貴州六盤水市獼猴桃病害調查及病原鑒定

潘 慧, 胡秋舲, 張勝菊, 祖 達, 李 黎*, 鐘彩虹*

(1.植物種質創新與特色農業重點實驗室, 中國科學院武漢植物園, 武漢 430074;2.貴州六盤水市植保植檢站, 六盤水 553001)

獼猴桃果實營養豐富,富含維生素和多種礦質元素及氨基酸,被譽為“水果之王”,是我國山區農民精準脫貧的特色優勢樹種。自2007年以來,六盤水市開始大力發展獼猴桃種植產業,主要栽培品種為‘紅陽’,全市獼猴桃種植基地覆蓋了猴場鎮、米籮鄉、野鐘鄉、都格鄉、楊梅鄉、雞場鎮、普古鄉、隴腳鄉及郎岱鎮等20個鄉鎮。截至2016年年底,全市獼猴桃栽培總面積達9 447 hm2,年產量達1.2萬t。

然而自2014年以來,六盤水市農委植保植檢站發現該市各鄉鎮獼猴桃細菌性及真菌性病害日益突出,給當地獼猴桃產業造成了一定的經濟損失,因此需盡快對當地獼猴桃病害進行全面調查。中國科學院武漢植物園聯合六盤水市農委分別于2015年10月、2016年4月及8月對六盤水市12個鄉鎮26個代表性栽培園區進行了周年采樣分析及病原鑒定,以期全面了解該地區范圍內獼猴桃病害的種類、分布及危害程度,為針對性地開展檢疫和預測預報及獼猴桃病害的綜合防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 園區感病樣本采集

2015年10月、2016年4月及8月對26個采樣點進行了感病樣本的采集。秋冬季共采集65份具有明顯病斑的葉片作為試驗材料,春季共采集75份具有病斑的葉片、9份枝條及6份花朵樣本,夏季共采集71份具有病斑的葉片和15份果實樣本。各采樣點栽培品種均為‘紅陽’,具體地理位置見表1。

表1各采樣點具體地理位置

Table1Detailedlocationsofsamplingorchards

采樣園區編號No.ofsamplingorchard采樣季節Sampling season經緯度Longitude andlatitude海拔/mAltitude所屬鄉鎮Township采樣園區編號No.ofsamplingorchard采樣季節Samplingseason經緯度Longitude andlatitude海拔/mAltitude所屬鄉鎮Township1秋冬季、春季、夏季105°10'22″E 26°13'24″N1 150水城縣猴場鎮12春季104°47'35″E 26°18'44″N1 321水城縣發耳鎮2秋冬季、春季、夏季105°07'41″E 26°13'17″N1 024水城縣猴場鎮13春季104°45'02″E 26°16'45″N1 383水城縣發耳鎮3秋冬季104°57'48″E 26°25'09″N1 103水城縣米籮鎮14春季104°39'20″E 26°18'37″N967水城縣發耳鎮4秋冬季104°58'20″E 26°24'29″N1 073水城縣米籮鄉15春季104°40'18″E 26°15'49″N1 223水城縣雞場鄉5秋冬季、春季、夏季105°23'48″E 26°04'25″N1 305六枝特區郎岱鎮16春季104°41'06″E 26°17'58″N1 088水城縣雞場鄉6秋冬季、春季、夏季104°49'51″E 26°04'38″N1 370盤縣普古鄉17春季105°08'48″E 26°24'15″N1 272水城縣蟠龍鎮7秋冬季、夏季104°48'08″E 26°04'25″N1 199水城縣雞場鄉18春季105°07'21″E 26°21'27″N1 232水城縣蟠龍鎮8秋冬季、春季104°41'24″E 26°20'27″N1 070水城縣都格鄉19春季105°07'45″E 26°17'17″N812水城縣猴場鎮9秋冬季104°53'00″E 28°27'00″N1 260水城縣勺米鄉20春季104°58'51″E 26°22'00″N1 255水城縣米籮鎮10A秋冬季104°51'17″E 26°29'38″N1 269水城縣順場鄉21春季104°58'13″E 26°11'54″N1 181水城縣野鐘鄉10B春季104°51'29″E 26°14'00″N1 261水城縣順場鄉22夏季104°47'51″E 26°18'28″N1 470水城縣楊梅鄉10C春季104°52'39″E 26°13'51″N1 334水城縣順場鄉23夏季104°49'00″E 26°36'02″N1 157水城縣米籮鎮11秋冬季、春季104°35'26″E 26°13'45″N1 255水城縣米籮鎮24夏季104°49'25″E 26°36'03″N1 113水城縣米籮鎮

1.2 病原菌的分離和培養

1.2.1 細菌性病原菌的分離和培養

采用直徑1 cm的打孔器從葉片或枝條的病健交界處打取3片組織，用70%乙醇進行表面消毒后將葉片組織置于1.5 mL離心管中勻漿(每管內加入400 μL 10 mmol/L MgSO4和2粒鋼珠)。對勻漿液進行100～10-4梯度稀釋，取100 μL 10-4稀釋勻漿液涂布于假單胞菌專用分離培養基 KB CFC固體培養基，置于27～28℃培養，2 d后挑取單菌落進行劃線分離。對生物學特征近似丁香假單胞桿菌獼猴桃致病變種Pseudomonassyringaepv.actinidiae(Psa)的菌落進行氧化酶測試，保存氧化酶測試呈陰性的菌落。每個樣本設置3個重復。

1.2.2 真菌性病原菌的分離和培養

對于每一份葉片樣本,采用直徑1 cm的打孔器從病健交界處打取3片葉片組織,用70%乙醇進行表面消毒,置于PDA培養基25℃恒溫培養3 d。對于果實樣本,用無菌手術刀切取病健交界處的果肉組織置于PDA培養基25℃恒溫培養3 d。平板出現菌落后挑取菌絲尖端于新PDA平板上純化,直至獲得純菌株。每個樣本設置3個重復。

1.3 病原菌的分子生物學鑒定

1.3.1 細菌菌落PCR

挑選新鮮菌落置于20 μL無菌水中,98℃裂解10 min之后渦旋,快速短暫離心,吸取2 μL上清液作為DNA模板。參照Rees-George等[1]的方法運用Psa特異引物PsaF1(TTTTGCTTTGCACACCCGATTTT)和PsaR2(CACGCACCCTTCAATCAGGATG)進行分子鑒定。反應體系為10 μL,其中含Mg2+的10×PCR buffer 1 μL,10 mmol/L dNTPs 0.2 μL,100 μmol/L PsaF1引物和PsaR2引物各0.1 μL,1.10 g/mL DMSO 0.2 μL,5 U/μLTaq酶0.1 μL,菌落模板2 μL,無菌去離子水6.3 μL;PCR擴增反應程序為94℃ 5 min;94℃ 30 s,55℃ 30 s,72℃ 1 min,30個循環;72℃ 10 min。PCR擴增產物經2%瓊脂糖凝膠檢測,觀察是否有目的片段條帶。Psa菌株可擴增得到280 bp的目的條帶。

1.3.2 真菌ITS鑒定

純化的菌株在PDA平板上25℃培養5 d后,用打孔器制成直徑5 mm的菌餅,將菌餅接入40 mL PD液體培養基中,25℃靜置培養5～8 d后收集菌絲。運用生工生物工程(上海)股份有限公司的Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒提取基因組DNA,并將DNA置于-20℃備用。

采用真菌核糖體基因組轉錄間隔區通用引物ITS4/ITS5對真菌病原菌的基因組DNA進行PCR擴增(ITS5:GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG;ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC)。反應體系為40 μL,其中含Mg2+的10×PCR buffer 4 μL,10 mmol/L dNTPs 0.8 μL,100 μmol/L引物各0.2 μL,1.10 g/mL DMSO 0.8 μL,5 U/μLTaq酶0.25 μL,DNA模板2 μL,無菌去離子水31.75 μL。PCR擴增反應程序為94℃ 5 min;94℃ 30s,55℃30 s,72℃ 1 min,30個循環;72℃ 10 min。PCR擴增產物經2%瓊脂糖凝膠電泳檢測,目的條帶為600 bp。將PCR產物送華大基因公司測序。將測序結果與NCBI已發表菌株序列進行BLAST比對,作同源性相似差異性分析,確定菌株的分類地位。

1.4 致病力測試

將在PDA培養基上培養7 d的菌株用5 mm無菌打孔器制成菌餅。同時將葉片和果實的表面用2號解剖針進行針刺,果實刺傷深度為2～3 mm,將菌餅接種于傷口處,菌絲面朝下,再覆蓋濕棉球,并放入透明盒中密封保濕,6 d后觀察各處理發病情況。以接種PDA瓊脂塊為對照。每個菌株在葉片及果實上的接種試驗均重復3次。發病后從病斑再次分離培養病原菌,與原接種菌株進行比較鑒定。

2 結果與分析

2.1 感病癥狀

采樣期間,在六盤水市部分獼猴桃栽培園區觀察到疑似褐斑病、灰斑病、軟腐病、潰瘍病和炭疽病的癥狀(圖1),主要感病癥狀與李黎等[2]、羅祿怡等[3]的描述一致。疑似褐斑病感病癥狀:葉面上的病斑較小,約3～15 mm,近圓形至不規則形;病斑外沿深褐色,中部色淺。疑似灰斑病感病癥狀:前期癥狀與褐斑病相似,葉背病斑黑褐色,葉面暗褐至灰褐色。疑似炭疽病感病癥狀:葉緣略向葉背卷縮,病健交界明顯,病斑中間為灰白色,邊緣深褐色。疑似潰瘍病感病癥狀:葉片上不規則形或多角形褐色斑點,病斑周圍有3～5 mm明顯的黃色暈圈。疑似軟腐病感病癥狀:發病部位表皮出現類似大拇指壓痕斑,剝開凹陷部表皮,病部中心果肉呈乳白色,周圍果肉呈黃綠色水漬狀。

圖1 六盤水市獼猴桃栽培園區主要病害感病癥狀Fig.1 Symptoms of main kiwifruit disease in cultivating orchards in Liupanshui City

2.2 細菌性病原菌的鑒定結果

春季細菌性病原菌的鑒定結果：采樣點16、18、2、20、10B、10C、5、6的枝條及葉片樣本攜帶Psa病原菌。夏季細菌性病原菌的鑒定結果：采樣點5、6的葉片樣本攜帶Psa病原菌。秋冬季細菌性病原菌的鑒定結果：采樣點1、3、4、5、6的葉片樣本均攜帶細菌性潰瘍病病原菌(圖2)。

圖2 春、夏、秋冬季感病園區樣本PsaF1/PsaR2菌落PCR擴增圖Fig.2 Gel electrophoresis of colony PCR products of infected samples collected from orchards in spring, summer, autumn and winter using PsaF1/PsaR2 primers

2.3 真菌性病原菌的測序結果及預測病害

在各園區感病樣本上均分離到多種真菌(圖3),秋冬季、春季和夏季的具體菌株列表及各采樣點的預測病害見表2。

圖3 不同菌株的菌落及其孢子形態圖Fig.3 Morphology of colony and conidia of isolated strains

園區編號Orchard no.采樣季節Samplingseason菌株號Strainsno.NCBI登錄號Accession no.BLAST對應最近似種屬Closest species最近似種屬登錄號Accession no.of theclosest species相似性/%Identity預測病害Predicteddisease1秋冬季LPS-1KX355167菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeJF4304891001秋冬季LPS-2KX355168淡色生赤殼菌Bionectria ochroleucaEU3261861002秋冬季LPS-3KX355169忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病2秋冬季LPS-4KX355170忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病3秋冬季LPS-5KX355171忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病3秋冬季LPS-6KX355172忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病3秋冬季LPS-7KX355173膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesKT390195100炭疽病4秋冬季LPS-8KX355174忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病4秋冬季LPS-9KX355175菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeJF4304891004秋冬季LPS-10KX355176新殼梭孢Neofusicoccum parvumKF923242100

續表2Table2(Continued)

園區編號Orchard no.采樣季節Samplingseason菌株號Strainsno.NCBI登錄號Accession no.BLAST對應最近似種屬Closest species最近似種屬登錄號Accession no.of theclosest species相似性/%Identity預測病害Predicteddisease5秋冬季LPS-11KX355177忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病5秋冬季LPS-12KX355178忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病5秋冬季LPS-13KX355179忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病5秋冬季LPS-14KX355180藍莓間座殼菌Diaporthe hongkongensisNR_11184899軟腐病6秋冬季LPS-15KX355181新殼梭孢Neofusicoccum parvumFJ9048171006秋冬季LPS-16KX355182菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeJF4304891006秋冬季LPS-17KX355183小孢擬盤多毛孢Pestalotiopsis microsporaKR703275100軟腐病、灰斑病7秋冬季LPS-18KX355184膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesKU136388100炭疽病7秋冬季LPS-19KX355185互隔鏈格孢Alternaria alternataKT345696100軟腐病、褐斑病7秋冬季LPS-20KX355186芒果擬盤多毛孢Neopestalotiopsis egyptiacaKP9437471008秋冬季LPS-21KX355187蕓薹生鏈格孢Alternaria brassicicolaKU2935951008秋冬季LPS-22KX355188忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病9秋冬季LPS-23KX355189葡萄擬盤多毛孢Pestalotiopsis biciliataKT337374100軟腐病、灰斑病9秋冬季LPS-24KX355190互隔鏈格孢Alternaria alternataKT345696100軟腐病、褐斑病9秋冬季LPS-25KX355191稻黑孢Nigrospora oryzaeEU436680100黑斑病、褐斑病10A秋冬季LPS-26KX355192擬盤多毛孢菌Pestalotiopsis sp.JQ341110100軟腐病、灰斑病10A秋冬季LPS-27KX355193忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病10A秋冬季LPS-28KX355194尖頂炭角菌Xylaria apiculataKP1333309911秋冬季LPS-29KX355195忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病11秋冬季LPS-30KX355196忽視擬盤多毛孢Pestalotiopsis neglectaKT337391100軟腐病、灰斑病11秋冬季LPS-31KX355197菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeJF43048910011秋冬季LPS-32KX355198菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeJF4304891001春季LPS-33KX588102白囊耙齒菌Irpex lacteusKU844327971春季LPS-34KX588103木賊鐮刀菌Fusarium equisetiHQ33253210011春季LPS-35KX588104白囊耙齒菌Irpex lacteusJX3119249910C春季LPS-36KX588105白囊耙齒菌Irpex lacteusHQ33102810010B春季LPS-37KX588106細極鏈格孢Alternaria tenuissimaKF95114910010B春季LPS-38KX588107白囊耙齒菌Irpex lacteusJX3119249910B春季LPS-39KX588108白囊耙齒菌Irpex lacteusEU2735179910B春季LPS-40KX588109互隔鏈格孢Alternaria alternataKT19232999軟腐病、褐斑病6春季LPS-41KX588110白囊耙齒菌Irpex lacteusHQ331096986春季LPS-42KX588111白囊耙齒菌Irpex lacteusJX311924995夏季LPS-43MF379313菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeKX3551981005夏季LPS-44MF379314菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKT951298100軟腐病5夏季LPS-45MF379315新殼梭孢Neofusicoccum parvumKX3551811005夏季LPS-46MF379316互隔鏈格孢Alternaria alternataKY977416100軟腐病、褐斑病5夏季LPS-47MF379317葡萄座腔菌Botryosphaeria dothideaKU686880100軟腐病6夏季LPS-48MF379318新殼梭孢Neofusicoccum parvumKX3551811006夏季LPS-49MF379319互隔鏈格孢Alternaria alternataKY977416100軟腐病、褐斑病22夏季LPS-50MF379320擬莖點霉Phomopsis sp.FJ03776899軟腐病22夏季LPS-51MF379321互隔鏈格孢Alternaria alternataKY977416100軟腐病、褐斑病22夏季LPS-52MF379322膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesKX355173100炭疽病22夏季LPS-53MF379323大豆擬莖點霉種腐病菌Phomopsis longicollaFJ75523699軟腐病7夏季LPS-54MF379324甜櫻間座殼菌Diaporthe eresFJ47813299軟腐病7夏季LPS-55MF379325互隔鏈格孢Alternaria alternataKY977416100軟腐病、褐斑病7夏季LPS-56MF379326桃擬莖點霉Phomopsis amygdaliGU133063100軟腐病7夏季LPS-57MF379327膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesJX258757100炭疽病7夏季LPS-58MF379328多主棒孢霉Corynespora cassiicolaKR3365461007夏季LPS-59MF379329菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKP182395100軟腐病7夏季LPS-60MF379330新殼梭孢Neofusicoccum parvumKX3551811007夏季LPS-61MF379331新擬盤多毛孢屬Neopestalotiopsis sp.KU25221910023夏季LPS-62MF379332菜豆間座殼菌大豆變種Diaporthe phaseolorum var. sojaeKX35519710023夏季LPS-63MF379333鹿角炭角菌Xylaria hypoxylonKF30634223夏季LPS-64MF379334菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKX866879100軟腐病23夏季LPS-65MF379335膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesKT390189100炭疽病23夏季LPS-66MF379336菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKP182395100軟腐病23夏季LPS-67MF379337擬盤多毛孢屬Pestalotiopsis sp.KU25229899軟腐病、灰斑病23夏季LPS-68MF379338菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumMF185352100軟腐病24夏季LPS-69MF379339菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKX866879100軟腐病24夏季LPS-70MF379340雙座盤殼菌屬Biscogniauxia sp.KJ542314100

續表2Table2(Continued)

園區編號Orchard no.采樣季節Samplingseason菌株號Strainsno.NCBI登錄號Accession no.BLAST對應最近似種屬Closest species最近似種屬登錄號Accession no.of theclosest species相似性/%Identity預測病害Predicteddisease24夏季LPS-71MF379341膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesKT390189100炭疽病24夏季LPS-72MF379342葡萄座腔菌Botryosphaeria dothideaKY788311100軟腐病24夏季LPS-73MF379343博寧炭疽菌Colletotrichum boninenseMF07658510024夏季LPS-74MF379344互隔鏈格孢Alternaria alternataKY977416100軟腐病、褐斑病24夏季LPS-75MF379345鹿角炭角菌Xylaria hypoxylonKF30634210024夏季LPS-76MF379346菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKX866879100軟腐病2夏季LPS-77MF379347大豆擬莖點霉種腐病菌Diaporthe longicollaMF125057100軟腐病2夏季LPS-78MF379348菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKX866879100軟腐病2夏季LPS-79MF379349膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesKT390189100炭疽病2夏季LPS-80MF379350叢赤殼菌Nectria pseudotrichiaGU232860992夏季LPS-81MF379351炭角菌Xylaria bambusicolaGU300088992夏季LPS-82MF379352菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumKP182395100軟腐病1夏季LPS-83MF379353多主棒孢霉Corynespora cassiicolaKR3365461001夏季LPS-84MF379354楓香擬莖點霉Phomopsis liquidambariFJ47812499軟腐病1夏季LPS-85MF379355間座殼屬Diaporthe sp.EF42354999軟腐病1夏季LPS-86MF379356互隔鏈格孢Alternaria alternataKY977416100軟腐病、褐斑病1夏季LPS-87MF379357菜豆間座殼菌Diaporthe phaseolorumMF185352100軟腐病1夏季LPS-88MF379358間座殼屬Diaporthe sp.EF423549100軟腐病1夏季LPS-89MF379359葡萄座腔菌Botryosphaeria dothideaKY788311100軟腐病1夏季LPS-90MF379360橡膠擬莖點霉Phomopsis heveicolaKY379053100軟腐病1夏季LPS-91MF379361炭墊菌Nemania primoluteaEF026121100

圖4 不同菌株接種葉片和果實的癥狀Fig.4 Symptoms on kiwifruit leaves and fruits after inoculation

2.4 致病性驗證

致病性試驗結果表明,果實和葉片均在6 d左右發病,并在發病處重新分離到了原接種的菌株,完成了柯赫氏法則致病性檢測。結果顯示擬盤多毛孢和鏈格孢的菌株均可引起果實軟腐病;擬盤多毛孢菌株可引起灰斑病;膠孢炭疽菌會引起炭疽病;鏈格孢會導致褐斑病;稻黑孢會導致黑斑病和褐斑病。其他病原菌的致病性結果并不十分明顯,還有待進一步確認。

3 討論

獼猴桃病害的類型和發生程度受宿主生長地域、生育期、品種抗性、氣候條件和土壤環境等因素影響。六盤水市獼猴桃種植園區普遍在海拔1 000 m以上,品種大部分為‘紅陽’。從檢測結果來看,采樣點1、3、4、5、6、10B、10C均已證實感染細菌性潰瘍病,其中采樣點5、6連續3次均發現潰瘍病。該病由丁香假單胞桿菌獼猴桃致病變種Pseudomonassyringaepv.actinidiae(Psa)引起。自2008年以來,細菌性潰瘍病在全球大規模暴發,具有發生范圍廣、致病性強、傳播迅速、根除難度大等特點,已經成為獼猴桃產業發展的主要限制因素[4]。近年來,我國陜西、四川、安徽、湖南和河南等獼猴桃主要產區均出現大量感染潰瘍病的報告,且由于苗木遠距離運輸,該病在江蘇、浙江、廣西及貴州等獼猴桃新發展區域逐漸被發現。究其原因,近年來由于‘紅陽’品種的出園價格持續走高,各地區新發展園區均大量引進‘紅陽’苗木。六盤水市的‘紅陽’獼猴桃苗木主要從四川省引進,然而四川部分園區已證實感染了潰瘍病,帶菌苗木的運輸及栽培極大程度上加快了潰瘍病在六盤水的傳播。該病目前并無根治方法,只能運用銅制劑、鏈霉素等進行化學防治,以盡可能減輕癥狀,減少傳播。

獼猴桃果實軟腐病是近年來獼猴桃產業中最嚴重的真菌病害,在果實采收期間無明顯表征,貯藏期間才逐漸顯現病癥。目前已確定的獼猴桃果實軟腐病致病菌有葡萄座腔菌B.dothidea,擬盤多毛孢Pestalotiopsissp.,擬莖點霉Phomopsissp.,互隔鏈格孢A.alternata等[5-10]。通過對分離到的菌株進行分析(表2),六盤水市各采樣點均鑒定到以上致病菌,同時鑒定到間座殼菌(Diaporthesp.,擬莖點霉Phomopsissp.的有性態),由此可見六盤水市各園區內潛伏的果實軟腐病病原菌種類很多,均需對軟腐病病原進行重點防治,防止來年軟腐病造成嚴重的經濟損失。

同時,擬盤多毛孢Pestalotiopsissp.被證實可引起獼猴桃的灰斑病[11],互隔鏈格孢A.alternata可引起獼猴桃的褐斑病[12],稻黑孢N.oryzae可引起獼猴桃的黑斑病和褐斑病[13]。由于在獼猴桃真菌病害發病初期,灰斑病與褐斑病等不能從表征上進行有效區分,建議對兩種病害進行綜合防治。采樣點3、7的秋冬季樣品和2、7、22、23、24夏季樣品鑒定出膠孢炭疽菌C.gloeosporioides,該菌已被證實會引起炭疽病[14]。

另外,部分分離到的病原菌菌株在致病性驗證中,并未引起葉片或果實上明顯的感病癥狀,需進一步鑒定及驗證。

此次調查結果顯示,六盤水市獼猴桃秋冬季和夏季的主要病害有細菌性潰瘍病及真菌性軟腐病、褐斑病、灰斑病,其次是炭疽病和黑斑病,春季主要是潰瘍病,其次是真菌病害,相對其他季節輕微一些,與全國范圍的規律保持一致。其主要原因可能是六盤水市各園區在秋季收獲果實后都會采取相關措施進行徹底的冬季清園,春季病情基數得到有效控制,隨著夏季溫度升高,病害再次暴發。

本文首次對六盤水市獼猴桃常見病害進行了周年調查,確定了當地不同時期獼猴桃上的主要病原菌,并對潛在可能發生的病害進行了預測,為各園區后期進行有效的病害預測預報及綜合防治奠定了基礎。