脾多肽輔助化療對乳腺癌患者腫瘤負(fù)荷、免疫功能的影響及不良反應(yīng)評估

王根進(jìn)，魏正闊，晏大學(xué)，胡濤

湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬襄陽市第一人民醫(yī)院甲狀腺乳腺外科，湖北 襄陽441000

乳腺癌是中國女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率呈升高趨勢。由于乳腺癌早期缺乏特異性的臨床癥狀，B超和鉬靶等篩查手段也難以發(fā)現(xiàn)較小的病灶，所以目前乳腺癌的早期診斷率仍較低，多數(shù)患者確診時已為進(jìn)展期乳腺癌并需要進(jìn)行乳腺癌根治術(shù)，嚴(yán)重者甚至錯過了手術(shù)切除的時機(jī)。新輔助化療是臨床治療無法手術(shù)切除的晚期乳腺癌的主要輔助方法，該治療方式不僅能夠殺滅腫瘤細(xì)胞、縮小瘤體體積、降低腫瘤分級，還能夠爭取手術(shù)切除機(jī)會[1-2]。但是，化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時也會對正常的組織和臟器造成損傷，抑制免疫功能。因此，在晚期乳腺癌患者接受新輔助化療的過程中，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行必要的支持治療以保護(hù)臟器功能，改善免疫功能。脾多肽是從健康小牛脾臟組織中提取的混合制劑，含有多肽、氨基酸、核酸、總糖等成分，對免疫功能具有調(diào)節(jié)作用[3-4]。本研究分析了脾多肽輔助化療對乳腺癌患者腫瘤負(fù)荷、免疫功能及不良反應(yīng)的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年10月至2016年2月于湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬襄陽市第一人民醫(yī)院確診并治療的94例局部晚期乳腺癌患者的臨床資料，所有患者均經(jīng)乳腺穿刺活檢確診為乳腺癌，TNM分期為Ⅱb～Ⅲ期，排除Ⅰ～Ⅱa期乳腺癌、炎性乳腺癌以及惡性腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、合并心肝腎功能不全的患者。根據(jù)是否接受脾多肽輔助治療分為觀察組和對照組，每組47例。觀察組患者接受多西紫杉醇+表柔比星+環(huán)磷酰胺方案（TAC）化療聯(lián)合脾多肽輔助治療，年齡（49.5±6.9）歲；TNM分期：Ⅱb期22例，Ⅲ期25例；浸潤性導(dǎo)管癌32例，浸潤性小葉癌15例。對照組患者接受TAC方案化療，年齡（49.1±6.5）歲；TNM分期：Ⅱb期20例，Ⅲ期27例；浸潤性導(dǎo)管癌30例，浸潤性小葉癌17例。兩組患者年齡、腫瘤TNM分期及腫瘤分類比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

兩組患者均按照TAC方案進(jìn)行化療：多西紫杉醇75 mg/m2，靜脈滴注，第1天，表柔比星65 mg/m2，靜脈滴注，第1天，環(huán)磷酰胺500 mg/m2，靜脈滴注，第1天，21天為一個周期；化療期間給予地塞米松，每次4 mg，每天2次，粒細(xì)胞集落刺激因子支持治療。觀察組患者在進(jìn)行上述化療的同時給予脾多肽進(jìn)行治療：將脾多肽注射液10 ml加入500 ml 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注，每天1次，化療周期第1～14天給藥。兩組化療均進(jìn)行4個周期。

1.3 血清指標(biāo)檢測方法

治療9周后，采集兩組患者的外周靜脈血5 ml，離心得到血清。采用免疫化學(xué)發(fā)光試劑盒測定糖類抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）、糖類抗原153（carbohydrate antigen 153，CA153）、糖類抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）、腫瘤特異性生長因子（tumor supplied group of factor，TSGF）、組織多肽特異性抗原（tissue polypeptide-specific antigen，TPS）的含量，采用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒測定免疫球蛋白G（IgG）、IgM、IgA的含量，采用全自動生化分析儀測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate transaminase，AST）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（gamma-glutamyl transferase，GGT）、肌酐（creatinine，Cr）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）的含量。

1.4 免疫指標(biāo)檢測方法

治療9周后，采集兩組患者的外周靜脈血5 ml，EDTA抗凝，在流式細(xì)胞反應(yīng)管中加入CD4、CD25、CD127、CD45RA、CD45RO的熒光抗體10 μl，而后每管加入抗凝血50 μl，避光孵育20 min后加入溶血劑A 600 μl并充分混勻，加入溶血劑B 260 μl并再次混勻。充分溶血后，加入磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）4 ml并離心，棄去上清并用500 μl PBS重懸細(xì)胞，在流式細(xì)胞儀上測定CD4+CD25highCD127lowTreg細(xì)胞、CD45RA+T細(xì)胞、CD45RO+T細(xì)胞的含量。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清腫瘤標(biāo)志物測定量的比較

治療前兩組患者血清腫瘤標(biāo)志物CA125、CA153、CA19-9、TSGF、TPS水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療9周后，觀察組患者血清中CA125、CA153、CA19-9、TSGF、TPS水平均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1 兩組患者血清腫瘤標(biāo)志物測定量的比較（U/L，±s）

表1 兩組患者血清腫瘤標(biāo)志物測定量的比較（U/L，±s）

2.2 體液免疫和細(xì)胞免疫相關(guān)指標(biāo)的比較

治療9周后，觀察組患者血清中體液免疫分子IgG、IgM、IgA水平均高于對照組，觀察組患者外周血中細(xì)胞免疫指標(biāo)CD4+CD25highCD127lowTreg細(xì)胞、CD45RO+T細(xì)胞水平均低于對照組，CD45RA+T細(xì)胞水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（表 2）

2.3 肝腎功能相關(guān)指標(biāo)的比較

治療前后兩組患者血清中ALT、AST、GGT、Cr、BUN水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（表 3）

3 討論

TAC方案是乳腺癌患者常用的新輔助化療方案，能夠殺滅腫瘤細(xì)胞、縮小瘤體體積、降低腫瘤分級并爭取手術(shù)切除機(jī)會[5-6]。但是，化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時也會對正常的組織和臟器造成損傷，抑制免疫功能，因此需要聯(lián)合使用必要的支持治療藥物。脾多肽是具有免疫調(diào)節(jié)作用的生物制劑，其有效成分是從健康小牛脾臟組織中提取得到的多肽、游離氨基酸、核酸、總糖等，能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞以及T淋巴細(xì)胞的成熟，激活未致敏的淋巴細(xì)胞。除了上述免疫調(diào)節(jié)功能外，脾多肽還能通過抑制細(xì)胞內(nèi)糖酵解的方式來減少腫瘤的能量來源，阻礙細(xì)胞周期的進(jìn)行，抑制細(xì)胞的增殖，進(jìn)而起到抑癌作用[7]。在本研究中，在TAC方案化療的基礎(chǔ)上加用脾多肽注射液進(jìn)行輔助治療，旨在發(fā)揮脾多肽的免疫調(diào)節(jié)作用以及抑癌作用。首先，分析兩組患者治療后的肝腎功能指標(biāo)發(fā)現(xiàn)：兩組患者血清中ALT、AST、GGT、Cr、BUN水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，說明脾多肽注射液用于乳腺癌的治療安全性理想，不會增加肝腎負(fù)擔(dān)并造成功能不全。

表2 兩組患者免疫相關(guān)指標(biāo)的比較（±s）

表2 兩組患者免疫相關(guān)指標(biāo)的比較（±s）

表3 兩組患者肝腎功能相關(guān)指標(biāo)（±s）

表3 兩組患者肝腎功能相關(guān)指標(biāo)（±s）

血清腫瘤標(biāo)志物檢測是臨床上評價腫瘤負(fù)荷程度的常用方法，腫瘤細(xì)胞增殖越活躍、腫瘤負(fù)荷越大，分泌進(jìn)入血液循環(huán)的腫瘤標(biāo)志物也越多。CA125、CA153、CA19-9、TSGF、TPS是診斷乳腺癌并評估病情的常用腫瘤標(biāo)志物。CA125和CA19-9對乳腺癌診斷的特異性相對較低，在多種惡性腫瘤患者的血清中均會顯著升高；CA153對乳腺癌的診斷具有較高特異性，在乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展過程中，血清CA153的生成顯著增多[8]；TSGF是由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的一類較為特異的細(xì)胞因子，其主要作用在于干預(yù)腫瘤生長、浸潤及血管新生的調(diào)節(jié)且與腫瘤負(fù)荷具有良好的一致性[9]；TPS是上皮腫瘤細(xì)胞的標(biāo)志分子且與細(xì)胞增殖的活力直接相關(guān)[10]。為了明確脾多肽輔助治療對乳腺癌生長的抑制作用，本研究分析了兩組患者治療后血清腫瘤標(biāo)志物的含量，結(jié)果顯示：治療后觀察組患者血清中CA125、CA153、CA19-9、TSGF、TPS水平均低于對照組，說明脾多肽輔助治療能夠改善TAC化療方案對乳腺癌的殺傷效果，降低腫瘤負(fù)荷及血清腫瘤標(biāo)志物含量。

脾多肽注射液不僅本身具有抑癌作用，還能夠通過多肽、游離氨基酸、核酸等成分來調(diào)節(jié)免疫功能并通過抗腫瘤免疫來殺傷乳腺癌細(xì)胞[11-12]。免疫逃逸是惡性腫瘤發(fā)生的重要環(huán)節(jié)，體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答是機(jī)體抗腫瘤免疫的重要組成部分[13]。化療藥物在殺傷癌細(xì)胞的同時也會影響機(jī)體的免疫功能，再加上惡性腫瘤長期對營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，乳腺癌患者接受化療后會處于免疫抑制狀態(tài)[14-15]。脾多肽注射液對免疫功能具有調(diào)節(jié)作用，所補(bǔ)充的氨基酸能夠直接作用于免疫球蛋白合成的原料并改善機(jī)體的體液免疫功能。本研究結(jié)果顯示，治療后觀察組患者血清IgG、IgM及IgA水平均高于對照組。Treg是具有免疫抑制效應(yīng)的T淋巴細(xì)胞亞群，其表面標(biāo)志分子是高表達(dá)的CD4、CD25以及低表達(dá)的CD127，惡性腫瘤患者體內(nèi)Treg細(xì)胞功能增強(qiáng)是造成腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[16-17]。CD45RA+T細(xì)胞是初始T細(xì)胞，在腫瘤細(xì)胞的刺激下會分化為CD45RO+記憶T細(xì)胞，腫瘤負(fù)荷越大，CD45RO+T細(xì)胞含量越多、CD45RA+T細(xì)胞消耗越大[18]。本研究對兩組患者T淋巴細(xì)胞亞群水平的分析證實：觀察組患者外周血中CD4+CD25highCD127lowTreg細(xì)胞、CD45RO+T細(xì)胞水平低于對照組患者，而CD45RA+T細(xì)胞水平高于對照組（P＜0.05）。這表明脾多肽注射液對乳腺癌患者接受TAC化療過程中的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答具有改善作用。

綜上所述，脾多肽輔助TAC方案化療能夠有效降低乳腺癌的腫瘤負(fù)荷，增強(qiáng)體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。