元胡水煮液對炎癥痛大鼠的鎮痛作用

于曉利 曹公譯胡文昭 梁 雪 沈 勇 周 強 付立波

(長春師范大學生命科學學院，吉林 長春 130032)

元胡，又名延胡索、玄胡，為罌粟科紫堇屬多年生草本植物，在《本草綱目》中歸納元胡有“活血，利氣，止痛，通小便”4大功效，并推崇元胡“能行血中氣滯，氣中血滯，故專治一身上下諸痛”。以塊莖入藥，其調經止痛功效尤為顯著，臨床上常將元胡用于治療痛經、血虛頭痛、腰腹疼痛等癥。元胡止痛方主要由延胡索和白芷組成；元胡在治療痛經方面是通過抑制子宮收縮起直接鎮痛作用。炎癥是疼痛最常見的原因之一，臨床上很多原因不明的疼痛實際上是由于軟組織的無菌性炎癥所致〔1〕。所以，只有建立炎癥痛動物模型以研究炎癥痛的特征及其作用機制，才可以為研究更有效的鎮痛方法提供支持與幫助。炎癥過程一般在注射后3～4 h內開始，炎癥癥狀一般能在24 h后基本復原〔2〕。已經有研究表明，給實驗性偏頭痛大鼠灌胃元胡止痛膠囊有明顯的鎮痛作用〔3，4〕。但至今尚未發現有元胡水煮液對慢性痛當中的炎癥痛大鼠的鎮痛效果，為進一步研究元胡鎮痛作用，本實驗以鹿角菜作為致炎劑建立炎癥痛模型，采用元胡水煮液對炎癥痛大鼠灌胃方法，以熱板和壓板測痛儀對大鼠進行痛覺測試，來研究元胡水煮液對炎癥痛大鼠的鎮痛作用。

1 材料與方法

1.1試驗動物 本實驗全部使用雄性Wistar大鼠8只，體重200～220 g，由吉林大學白求恩醫學院動物實驗中心提供。在實驗期間保持分籠飼養，自由進食和飲水，確保自然光照，飼養溫度控制在(22±2)℃，確保恒定的晝夜節律的生活環境。實驗中盡量減少大鼠的使用數量，并盡可能減少其他因素對大鼠所造成的不良影響。

1.2主要試劑與儀器 元胡，購于義善堂大藥房南廣場店。稱取元胡于瓷缸中，加入蒸餾水煮沸后獲得元胡水煮液母液，然后用母液配制濃度分別為24、48、96 mg/ml的元胡水煮液；生理鹽水由長春豪邦藥業有限公司制造，鹿角菜為Sigma公司制造的產品；智能熱板儀(YLS-6B)，電子壓痛儀(YLS-3E) 均來自于安徽省的淮北正華生物儀器設備有限公司。

1.3炎癥痛模型的建立與行為測痛 在大鼠右側足底皮下注射鹿角菜(鹿角菜需現用現配，避免變性而存在誤差)，建立大鼠炎癥痛模型。注射時間應該調整在行為學測試之前的3 h，注射后3～4 h，大鼠后爪將會出現明顯紅腫，皮溫顯著升高，此時將進行痛覺測試；在進行致炎和灌胃實驗之前，先要對大鼠進行熱板和壓板測試的訓練，主要目的是使大鼠熟悉測試環境，從而減少因緊張或不熟悉環境而造成的實驗誤差。訓練總共需要進行7 d，每天5輪，每輪3次。熱板測試：采用智能熱板儀進行測試，智能熱板儀的溫度需要控制為(52±0.3)℃。左手握住大鼠身體，右手持于大鼠待測腿髖關節處，使其腿完全伸直，下壓使得待測爪與熱板面的充分接觸。接觸時輕踏踏板開關開始計時，后爪主動回縮離開熱板表面時再次踏開關以停止，這段時間作為大鼠后爪縮爪反應潛伏期(HWL)。壓力測試：使用電子壓痛儀進行測試。左手握住大鼠身體，右手持于大鼠待測腿髖關節處，使其腿完全伸直，下壓使得其爪與實驗小平面接觸，接觸時同時輕踏踏板開關，楔形有機玻璃下降落在大鼠后爪上，壓力將以30 g/s的速度增進，同樣方法測得大鼠對機械刺激的HWL。訓練后大鼠對傷害性熱刺激的HWL不得超過5 s，對傷害性機械刺激的HWL不得超過6 s。注射藥物前先測量3組HWL作為基礎值；注射藥物后各時間點的HWL以相對于基礎值的變化百分比表示。

1.4統計學方法 采用SPSS18.0 統計軟件進行t檢驗。

2 結 果

給炎癥痛大鼠灌胃24 mg/ml元胡水煮液與灌胃生理鹽水作為對照，大鼠對熱刺激和機械刺激的HWL變化百分比見表1，與對照組比較，炎癥痛大鼠灌胃24 mg/ml元胡水煮液后左、右爪機械刺激的HWL有極顯著差異(均P<0.001)，左、右爪熱刺激無明顯差異(均P>0.05)。給炎癥痛大鼠灌胃48 mg/ml元胡水煮液與灌胃生理鹽水作為對照，大鼠對熱刺激和機械刺激的HWL變化百分比見表2，與對照組比較，炎癥痛大鼠灌48 mg/ml元胡水煮液后的左、右爪機械刺激的HWL均有顯著差異(均P<0.01)，左、右爪熱刺激無明顯差異(均P>0.05)。給炎癥痛大鼠灌胃96 mg/ml元胡水煮液與灌胃生理鹽水作為對照，大鼠對熱刺激和機械刺及的HWL變化百分比見表3，與對照組比較，炎癥痛大鼠灌96 mg/ml元胡水煮液后的左、右爪熱刺激和機械刺激的HWL均有顯著差異(均P<0.01)，即明顯延長了大鼠的HWL。

表1 灌胃24 mg/ml元胡水煮液的炎癥痛大鼠與對照組(生理鹽水)大鼠的HWL(n=8)

與對照組同側別比較：1)P<0.001

表2 灌胃48 mg/ml元胡水煮液的炎癥痛大鼠與對照組大鼠HWL比較

與對照組同側別比較：1)P<0.01,下表同

表3 灌胃96 mg/ml元胡水煮液的炎癥痛大鼠與對照組大鼠的HWL比較

3 討 論

元胡史載于《開寶本草》，性溫，味辛苦，入心、脾、肝、肺，是活血化瘀、行氣止痛之妙品，在臨床上的應用也并不少見，經過多年臨床用藥驗證，具有良好行氣止痛，活血化瘀的功效，特別在治療痛經方面有很好的效果〔5〕。此外，已有相關學者研究元胡止痛膠囊對小鼠活血鎮痛的作用，結果表明元胡止痛膠囊可以明顯改善血瘀癥小鼠的血液流變性，并有很好的鎮痛效果〔6〕。也有研究發現，元胡止痛栓能夠提高小鼠熱板法、大鼠甲醛法動物的痛閾；延長小鼠、大鼠痛經模型的扭體潛伏期、降低扭體次數及扭體發生率〔7〕，具有良好的鎮痛作用，并能夠對抗催產素所致離體子宮平滑肌的收縮作用〔8〕。元胡的鎮痛作用機制主要是由其內含有的化學成分決定，決定其鎮痛作用的化學成分有延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索癸素、延胡索丑素，這些成分都為生物堿。已有研究證實延胡索乙素的鎮痛作用最強，次之為延胡索丑素，并且表明延胡索乙素在治療痛經時是通過抑制子宮收縮起到鎮痛作用。而在其他方面的鎮痛作用主要是因為延胡索乙素作為多巴胺2型受體的受體抑制劑，其抑制脊髓以上D2受體達到鎮痛作用。炎癥痛是一種常見的慢性痛，患有炎癥痛的患者數不勝數。因此，研究新型鎮痛類藥物具有重大的生理學意義。本實驗結果表明，元胡水煮液對炎癥痛疼痛變化具有調節作用。