缺血性腦血管病患者頸動脈粥樣硬化斑塊與血清HMGB1水平的研究

鄧霜 楊雪霞 （通訊作者）

（1 貴陽中醫學院第二附屬醫院 貴州 貴陽 550000）

（2 貴州醫科大學附屬醫院神經內科 貴州 貴陽 550000）

頸動脈粥樣硬化（carotid atheromatous sclerosis，CAS）被認為是引起缺血性腦血管病的重要危險因素之一，且近年來發現，動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是以血管壁對損傷的炎癥反應為基礎的慢性病理過程，炎癥細胞和炎癥因子在動脈粥樣硬化的發生、發展過程中起著重要作用。 高遷移率族蛋白B1（high mobility group protein B1，HMGB1）為新近發現的一種重要的晚期致炎細胞因子。在動脈粥樣硬化病變中，平滑肌細胞、內皮細胞、泡沫細胞、巨噬細胞等多種細胞均可以產生和釋放HMGB1；同樣，在鄰近壞死核心的基質中，HMGB1也明顯增多；胞外的HMGB1能激活內皮細胞、平滑肌細咆和巨噬細胞以及血小板，產生和放大炎癥反應，加速動脈粥樣硬化的進展[1]。本研究通過對缺血性腦血管病患者頸動脈超聲的檢查，并測定血清HMGB1的水平，旨在探討監測血液中HMGB1水平是否有利于對動脈粥樣硬化程度及斑塊危險度的評估，為早期預防及治療提供依據。

1.資料與方法

1.1 一般資料

缺血性腦血管病組：選擇2013年06月至2013年12月于貴陽醫學院附屬醫院神經內科住院治療的缺血性腦血管病患者100例，男性45例，女性55例，年齡34～85歲，平均年齡68.36±9.69歲。其中腦梗死后遺癥患者有40例，腔隙性腦梗死患者29例，短暫性腦缺血發作患者31例。對照組：選擇同期住院年齡、性別與缺血性腦血管組相匹配的非缺血性腦血管病患者30例作為對照組，男性17例，女性13例，年齡44～78歲，平均年齡61.20±10.85歲。其中周圍神經病6例，繼發性頭痛7例，神經癥2例，運動障礙疾病4例，頸椎病7例，脊柱畸形1例，失眠癥1例，上頜竇2例。并經體格檢查、顱腦CT或顱腦MRI檢查排除腦血管疾病。

1.2 實驗方法

所有入選患者均于入院次日空腹采集靜脈血5ml，應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法測定標本中HMBG1水平。所有研究對象均行頸動脈彩超檢查：根據頸動脈超聲斑塊檢出數目將研究對象分為：（1）無頸動脈斑塊組，包括內膜-中層厚度≤1.0mm，雙側頸動脈內膜光滑、無增厚；（2）頸動脈單發斑塊組：頸動脈內膜-中層厚度在1.0～1.4mm之間；雙側頸動脈有1個斑塊，內膜-中層厚度局限性增厚≥1.5mm；（3）頸動脈多發斑塊組，雙側頸動脈有2個或2個以上斑塊。根據頸動脈超聲聲學特點將研究對象分為：（1）穩定斑塊組：斑塊為高強回聲，后方伴明顯聲影；或斑塊為表面光滑的中等均質回聲。（2）不穩定斑塊組：斑塊局部呈低回聲、等回聲或混合回聲，其后方不伴聲影。

1.3 統計方法

所有數據采用SPSS17.0統計軟件處理，計數資料以樣本數及構成比率表示，組間比較采用卡方檢驗；計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩組間比較進行獨立樣本t檢驗，多組間比較進行單因素方差分析。以P＜0.05為有統計學意義。

2.結果

缺血性腦血管病組斑塊檢出率為69%，非腦血管病組斑塊檢出率為30%，兩組比較P＜0.05，缺血性腦血管病組頸動脈粥樣硬化斑塊發生率明顯高于非腦血管病組，其中缺血性腦血管病組多發斑塊檢出率（52%）高于非腦血管病組（10%），差異顯著（P＜0.05），而兩組單發斑塊檢出率比較無統計學差異（P＞0.05）。缺血性腦血管病組穩定斑塊組檢出率21.7%，不穩定斑塊檢出率為78.3%；非缺血性腦血管病穩定斑塊檢出率為88.9%,不穩定斑塊檢出率為11.1%,兩組比較差異顯著P＜0.01。由表2-1可見：HMGB1在頸動脈無斑塊組與單發斑塊組、多發斑塊組的水平分別為 71.52±6.96μg/L、77.87±7.47μg/L、78.85±6.71μg/L，三組比較差異顯著（P＜0.01），無斑塊組分別與單發斑塊組、多發斑塊組比較差異顯著（P＜0.01），單發斑塊組與多發斑塊組比較無顯著差異（P=0.57）。由表2-2可見：血清HMGB1在頸動脈穩定斑塊組的水平為71.97±5.52μg/L，在頸動脈不穩定斑塊組的水平為80.62±6.31μg/L，兩組比較差異顯著P＜0.01。

表2-1 血清HMGB1的水平與頸動脈粥樣硬化斑塊發生情況的比較（±s）Tab.2-1 comparison of the levels of HMGB1 in serum and carotidatherosclerotic plaque（±s）

表2-1 血清HMGB1的水平與頸動脈粥樣硬化斑塊發生情況的比較（±s）Tab.2-1 comparison of the levels of HMGB1 in serum and carotidatherosclerotic plaque（±s）

注：a表示與對照組比較P＜ 0.001，*表示與單發斑塊組比較P=0.57。

表2-2 血清HMGB1的水平與頸動脈粥樣硬化斑塊穩定性的比較（±s）Tab.2-2 comparison of the levels of HMGB1 in serum and carotidatherosclerotic plaque stability（±s）

表2-2 血清HMGB1的水平與頸動脈粥樣硬化斑塊穩定性的比較（±s）Tab.2-2 comparison of the levels of HMGB1 in serum and carotidatherosclerotic plaque stability（±s）

3.討論

頸動脈粥樣硬化斑塊（carotid atheromatous sclerosis，CAS）脫落可 成為腦栓子的一個重要來源，頸動脈粥樣硬化斑塊還可引起腦血流動力學的改變，它被認為是引起缺血性腦血管病的重要危險因素。本組資料顯示，100例缺血性腦血管病患者中，CAS檢出斑塊者69例，斑塊檢出率為69%。30例非腦血管病患者檢出CAS9例，斑塊檢出率為30%；其中缺血性腦血管病組多發斑塊檢出率（52%）高于對照組（10%）；缺血性腦血管病組不穩定斑塊檢出率為78.3%，非缺血性腦血管病組不穩定斑塊檢出率為11.1%。缺血性腦血管病組CAS斑塊檢出率、多發斑塊檢出率及不穩定斑塊檢出率高于非腦血管病組，差異有統計學意義，說明頸動脈粥樣樣硬化的發生與缺血性腦血管病密切相關。目前對動脈粥樣硬化斑塊的病理學研究結果一致認為[2]，動脈粥樣硬化斑塊是以血管壁對損傷的炎癥反應為基礎的慢性病理過程,炎癥細胞和炎癥因子在動脈粥樣硬化斑塊的發生、發展過程中起著重要作用。

高遷移率族蛋白B1（high mobility group proteinB1，HMGB1）是一類真核細胞內廣泛存在的非組DNA結合蛋白，20世紀70年代Goodwin[3]等在牛胸腺中作為染色質蛋白被發現，并因其在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的高遷移率而命名為高遷移率族蛋白（HMG）。1999年wang等[4]首先發現HMGB1釋放到胞外后介導炎癥反應，為內毒素血癥和膿毒癥的晚期炎癥介質，相較TNF-ɑ、IL-1等經典的早期炎性介質而言，HMGB1出現晚且高峰持續時間長，為新近發現的一種重要的晚期致炎細胞因子。生理情況下，HMGB1作為染色體結構成分位于細胞核，參與核蛋白的裝配和DNA的復制、重組、轉錄和修復等過程。其不僅能與DNA相互作用，而且胞外的HMGB1通過作用于多種細胞的表面受體而發揮強烈的致炎作用。HMGB1可影響AS病變內的細胞如內皮細胞（EC）、單核-巨噬細胞和血管平滑肌細胞（VSMC）的功能，促進局部炎癥反應、單核-巨噬細胞聚集、VSMC趨化性及其細胞骨架的重構，促進動脈粥樣硬化斑塊的發生發展。在一般環境條件下，HMGB1的表達量維持在基礎水平[3]。當炎性因子刺激和細胞應激時均可誘導樹突狀細胞和單核/巨噬細胞等主動分泌HMGB1[5]，HMGB1又可刺激樹突狀細胞和單核/巨噬細胞等分泌TNF-ɑ、IL-1等炎性因子及單核細胞趨化蛋白1等趨化因子，以啟動炎癥反應，以清除損傷壞死的細胞[6]。而TNF-ɑ、IL-1這些由HMGB1刺激分泌的炎性因子也能促使單核/巨噬細胞分泌HMGB1，這樣就形成了一個促炎的正反饋環路，導致炎癥級聯信號放大，因此HMGB1作為一種炎性因子，可能在致炎細胞因子網絡中占據著一個中心環節的位置[7]。

本研究中，HMGB1的水平在頸動脈無斑塊組與單發斑塊組、多發斑塊組分別為71.52±6.96μg/L、77.87±7.47μg/L、78.85±6.7μg/L，三組比較差異顯著，多發斑塊組血清HMGB1水平高于單發斑塊組。血清HMGB1在穩定斑塊組的水平為71.97±5.52μg/L，在不穩定斑塊組的水平為80.62±6.31μg/L，不穩定斑塊組血清HMGB1水平高于穩定斑塊組，有顯著統計學差異。

本研究結果顯示，HMGB1參與動脈粥樣硬化的形成及降低斑塊穩定性，在動脈粥樣硬化的發生和進展中扮演十分關鍵的上游炎癥介質的作用，可成為反映病情嚴重程度和進展狀態并指導治療的良好生物標記物。因此，治療頸動脈粥樣硬化，可設想通過抑制HMGB1的表達以及干涉其危險因素，從而降低缺血性腦卒中的發生率。因研究時限及患者因素，本研究為非動態性的，且樣本量較小，可在今后的臨床研究中進一步完善。另外，HMGB1在AS病理中作用的研究目前尚處在起步階段,因此可進一步深人了解其在AS病變中的變化規律、病理生理作用及其調控機制,將有助于從新的角度認識AS病理機制，為探索AS的防治方法提供新的思路。