崇明白山羊血清生化指標(biāo)的檢測(cè)與分析

姚惠娟,陳 曉,2,3?,葛 雷,2,戴建軍,2??,吳彩鳳,2,張樹山,2,呂玉華??,張德福,2

（1上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,上海201106;2上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物遺傳工程研究室,上海201106;3錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院,錦州121001）

血清生化檢測(cè)是對(duì)血液中各種離子、糖類、脂類、蛋白質(zhì)以及各種酶類、激素和機(jī)體代謝產(chǎn)物含量進(jìn)行測(cè)定。在動(dòng)物的生產(chǎn)與實(shí)踐中,可以根據(jù)這些生化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律,評(píng)價(jià)動(dòng)物的適應(yīng)性、生產(chǎn)性、種質(zhì)特性、機(jī)體代謝能力及生理狀況是否正常[1-3]。目前,關(guān)于山羊血清生化特性的研究較多[4-6],但對(duì)于崇明白山羊血清生化特性的研究尚未見報(bào)道。

崇明島位于長(zhǎng)江出海口處,其特有的水土條件孕育了全國重點(diǎn)保護(hù)的崇明白山羊這一優(yōu)質(zhì)品種。崇明白山羊外形中等偏小,頭長(zhǎng)頸短,全身白毛覆蓋,四肢健壯,屬于皮毛兼用型品種。本研究對(duì)不同生理階段和不同性別的崇明白山羊進(jìn)行血清生化指標(biāo)測(cè)定,以期為進(jìn)一步了解崇明白山羊的品種特征、疾病診斷和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化應(yīng)用提供相關(guān)背景數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試動(dòng)物

選擇健康的崇明白山羊177只,其中成年公羊30只,斷奶小公羊24只,成年母羊30只,斷奶小母羊24只,妊娠母羊25只,后備母羊22只,哺乳母羊22只。

1.2 試驗(yàn)方法

對(duì)崇明白山羊進(jìn)行固定,待其安定后,用5 mL一次性真空采血管（江蘇宇力醫(yī)療器械有限公司）于頸靜脈處采血5 mL。血樣采集后立即置于4℃冰箱中靜置12 h,3500 r∕min離心10 min,將分離的血清分裝于高壓滅菌的1.5 mL離心管中,-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

用全自動(dòng)生化分析儀（英諾華小型全自動(dòng)生化分析儀,DS261）對(duì)血清生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。測(cè)定指標(biāo)包括:白蛋白（ALB）、堿性磷酸酶（ALR）、直接膽紅素（DBIL）、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（GGT）、總蛋白（TR）、膽堿酯酶（CHE）、尿素氮（UREA）、肌酸激酶（CK）、α-羥基丁酸脫氫酶（HBDH）、乳酸脫氫酶（LDH）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、血清淀粉酶（AMY）、血糖（GLU）、膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）、血清鈣（Ca）、鎂（Mg）、鐵（Fe）、磷（R）20 項(xiàng)血清生化指標(biāo)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

對(duì)各項(xiàng)血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果應(yīng)用SRSS 13.0進(jìn)行處理,數(shù)據(jù)以“均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”的形式表示,并分析各組崇明白山羊之間的顯著性差異,P＜0.05或P＜0.01時(shí)表明差異顯著或極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 崇明白山羊肝腎功能指標(biāo)比較

ALB測(cè)定結(jié)果表明（表1）,成年公羊顯著低于成年母羊,斷奶小公羊高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。ALR結(jié)果顯示,成年公羊高于成年母羊,斷奶小公羊低于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著低于哺乳母羊和后備母羊。DBIL指標(biāo)表明,妊娠母羊最高,與其他各組羊差異顯著。GGT和CHE指標(biāo)顯示,成年公羊高于成年母羊,斷奶小公羊高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。在TR指標(biāo)中,成年公羊顯著低于成年母羊,斷奶小公羊高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。AST指標(biāo)表明,成年公羊高于成年母羊,斷奶小公羊顯著高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。ALT指標(biāo)顯示,成年公羊高于成年母羊,斷奶小公羊高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于后備母羊和哺乳母羊。

表1 崇明白山羊肝功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果Table 1 Results of liver function indexes in Chongming white goats

2.2 崇明白山羊心肌酶譜和腎功能指標(biāo)比較

CK測(cè)定結(jié)果表明（表2）,斷奶小母羊最低,與斷奶小公羊差異顯著,與其他各類羊無顯著差異。HBDH和UREA測(cè)定結(jié)果顯示,成年公羊低于成年母羊,斷奶小公羊高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。LDH指標(biāo)表明,成年公羊高于成年母羊,斷奶小公羊顯著高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。

表2 崇明白山羊心肌酶譜與腎功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果Table 2 Results of cardiac enzymes and kidney function indexes in Chongming white goats

2.3 崇明白山羊血清淀粉酶、血糖、血脂指標(biāo)比較

AMY測(cè)定結(jié)果表明（表3）,成年公羊低于成年母羊,斷奶小公羊低于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。GLU測(cè)定結(jié)果顯示,后備母羊最低,與斷奶小母羊和哺乳母羊無顯著差異,與其他各類羊差異顯著。CHOL指標(biāo)中,成年公羊顯著低于成年母羊,斷奶小公羊顯著高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。TG指標(biāo)顯示,成年公羊顯著高于成年母羊,斷奶小公羊低于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。

表3 崇明白山羊血清淀粉酶、血糖、血脂指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果Table 3 Results of serum amylase,blood glucose,blood lipid indexes in Chongming white goats

2.4 崇明白山羊血清鈣、鎂、鐵、磷指標(biāo)比較

Ca和Fe測(cè)定結(jié)果表明（表4）,成年公羊低于成年母羊,斷奶小公羊顯著低于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。Mg測(cè)定結(jié)果顯示,成年公羊顯著低于成年母羊,斷奶小公羊高于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。R指標(biāo)表明,成年公羊高于成年母羊,斷奶小公羊顯著低于斷奶小母羊,妊娠母羊顯著高于哺乳母羊和后備母羊。

表4 崇明白山羊血清鈣、鎂、鐵、磷指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果Table 4 Serum calcium,magnesium,iron and phosphorus indexes in Chongming white goats

3 討論

血清中各種生化成分作為動(dòng)物生命活動(dòng)的基礎(chǔ)物質(zhì),其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律能夠體現(xiàn)重要的生物學(xué)特性[7],既反映動(dòng)物的生理性狀與外在表現(xiàn),又反映不同性別、年齡、生理階段及所處地理環(huán)境的特征特性變化[8]。因此,這些血清生化指標(biāo)的變化特點(diǎn)可作為判斷崇明白山羊生理體況是否正常的依據(jù)。本試驗(yàn)對(duì)崇明白山羊20項(xiàng)主要血清生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)分析,可為其飼養(yǎng)管理、疾病防治及品種選育等工作提供參考。

反映肝實(shí)質(zhì)的主要2項(xiàng)指標(biāo)為谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶,它們?cè)诎被岬姆纸馀c合成中起重要作用,與生長(zhǎng)發(fā)育速度和生產(chǎn)性能有較強(qiáng)的相關(guān)性[9]。當(dāng)AST持續(xù)升高超過ALT,往往提示肝實(shí)質(zhì)受到損害。成年羊的這2項(xiàng)指標(biāo)高于小羊,可能與成年羊生長(zhǎng)代謝旺盛有關(guān),但不排除疾病的影響,當(dāng)肝功能衰竭或受阻時(shí),谷丙轉(zhuǎn)氨酶會(huì)釋放入血,血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量便隨之升高。直接膽紅素、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶是反映膽紅素代謝及膽汁淤積的指標(biāo),當(dāng)出現(xiàn)膽紅素代謝障礙或膽汁淤積時(shí),上述指標(biāo)出現(xiàn)升高趨勢(shì)。白蛋白、總蛋白、膽堿酯酶是反映肝臟合成功能的主要指標(biāo),長(zhǎng)期降低提示營養(yǎng)攝入不足以及機(jī)體蛋白質(zhì)代謝障礙和免疫功能減退。同山羊正常血清生化參數(shù)[10]（TR:66.7 g∕L,ALB:39.6 g∕L）比較,成年母羊與妊娠母羊TR值高于指標(biāo)參考值,妊娠母羊ALB值高于指標(biāo)參考值,其他羊群則低于指標(biāo)參考值;妊娠母羊的上述指標(biāo)均最高,說明妊娠母羊營養(yǎng)攝入平衡,而斷奶小羊和后備母羊明顯偏低,提示斷奶小羊與后備母羊可能營養(yǎng)不足,應(yīng)根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)情況對(duì)各類羊進(jìn)行科學(xué)合理的營養(yǎng)調(diào)控。

臨床上,血清尿素氮是腎功能的重要指標(biāo),由肝臟合成經(jīng)腎臟排出,是機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的代謝機(jī)能和肝腎機(jī)能狀態(tài)的反映[11]。其含量升高會(huì)呈現(xiàn)各種原因?qū)е碌哪I功能障礙、心衰失水等疾病,含量低提示蛋白質(zhì)的分解速率慢。妊娠母羊UREA指標(biāo)含量略高,表明其蛋白質(zhì)的分解速率較快,妊娠母羊隨著胎兒的發(fā)育會(huì)出現(xiàn)腎臟負(fù)擔(dān)加重,代謝產(chǎn)物增多。

肌酸激酶、乳酸脫氫酶和α-羥基丁酸脫氫酶共同組成心肌酶譜,對(duì)診斷心肌梗死有重要意義。CK也是一項(xiàng)反映動(dòng)物應(yīng)激狀態(tài)的敏感指標(biāo),其活性高則抗應(yīng)激能力弱。本研究中公羊CK均高于母羊,一般母羊性情溫順,而公羊受到驚嚇刺激則掙扎反抗,公羊的抗應(yīng)激能力弱于母羊。LDH水平反映動(dòng)物受到強(qiáng)烈運(yùn)動(dòng)、驚嚇、肌肉損傷等外界刺激后機(jī)體的反應(yīng)程度,也是機(jī)體抗應(yīng)激能力的一項(xiàng)指標(biāo)。在相同應(yīng)激作用下,個(gè)體LDH水平越高,表明肌肉代謝水平越高,抗應(yīng)激能力越弱[12-13]。本研究中的成年羊LDH顯著高于小羊,表明成年羊的抗應(yīng)激能力弱,這與何春波等[14]研究不一致,推斷不同品種的羊在不同環(huán)境下其機(jī)體代謝水平會(huì)存在一定差異。

血清淀粉酶可診斷急性胰腺炎[15],成年公羊與成年母羊,斷奶小公羊與斷奶小母羊均無顯著差異。血糖（GLU）是反映胰島功能的指標(biāo),是機(jī)體能量的主要來源。各組羊群的GLU均在正常參考范圍（GLU:2.5—3.3 mmol∕L）,表明崇明羊的胰臟功能正常。血脂（CHOL、TG）是反映心腦血管疾病的指標(biāo),CHOL含量低的個(gè)體其肌間脂肪含量高,而TG是肌間脂肪含量和肌纖維直徑的主要決定變量,常作為肉質(zhì)的評(píng)價(jià)指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn),后備母羊CHOL最低,哺乳母羊的TG最低,其指標(biāo)越低證明機(jī)體對(duì)脂肪的利用率越高。崇明小母羊CHOL低于雷山5月齡小母羊[16],表明崇明小母羊肉質(zhì)較優(yōu)。

血清中的鈣鎂鐵磷等離子對(duì)骨骼生長(zhǎng)發(fā)育、神經(jīng)興奮、肌肉收縮、貧血診斷和動(dòng)物體內(nèi)的鈣磷代謝均有一定影響[17]。鈣磷是影響骨骼代謝的重要物質(zhì),與河南奶山羊[18]的妊娠母羊和哺乳母羊相比,崇明妊娠母羊Mg、R、Ca含量均高于河南妊娠母羊,崇明哺乳母羊的Mg、R含量與河南哺乳母羊指標(biāo)范圍一致,Ca含量高于河南哺乳母羊,這可能由于品種不同所致,而且特殊生理期指標(biāo)存在不穩(wěn)定性。本研究中后備母羊的鈣磷含量均處于最低,哺乳母羊鈣磷含量也相對(duì)較低,哺乳母羊在哺乳期間會(huì)有大量鈣磷離子流失,這與羊群的生理狀況有一定的相關(guān)性。

崇明白山羊血清生化指標(biāo)不僅能反映不同性別和生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)發(fā)育、生命活動(dòng)、新陳代謝等基本情況特征,同時(shí)也體現(xiàn)出動(dòng)物機(jī)體實(shí)質(zhì)與表型之間的相關(guān)性,不同性別的成年羊與斷奶小羊在ALR、DBIL、GGT、CHE、UREA、HBDH、ALT和AMY等指標(biāo)中均有其相對(duì)穩(wěn)定性,但其余指標(biāo)仍有差異,這與Smith[19]、Nazifi等[20]認(rèn)為性別是影響動(dòng)物血液生化指標(biāo)的重要因素之一相一致。有關(guān)崇明白山羊的血清生化指標(biāo)尚未有相關(guān)報(bào)道,因此本研究將進(jìn)一步完善各項(xiàng)血清生化指標(biāo),以期對(duì)崇明白山羊上述各類指標(biāo)與其生產(chǎn)性能之間的關(guān)系做進(jìn)一步探討。