王啟菊,程汝佳,劉東升,周賢軍,趙延梅,孟克達拉 ,晁生玉*,丁家波
(1.海西州動物疫病預防控制中心,德令哈 817099;2.中國獸醫藥品監察所,北京 100081;3.青海省地方病預防控制所,西寧 811602;4.都蘭縣動物疫病預防控制中心,察蘇鎮 816199;5.茫崖行委動物疫病預防控制中心,花土溝鎮 816499)
畜牧業是推動青海經濟發展的主要行業之一,海西州的主體是我國四大盆地之一柴達木盆地,約占青海省草原面積的26.6%,草原遼闊,畜牧業資源豐富,牛羊飼養量龐大。然而,近十年來,海西州多個縣區持續出現牛羊流產現象,給本地牛羊養殖業帶來了巨大損失。為了解海西地區家畜流產的主要病因,本文針對布魯氏菌病(布病)、衣原體病以及弓形蟲病這三種易引起家畜流產,且嚴重危害公共衛生安全的疫病進行了血清學調查。
布病是由布魯氏菌(brucella)引起的一種以母畜流產、公畜睪丸炎及關節炎為主要癥狀的人畜共患病[1];衣原體病是由鸚鵡熱衣原體和流產衣原體為主要病原引起的一種人畜共患病,臨床上主要引起母羊的流產,牛、羊的卡他性肺炎,犢牛的腦炎等[2];弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起的,易感對象包括人在內近350多種脊椎動物,臨床上主要癥狀包括高熱、呼吸困難、中樞神經機能障礙、早產和流產等[3]。以上三種疫病是高原地區引起家畜流產的常見病因,往往需要進行血清學方法對其進行區分。本研究對海西地區31個鄉(鎮)97個牧業村進行了以上3病的血清學調查,并對檢測進行了分析,為本地區布病、衣原體病和弓形蟲病的防控措施制定提供科學依據。
1.1 血清 待檢血清隨機采自海西州31個鄉鎮97個牧業村。牛羊血清樣本共14114份,其中羊血清樣本12620份,牛血清樣本1494份。
1.2 診斷試劑 布魯氏菌抗原、陽性血清、陰性血清購自中國獸醫藥品監察所;衣原體間接血凝抑制試驗(IHA)抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液,購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所;弓形蟲IHA抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液,購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所,動物用弓形蟲抗體快速檢測卡購自深圳康百德生物有限責任公司。
1.3 方法
1.3.1 布病共檢羊血清樣本12620份、牛血清樣本1494份,采用布魯氏菌虎紅平板和試管凝集試驗進行檢測。虎紅平板凝集試驗中0,出現凝集現象即判為陽性,否則判為陰性;試管凝集試驗中,有顯著凝集與沉淀(++),液體50%清亮時的稀釋度定為凝集價,牛血清以0.5%的石炭酸生理鹽水做11∶100倍稀釋,羊血清以0.5%的石炭酸生理鹽水做1∶50倍稀釋出現++以上的凝集價,判為陽性。
1.3.2 衣原體共檢羊血清樣本12510、牛血清樣本1478份。采用IHA方法進行檢測,按照間接血凝試驗(IHA)診斷液使用說明書進行操作,血清效價達≧1∶16時,判為陽性。
1.3.3 弓形蟲共檢羊血清樣本12505份、牛血清樣本1439份。其中羊血清樣本采用弓形蟲抗體快速檢測卡按快速檢測卡使用說明書進行,血清檢測線區和對照線區同時出現紅色線判為陽性,陰性血清只有對照線區出現一條紅色線區;牛血清樣本采用IHA方法進行檢測,按照間接血凝試驗(IHA)診斷液使用說明書進行操作,待檢血清效價≧1∶64時,判為陽性。
2.1 布病檢測結果 本實驗對海西地區共7個縣區(行委)進行羊布魯氏菌病的抽樣檢測,共檢血樣12620份,布病平均感染率為0.052%。其中,以天峻縣羊布病檢出陽性率最高,個體陽性率達0.16%;格爾木市次之,布病個體陽性率為0.11%,都蘭縣羊布病個體陽性率為0.096%;其余五縣(行委)均未檢出布病陽性羊。對格爾木市、天峻縣等4縣進行牛布病的血清學檢測,共檢樣本1494份,牛布病平均感染率為5.905%。其中,天峻縣牛布病血清學陽性率最高,個體陽性率達到20.1%;烏蘭縣次之,個體陽性率為3.1%,都蘭縣牛布病個體陽性率為0.37%,格爾木市共檢牛508 頭,未檢出血清學陽性牛。具體檢測結果見表1。

表1 海西地區布病血清學檢測結果Tab 1 Results of serological detection of brucellosis in Haixi City
2.2 衣原體病檢測結果 本次實驗對海西地區7個縣區(行委)進行羊衣原體病血清學檢測,共檢樣本12510份,羊衣原體病平均感染率8.27%。其中以天峻縣羊衣原體病感染率最高,個體血清學陽性率高達15.1%,烏蘭縣次之,陽性率9.1%;本次檢測中,海西各地羊衣原體感染率均較高,以大柴旦行委陽性率最低,為1.5%,其余幾地衣原體陽性率均在6.5%以上。同時,對格爾木市等5個縣區進行牛衣原體病檢測,共檢樣本1494份,牛衣原體病平均感染率6.904%。其中天峻縣衣原體病陽性率最高,個體陽性率達23.1%,德令哈市次之,個體陽性率為8.7%。5個縣區均存在衣原體感染病牛,以格爾木市感染率最低,個體陽性率為0.6%。具體檢測結果見表2。
2.3 弓形蟲病檢測結果 本次實驗共對海西地區7個縣(行委)進行羊弓形蟲病血清學檢測,共檢血清樣本12505份,羊弓形蟲病平均感染率為0.072%。其中以烏蘭縣羊弓形蟲病感染率最高,個體血清學陽性率達0.18%;格爾木市次之,個體陽性率為0.16%;天峻縣、大柴旦行委、茫崖行委三地羊弓形蟲病陽性率為0。對格爾木市等5地進行牛弓形蟲病檢測,共檢血清樣本1439份,牛弓形蟲病平均感染率為9.4%。其中,以天峻縣弓形蟲病感染率最高,個體陽性率高達31.2%;烏蘭縣與格爾木市牛衣原體病感染率較為接近,個體陽性率分別為6.8%和6.9%。具體檢測結果見表3:

表2 海西地區衣原體病血清學檢測結果Tab 2 Results of serological detection of chlamydiosis in Haixi City

表3 海西地區弓形蟲病血清學檢測結果Tab 3 Results of serological detection of toxoplasmosis in Haixi City
2.4 布魯氏菌病,衣原體病,弓形蟲病三病共感染結果 在檢測過程中,對三病檢測均呈陽性的牛羊血清樣本進行統計,得到牛和羊的多病共感染數據。結果顯示,羊的檢測數據中,無共感染樣本;牛的檢測樣本中,有15份血清樣本在檢測中三病均呈陽性,并有多份樣本存在兩病共感染現象。具體結果見表4:

表4 海西州牛多病共感染檢測結果Tab 4 Results of serological detection of multi-infections in cattle in Haixi City
從檢測結果可知,海西地區各類羊布病仍處于穩定控制范圍內,平均感染率為0.052%。與馬少麗[4]、楊坤[5]等報道結果基本一致,不過與完馬單智[6]、李績龍[7]與張長英[8]等報道的水平相比顯著降低。這與海西近年各地區重視品種羊選育,加強品種羊布病檢測,淘汰血清學檢測陽性羊只,以及牧區羊只流動性較低,易控制有關。但是,此次檢測海西地區牛的布病平均陽性率為5.905%,以天峻縣感染率最高為20.1%,顯著高于之前李桂蘭[9]、閔云龍[10]等報道的陽性水平。近年來海西州大力發展"柴達木褔牛"產業,農牧戶盲目的從外地大量引進犏牛,而據羅建軍[11]、王成林[12]等報道,海西地區引入的犏牛總體陽性率較高,同時牧民對引進的犏牛又缺乏必要的檢測,家畜的頻繁貿易流動加劇了布病在不同地區的傳播,各地區應加強聯合檢疫工作,杜絕陽性牛流動傳播現象的發生。同時,在此次檢測中,都蘭縣牛布病感染率為0.37%,在穩定控制區范圍之內,說明海西地區牛布病的高陽性率并不是普遍現象。
海西地區牛羊衣原體病感染狀況較布病嚴重許多,各地區均存在衣原體病感染狀況,羊衣原體平均陽性率8.27%,以天峻縣羊衣原體陽性率15.1%最高,與楊坤[5]等調查結果基本一致,與李曉卉[13]、多杰才讓[14]以及張長英[8]等報道的陽性水平相比顯著降低;牛衣原體平均陽性率為6.904%,其中以天峻縣23.10%最高,與索南才讓[15]和高麗英[16]等之前報道陽性水平一致。總體來看,相較于布病以及弓形蟲病,衣原體病在海西地區牛羊中的流行情況已經到了十分嚴重的程度。在常規例行檢查中,國家把布病列入必檢范圍內,而沒有把衣原體病列入必檢范圍內,這也是牛群發生衣原體病的主要原因,也成為引起牛流產的主要原因,同時給奶牛場造成了一定的經濟損失。因而建議今后的養牛業中把衣原體和也作為常規檢測項目。此病在臨床感染上都是以亞臨床型為主,感染羊可長期帶毒,但無發病癥狀,因此常規檢測的所有步驟必須如實進行,發現陽性病畜及時進行隔離、淘汰,將該類疾病的控制在發病初期,淘汰陽性羊,以達到凈化目的,確保人畜安全。弓形蟲病不會通過精液或交配傳播[20],而衣原體有可能通過交配感染[21],因而交配感染可能是其羊群衣原體病抗體陽性率偏高的另一原因[22]。所以在加大對衣原體病的檢測力度,推廣使用衣原體疫苗,制定相應的防治規劃措施的同時,還要篩選健康的公牛羊,杜絕交配感染情況的存在,及時淘汰陽性羊,消滅傳染源。
血清學調查結果顯示,羊弓形蟲病平均陽性率為0.072%,與楊坤[5]、李曉卉[13]、張曉強[17]以及馬文莉[18]等前人檢測報道結果差異較大,可能與采用的檢測方法不同有關,此次羊弓形蟲病采用弓形蟲快速檢測卡進行檢測,而以往調查采用IHV方法,具體結果之間的差異需進一步探討。牛弓形蟲平均感染率9.4%,與鐵富萍[19]等調查結果基本吻合,說明海西地區牛弓形蟲感染狀況較為嚴重,應定期對全縣的耗牛群進行弓形蟲病血清學監測,盡早發現陽性感染牛,對檢出陽性牛要科學處理,為疫病防控提供合理依據。
根據檢測結果,空懷羊群中衣原體的抗體陽性率最高,平均感染率為8.27%,其中天峻縣更是達到了15.1%,而其他兩病的陽性率均較低,最高的弓形蟲陽性率也僅為0.11%,所以推測認為衣原體是海西地區導致羊流產的主要病原。但是,調查結果顯示,海西地區牛的三病抗體陽性率都較高,牛布病和衣原體的陽性率分別為20.1%和23.1%,牛弓形蟲病抗體陽性率相對較低,但是也高達9.9%,同時在檢測中還發現,有15頭牛三病抗體均呈陽性,病原感染情況較為復雜,導致海西地區母牛流產的主要病原還需進一步確認。初步推測,動物在感染一種疾病的前提下,更易受到其他疾病的侵襲,才會出現共感染情況的存在。這三種疾病都會導致牛羊的流產,不僅在種群之間傳染,還是人畜共患病,對養殖業乃至人類都有極大危害。而作為二類動物疫病的布魯氏菌病,一旦發現牛羊出現此疫病癥狀,根據中國動物防疫法規定,必須進行隔離、撲殺、銷毀、消毒、無害化處理、緊急免疫接種、限制易感染動物和動物產品及其有關物品出入等控制、撲滅措施,這不僅讓養殖戶承擔巨大的經濟風險,還會危及到整個地區與牛羊相關的行業和人群,這種危害是不可逆的,因此共感染的情況勢必要引起足夠重視,這樣才可以在疫病防治工作上取得相應的成績和效果。
隨著市場經濟的快速發展,畜禽及其產品的交易日益頻繁,因此疫病的傳播機會大大增加。為此有關部門要嚴格把關,尤其認真開展產地檢疫,陽性者一律全部淘汰,切斷傳染源。尤其對于天峻縣這類牛羊養殖規模較大的地區,在種牛和種羊引進和串換等各個環節上,必須嚴把檢疫關,時刻做好牛羊布魯氏菌病、衣原體病、弓形蟲病疫病的監測工作,對檢出陽性牲畜應堅決執行淘汰和無害化處理措施,避免疫病傳播至其他地區。