min升溫到270℃，保持10 min；載氣為高純氦氣，流速為1 mL/min；進(jìn)樣量為1 μL，以不分流的方式進(jìn)樣。電離方式為電子轟擊電離源（EI），電離能量70 eV，傳輸線溫度為270℃，離子源溫度為230℃，監(jiān)測(cè)方式為選擇性離子掃描（SIM），溶劑延遲6 min。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制

取1 mL 100 μg/mL的DBP標(biāo)準(zhǔn)溶液用正己烷定容于10 mL容量瓶中，配得10 μg/mL的中間標(biāo)準(zhǔn)溶液。用正己烷稀釋中間標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別配制成0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL 的 標(biāo) 準(zhǔn) 工 作溶液。

1.3.3 樣品前處理

方法一：正己烷直接提取。稱取1.0 g青稞酒樣品于25 mL具塞磨口離心管中，加入2～4 mL蒸餾水，漩渦混合均勻，再準(zhǔn)確加入10 mL的正己烷，渦旋1 min，超聲20 min，以1000 r/min離心10 min，取上清液，供GC-MS分析。

方法二：用平行蒸發(fā)除去乙醇后用正己烷提取。稱取1.0 g青稞酒樣品于平行蒸發(fā)儀試管中，在減壓的條件下蒸發(fā)至近干以除去乙醇和其他易揮發(fā)性物質(zhì)，再加5 mL正己烷溶解，超聲10 min，轉(zhuǎn)移到25 mL具塞磨口離心管，用正己烷定容至10 mL，渦旋1 min，超聲20 min，以1000 r/min離心10 min，取上清液，供GC-MS分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍選擇及檢出限

根據(jù)樣品的前處理方法和定量限的要求，本試驗(yàn)選擇了 0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL 為線性范圍，每個(gè)濃度點(diǎn)隨機(jī)重復(fù)進(jìn)樣3次，取其平均值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)考察了濃度和標(biāo)準(zhǔn)偏差的關(guān)系，其比值為一常數(shù)，選取了直線回歸方程。得到的線性方程為2.92×107-5.30×105，相關(guān)系數(shù)R2=0.996。以空白樣品加標(biāo)試驗(yàn)測(cè)定DBP信噪比為3:1的濃度為該方法的最低檢出限，檢出限為0.02 mg/kg。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)驗(yàn)證

根據(jù)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制要求，需要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)確性進(jìn)行驗(yàn)證。本試驗(yàn)通過采取不同批次、不同生產(chǎn)廠家、不同濃度的DBP標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別配制成 0.05 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL 的濃度，在相同的試驗(yàn)條件下測(cè)定3次，取其平均值，其偏差分別為2.0%、5.0%、2.0%，均小于10%，符合實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的要求。其結(jié)果見表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的驗(yàn)證結(jié)果

2.3 樣品中乙醇除去對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響

考慮到青稞酒中含有大量的乙醇，而鄰苯二甲酸二丁酯能溶于乙醇，導(dǎo)致提取率偏低；同時(shí)考慮青稞酒中含有大量的水分，可能對(duì)離子源的燈絲造成損害。本試驗(yàn)對(duì)比直接提取和除去乙醇后再提取對(duì)DBP結(jié)果的影響，其結(jié)果見表2。

從表2可知，添加不同水平濃度的DBP，用平行蒸發(fā)除去乙醇后DBP的回收率均高于直接提取的，可能是青稞酒中含有的乙醇和多種雜醇類、酯類和酸類物質(zhì)對(duì)檢測(cè)有干擾，所以本試驗(yàn)選擇平行蒸發(fā)儀除去醇類和揮發(fā)的物質(zhì)后再提取。

表2 直接提取和除去乙醇對(duì)DBP測(cè)定結(jié)果的影響

表3 加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

2.4 方法的準(zhǔn)確度和精密度

在空白樣品中分別加入0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、1.0 μg/mL 3個(gè)水平濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按相同的試驗(yàn)條件處理，用平行蒸發(fā)儀除去乙醇后用正己烷提取，在相同的儀器條件下重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算回收率及精密度，其結(jié)果見表3。質(zhì)控樣品重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算平均值，其Z值比分為0.42，滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制要求。

2.5 樣品分析

對(duì)52個(gè)青稞酒樣品進(jìn)行分析，有4個(gè)樣品中DBP的含量較高，分別為0.68 mg/kg、0.85 mg/kg、1.32 mg/kg、2.15 mg/kg，其他青稞酒中DBP的含量均低于定量限。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)通過優(yōu)化色譜條件和樣品前處理方法，建立了一種氣相質(zhì)譜串聯(lián)法測(cè)定青稞酒中鄰苯二甲酸二丁酯的檢測(cè)方法。對(duì)不同青稞酒廠家的青稞酒進(jìn)行分析，有4個(gè)樣品的含量較高。試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法的前處理操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，可用于日常工作中青稞酒中DBP的檢測(cè)，是一種實(shí)用性較強(qiáng)的檢測(cè)技術(shù)。

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