生物質(zhì)炭浸提液對水稻種子萌發(fā)及幼苗生長的影響

許 唯，張 蛟，姚易寒，宋余澤，胡帥棟*(.嘉興市農(nóng)業(yè)科學研究院 園藝研究所，浙江 嘉善 400； .江蘇沿江地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所，江蘇 南通 654；.浙江農(nóng)林大學 環(huán)境與資源學院，浙江 杭州 00)

水稻是世界上三大糧食作物之一，是我國的最主要的糧食作物，稻米質(zhì)量安全事關(guān)國計民生[1-2]。中國糧食安全面臨著結(jié)構(gòu)不合理、環(huán)境可持續(xù)性較差等問題[2-3]。因此，提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中資源利用效率、生態(tài)環(huán)境可持續(xù)性是當下迫切需要解決的問題。

生物質(zhì)炭是指生物質(zhì)在無氧或部分缺氧條件下通過熱裂解(>250 ℃)制備而成，具有多孔性、吸附性和穩(wěn)定性等特點的芳香類化學物質(zhì)[4-5]，能改善土壤pH、容重，具有持水性和保肥性，被認為是一種良好可持續(xù)性的土壤改良劑，并廣泛應用于農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)與生態(tài)保護方面[6-7]。然而，生物質(zhì)在熱解過程中產(chǎn)生的焦油、多環(huán)芳烴(PAHs)等，會隨冷卻吸附于生物質(zhì)炭表面，且部分生物質(zhì)材料自身含有的重金屬等潛在污染物會隨熱解過程富集在生物質(zhì)炭中[8-9]。因此，當生物質(zhì)炭施用于土壤中，可能會對植物、土壤微生物及土壤環(huán)境產(chǎn)生危害[10]。

植物種子萌發(fā)和幼苗生長發(fā)育階段對毒害較為敏感，有相關(guān)報道對水稻小麥種子萌發(fā)做了毒理性試驗，但都在較高pH培養(yǎng)條件下[11-12]。本研究采用低溫熱裂解的竹葉生物炭pH與稻田基本相一致，通過控制其浸提液濃度對不同水稻種子進行培養(yǎng)，以探究不同濃度生物質(zhì)炭浸提液對不同水稻種子萌發(fā)和幼苗生長發(fā)育的潛在影響，從而為實際生產(chǎn)過程中對生物質(zhì)炭施用量和水稻生產(chǎn)提供科學依據(jù)，促進水稻產(chǎn)業(yè)發(fā)展，改善環(huán)境生態(tài)和提高資源利用效益。

1 材料與方法

1.1 材料

竹葉生物質(zhì)炭購自浙江布萊蒙農(nóng)業(yè)科技股份有限公司，該生物質(zhì)炭是由新鮮采集竹葉在缺氧環(huán)境中經(jīng)300 ℃熱裂解制備而成。生物質(zhì)炭烘干過2 mm篩后置于自封袋中保存并用于試驗。竹葉生物質(zhì)炭基本性質(zhì)為pH值6.58(H2O)，KCl 6.15，電導率(EC)值686.0 μS·cm-1。粳型常規(guī)稻鹽豐47、秈型常規(guī)稻珍珠糯和秈型三系雜交稻甬優(yōu)15號種子購于市場。

1.2 方法

1.2.1 生物質(zhì)炭理化性質(zhì)測定

生物質(zhì)炭pH與電導率(EC)由樣品過2 mm篩后，按1∶20(m/V)的炭水比將竹葉生物炭和超純水混合攪拌，靜置30 min后用pH計和電導率儀測定。竹葉生物質(zhì)炭化學組分含量的測定參照傳統(tǒng)土壤測定方法[13]，結(jié)果如表1所示。

1.2.2 生物質(zhì)炭水浸提液制備

稱取過2 mm篩后竹葉生物質(zhì)炭樣品5 g，用超純水按炭水比1∶15，混合于100 mL塑料瓶中，25 ℃條件下180 r·min-1振蕩12 h，0.45 μm濾膜真空抽濾，所得液體利用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(ICP-MS 7000 DV)分析溶液中水溶性的化學組分含量，結(jié)果如表1所示。抽取的濾液分別稀釋到0%(CK)、10%(相當于炭水比1∶150)、30%(1∶50)、50%(1∶30)、75%(1∶20)、100%(1∶15)，采用6種不同濃度的浸提液進行后續(xù)水稻發(fā)芽試驗。

表1 竹葉生物質(zhì)炭(BC)及其水浸提液(AE)的化學組分

注：-表示未檢測到。

1.2.3 種子發(fā)芽試驗

種子活力測定均以100粒種子為單次重復，每組處理設4次重復。所有供試種子均先經(jīng)過5% NaClO，10 min和3% H2O2，24 h浸種處理，先后用超純水沖洗3次。將隨機分樣數(shù)出的種子均勻置于鋪有用生物質(zhì)炭水浸提液浸濕的雙層發(fā)芽紙的發(fā)芽盒內(nèi)，置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

設置培養(yǎng)條件。20 ℃黑暗條件下16 h，30 ℃光照條件下8 h(光照度為8 000 lx)。第3天開始以種子根長超過種子長度，芽長達到種子長度一半以上為標準統(tǒng)計發(fā)芽數(shù)，每天記錄發(fā)芽種子數(shù)，直至第14天；發(fā)芽第5天、第14天分別統(tǒng)計水稻種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率

1.2.4 幼苗生長測定

水稻種子在添加不同濃度竹葉生物質(zhì)炭水浸提液處理培養(yǎng)14 d后，挑取長勢平均的20株幼苗用游標卡尺測定芽長、根長；再將上述幼苗用濾紙吸干水分后測定20株水稻幼苗鮮重。試驗均重復4次。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用Excel 2010和SPSS 22.0統(tǒng)計分析，Origin 2017軟件作圖。采用單因素方差分析(One-way ANOVA)和最小顯著差法(LSD)對不同數(shù)據(jù)組之間的差異進行比較，顯著性水平為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 對不同水稻種子萌發(fā)的影響

由表2可知，隨著竹葉生物質(zhì)炭水浸提液濃度的增加，3個不同水稻品種的發(fā)芽勢均基本表現(xiàn)為一定的抑制趨勢。與CK相比，在濃度100%浸提液培養(yǎng)下，鹽豐47、珍珠糯和甬優(yōu)15號3個水稻品種的種子發(fā)芽勢均出現(xiàn)顯著降低；然而，在濃度10%浸提液培養(yǎng)對珍珠糯和甬優(yōu)15號的種子發(fā)芽勢具有顯著的提高。同時，在不同濃度浸提液培養(yǎng)下，3個水稻品種的種子發(fā)芽指數(shù)與種子發(fā)芽勢具有相似的變化趨勢。

表2 竹葉生物質(zhì)炭水浸提液對不同水稻種子萌發(fā)相關(guān)指標的影響

注：同列不同小寫字母表示平均值在P<0.05水平上差異極顯著。

另外，不同濃度浸提液培養(yǎng)對3個水稻品種的種子發(fā)芽率均無顯著影響；在幼苗鮮重方面，濃度10%浸提液對鹽豐47品種幼苗有顯著提高，但對珍珠糯和甬優(yōu)15號品種無顯著性變化。濃度50%、75%和100%的浸提液都對鹽豐47品種幼苗鮮重產(chǎn)生顯著性的抑制作用，其鮮重分別降低3.3%、10.7%和17.2%。濃度75%和100%的浸提液都對珍珠糯品種幼苗鮮重產(chǎn)生顯著性的抑制作用，其鮮重分別降低7.2%和21.0%。在甬優(yōu)15號水稻種子中只有濃度100%的浸提液對其幼苗鮮重產(chǎn)生9.5%的顯著降低。

綜合以上結(jié)果，不同粳稻、秈稻和雜交秈稻種子活力對生物質(zhì)炭水浸提液的響應基本一致。10%濃度下的竹葉生物質(zhì)炭水浸提液對鹽豐47、珍珠糯和甬優(yōu)15號的活力指標和幼苗鮮重具有顯著促進作用。而100%的竹葉生物質(zhì)炭水浸提液對鹽豐47、珍珠糯和甬優(yōu)15號的活力指標和幼苗鮮重具有顯著的抑制作用。在高濃度(≥50%)竹葉生物質(zhì)炭水浸提液培養(yǎng)下，鹽豐47具有比珍珠糯和甬優(yōu)15號更抗逆的表現(xiàn)。而在低濃度(10%)竹葉生物質(zhì)炭水浸提液培養(yǎng)條件下，生物質(zhì)炭水浸提液對甬優(yōu)15號種子活力具有更強的促進作用。

2.2 對不同水稻幼苗芽根長度的影響

由圖1結(jié)果可知，竹葉生物質(zhì)炭水浸提液在濃度10%～30%下對鹽豐47幼苗芽長沒有影響，但在濃度50%～100%下鹽豐47幼苗芽長相比對照減少7.3%～10.4%。

所有不同濃度的竹葉生物質(zhì)炭浸提液對鹽豐47的幼苗根長都產(chǎn)生了促進作用，增幅為15.5%～63.2%。浸提液在濃度10%～50%下對珍珠糯幼苗芽長沒有影響，但在濃度75%～100%下，鹽豐47幼苗芽長相比對照減少10.5%～29.5%。而30%～75%濃度的浸提液促進了珍珠糯幼苗根長，增幅為29.6%～38.4%。對于品種甬優(yōu)15號，只有75%濃度的浸提液抑制其幼苗芽長，相比對照，其幼苗芽長減少8.3%。所有不同濃度的浸提液對甬優(yōu)15號的根長均有促進作用，而50%～100%濃度的浸提液較對照增加23.4%～47.9%。另外，水稻幼苗根芽比隨竹葉生物質(zhì)炭水浸提液濃度的增加而增加(表2)，與上述結(jié)果一致，表明竹葉生物質(zhì)炭水浸提液對不同水稻種子幼苗根系生長具有激發(fā)作用，而且隨浸提液濃度增加，根的生長也增加。綜合以上結(jié)果，添加生物質(zhì)炭水浸提液對不同粳稻、秈稻和雜交秈稻幼苗生長狀況的影響基本一致，且對幼苗生長過程中根系生長的影響最為顯著。

不同小寫字母表示平均值在<0.05水平上差異極顯著圖1 竹葉生物質(zhì)炭水浸提液對不同水稻幼苗芽長和根長的影響

3 小結(jié)與討論

本研究結(jié)果表明，生物質(zhì)炭水浸提液對水稻種子活力基本呈“低促高抑”影響。生物質(zhì)炭中除了含有植物生長所需的營養(yǎng)元素外，也含有重金屬、PAHs等潛在土壤污染物。通過對該生物質(zhì)炭檢測，發(fā)現(xiàn)其重金屬含量均低于GB15618—1995土壤環(huán)境質(zhì)量標準。而在很多研究報道中都檢測出生物質(zhì)炭PAHs含量超標[9,12]，并有研究報道PAHs(Na、BaA、Ch)對植物種子萌發(fā)和幼苗生長具有顯著的抑制作用[14]，可推測PAHs可能是潛在抑制水稻種子活力的主要因素。王晉等[15]研究報道，添加高濃度竹炭、稻稈炭和煙稈炭對水稻幼苗根長與芽長都產(chǎn)生了抑制。

本試驗中，3種不同水稻品種在生物質(zhì)炭條件下，幼苗芽長具有抑制作用，但對幼苗根長卻產(chǎn)生促進作用，這可能是試驗過程中培養(yǎng)環(huán)境不同所造成的差異。合理控制生物炭的使用量對農(nóng)作物不會產(chǎn)生明顯影響，甚至會促進植物的萌發(fā)和生長[16-18]。本研究結(jié)果支持以上結(jié)論，10%濃度生物質(zhì)炭水浸提液對珍珠糯和甬優(yōu)15號2個品種的水稻種子的萌發(fā)均達到一定的促進作用。

因此，生物質(zhì)炭在農(nóng)田林地等推廣應用之前，其存在的潛在生態(tài)土壤環(huán)境風險，還需針對特種植物生長及土壤相關(guān)生物學性質(zhì)進一步研究分析。此外，對不同材料、不同裂解溫度和不同制作工藝的生物質(zhì)炭潛在毒性評估需要更深入的研究。由于本研究只對生物質(zhì)炭對水稻種子萌發(fā)和幼苗生長的影響進行研究，而實際施用到土壤中，土壤及土壤微生物會對部分毒害物質(zhì)進行吸附和降解[11]，因此在將來的研究中需開展大田試驗進一步驗證。

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