Oct4蛋白對前列腺癌雄激素剝奪治療后進展速度的預測價值分析

薛 煒，邱建新，桑 楠，張志明

目前，臨床對于前列腺癌的致病原因及具體發病機制尚未完全闡述清楚[1]，但有相關生物學研究顯示，前列腺癌是指主要發生在前列腺的上皮性惡性腫瘤，根據其不同發病原因及疾病的不同進展情況可有多種病理表現類型，其中腺癌最常見[2-3]。而相關資料曾報道，目前我國大多數前列腺癌患者在其確診時已失去最佳根治治療時機，故雄激素剝奪治療為該類患者首選的臨床治療方案[4]。但有研究發現，經雄激素剝奪治療的前列腺癌患者往往有部分治療后可進展為去勢抵抗性前列腺癌，若不及時予以有效控制，當病情繼續發展時可存在極差的預后效果[5-6]。故找尋影響前列腺癌病情發展和進展以及導致去勢抵抗性前列腺癌出現的相關因素并及時予以干預是改善前列腺癌患者預后的關鍵措施。曾有文獻表明，在不同預后的前列腺癌患者中其相關蛋白的表達存在一定的差異，但具體蛋白種類尚未明確[7-8]。本研究回顧性分析了前列腺癌108例的臨床及隨訪資料，旨在探討八聚體結合轉錄因子4(Oct4)蛋白對前列腺癌雄激素剝奪治療后進展速度的預測價值。現報告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2010年1月—2014年12月我院收治的前列腺癌108例，均為男性，年齡38～85(56.20±10.26)歲。納入標準：①均符合2012年世界衛生組織(WHO)中前列腺癌明確診斷標準[9]；②均經相關臨床及病理檢查等確診；③均經雄激素剝奪治療且符合其治療標準；④本研究經醫院倫理委員會批準；⑤所有患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書參與本研究。排除標準：①存在原發性肝腎功能障礙及其他系統嚴重疾病者；②除前列腺癌外存在其他惡性腫瘤者；③存在雄激素剝奪治療的禁忌證者；④臨床及隨訪資料不完整者。

1.2方法 采用回顧性分析法分析納入本研究108例前列腺癌患者的臨床及隨訪資料，根據資料結果可知所有前列腺癌患者在確診后均采用雄激素剝奪治療，且治療結束后均進行了3年的隨訪，在治療及隨訪過程中均記錄年齡、病程、體質量指數等臨床資料、疾病情況及治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌狀況，檢測Oct4蛋白等相關臨床指標水平。

1.3觀察指標及檢測方法 根據臨床和隨訪資料記錄患者年齡、病程、體質量指數、腫瘤分級、臨床分期、淋巴結轉移等疾病情況及前列腺特異性抗原(PSA)和Oct4蛋白水平，無進展生存期和去勢抵抗性前列腺癌的發生情況，并比較Oct4蛋白不同表達及不同前列腺癌患者上述資料的差異。腫瘤分級通過Gleason評分標準[10]可將其分為低分化、中分化和高分化；臨床分期采用2002年AJCC的TNM分期系統[11]進行評價。PSA檢測方法：所有患者在檢測當日清晨于空腹狀態下抽取靜脈血5 ml，以3000 r/min離心10 min后分離血清，并將其置于-70℃的環境中進行貯存以待檢測，通過酶聯免疫吸附法檢測PSA水平。Oct4蛋白檢測方法：前列腺癌穿刺石蠟標本連續4 μm厚切片，采用EnVision染色方法，分別檢測癌組織中Nanog蛋白的表達情況，具體流程嚴格按說明書進行。已知陽性組織切片作為陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。結果判定標準：Oct4蛋白陽性著色表達于細胞核，呈黃色、棕黃色、褐色顆粒[12]。本研究采用光鏡下對每一張切片每一個視野中的陽性著色細胞數、著色強度評分應用半定量方法進行評價。根據著色強度：0分為無色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為褐色、黑色；根據陽性細胞比例：陽性細胞數目所占比例<10%為1分、陽性細胞所占比例11%～50%為2分、陽性細胞數51%～75%為3分、陽性細胞數所占比例<75%為4分，兩種積分相乘總分≤3分為陰性、>3分為陽性。無進展生存期定義標準：為所有患者從雄激素剝奪治療開始至血清總PSA連續2次升高的時間[13]。去勢抵抗性前列腺癌診斷標準：血清睪酮值達到去勢水平(<50 μg/L或<17 nmol/L)；連續3次測得血清PSA值升高，較最低值升高≥50%[14]。

1.4統計學方法 采用SPSS 18.0軟件進行統計分析，計數資料以率或構成比(%)表示，采用χ2檢驗，采用Log-rank檢驗和Cox比例風險回歸模型分別對前列腺癌患者出現去勢抵抗性前列腺癌進行單因素和多因素分析。α=0.05為檢驗水準。

2 結果

2.1前列腺癌患者臨床及隨訪資料 108例前列腺癌患者經雄激素剝奪治療后其中位無進展生存期為28個月(14～36個月)，其中Oct4蛋白陽性表達率為57.41%，血清PSA水平≥50 pg/ml比例為72.22%，而治療后有35.19%的前列腺癌患者進展為去勢抵抗性前列腺癌。見表1。

表1 108例前列腺癌患者臨床及隨訪資料

注：PSA為前列腺特異性抗原，Oct4為11聚體結合轉錄因子4

2.2不同Oct4蛋白表達的前列腺癌患者臨床資料比較 腫瘤低分化、出現淋巴結轉移、PSA水平≥50 pg/ml及治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的前列腺癌患者其Oct4蛋白的陽性表達率較高，差異有統計學意義(P<0.05，P<0.01)。見表2。

2.3影響前列腺癌患者出現去勢抵抗性前列腺癌的單因素分析 不同年齡、腫瘤分級、臨床分期、淋巴結轉移情況、PSA水平及Oct4蛋白表達的前列腺癌患者間其治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的發生率比較差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

2.4影響前列腺癌患者出現去勢抵抗性前列腺癌的多因素分析 經Cox比例風險回歸模型分析顯示，Oct4蛋白陽性表達為導致前列腺癌患者經雄激素剝奪治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

3 討論

近年來，隨著人們生活習慣和生活環境的改變，我國癌癥患者逐漸增多，相關數據報道，前列腺癌發病率在近年呈上升趨勢[15]。有相關數據報道，前列腺癌是歐美國家男性中最常見的惡性腫瘤之一，其發病率在美國位居第一，而其病死率排名僅次于肺癌，已成為一個嚴重影響男性軀體健康和生活質量的公共衛生問題[16-18]。目前，臨床對于前列腺癌首選有效治療手段為手術切除治療，但對于部分晚期前列腺癌患者來說，手術治療已錯失最佳時機，故雄激素剝奪治療在目前被公認為是其首選有效治療手段[19]。但隨著治療時間延長，有學者發現部分前列腺癌患者在經雄激素剝奪等內分泌治療后進一步進展為去勢抵抗性前列腺癌，嚴重影響前列腺癌患者的治療效果及預后情況[20]，故找尋相關因素并降低去勢抵抗性前列腺癌的發生是改善前列腺癌患者預后的關鍵。

本研究結果顯示，在108例經雄激素剝奪治療的前列腺癌患者中，Oct4蛋白陽性表達率為57.41%，血清PSA水平≥50 pg/ml的比例為72.22%，而治療后有35.19%的前列腺癌患者進展為去勢抵抗性前列腺癌，符合既往研究報道[21]。本研究結果還顯示，腫瘤低分化、出現淋巴結轉移、PSA水平>50 pg/ml及治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的前列腺癌患者Oct4蛋白陽性表達率均較高，提示Oct4蛋白與前列腺癌病情進展及去勢抵抗性前列腺癌的發生均有一定的關系。結合以往臨床研究可知，Oct4基因屬于干細胞轉錄因子的一種，其聯合Nanog和Sox2共同維持胚胎干細胞的自我更新和多向分化潛能[22]。

表2 不同Oct4蛋白表達的前列腺癌患者臨床資料比較(例)

注：PSA為前列腺特異性抗原，Oct4為11聚體結合轉錄因子4

表3 影響前列腺癌患者出現去勢抵抗性前列腺癌的單因素分析(例)

注：PSA為前列腺特異性抗原，Oct4為11聚體結合轉錄因子4

近年來，隨著研究的不斷深入，有研究結果顯示，在前列腺等多種惡性腫瘤組織中其Oct4基因呈異常表達[23]，且有相關研究證實，較正常前列腺組織而言，前列腺癌組織中Oct4基因的表達顯著升高，而在良性前列腺組織中其Oct4基因的表達類似于前列腺癌組織，由此可推斷Oct4基因在前列腺癌的發生中起著至為關鍵的作用[24-25]，本研究結果也符合上述理論。本研究結果還顯示，不同年齡、腫瘤分級、臨床分期、淋巴結轉移情況、PSA水平及Oct4蛋白表達的前列腺癌患者間其治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的發生率比較差異均有統計學意義，提示Oct4與去勢抵抗性前列腺癌的發生也有著密切關系。相關文獻曾證實，一定水平的Oct4基因對前列腺癌組織的消退具有一定的促進作用，但隨著Oct4表達水平的升高，可導致經雄激素剝奪后腫瘤進一步生長，從而加大去勢抵抗性前列腺癌發生的可能[26]，由此可見，Oct4基因蛋白的表達可在一定程度預測前列腺癌腫瘤生長及去勢抵抗性前列腺癌的發生。本研究經Cox比例風險回歸模型分析顯示，Oct4蛋白陽性表達為導致前列腺癌患者經雄激素剝奪治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的獨立危險因素，由此則進一步證實了Oct4基因蛋白與去勢抵抗性前列腺癌的相關性。

表4 影響前列腺癌患者出現去勢抵抗性前列腺癌的多因素分析

綜上所述，Oct4蛋白過多表達為導致前列腺癌患者經雄激素剝奪治療后進展為去勢抵抗性前列腺癌的獨立危險因素，可作為臨床預測去勢抵抗性前列腺癌發生的有效指標之一。但本研究所選樣本含量過小及研究時間過短，對于Oct4蛋白表達是否受其他因素影響尚未明確，可加大樣本含量和延長研究時間進一步深入研究。