急性心肌梗死發病風險與C反應蛋白基因多態性的相關性

朱艷彬 劉同庫 馬 雋 信業久 王 丹

(北華大學附屬醫院，吉林 吉林 132001)

C反應蛋白(CRP)以參與炎癥反應為主要作用，進化非常保守。若CRP基因發生遺傳變異，可能會改變其表達、結構及功能；從而影響個體的心肌梗死易感性，急性心肌梗死(AMI)發病之前會有很長的隱匿期〔1〕，AMI危險性大，及早發現并預防越來越刻不容緩，如果能在發病之前進行檢測、并預見這種疾病的可能性，及早的進行干預，必定具有很重大的臨床價值〔2〕。此外，分子學、基因學是現在的研究趨勢，在這種大背景下,AMI的基因檢測價值凸顯，CRP基因學研究成為當今熱點〔3〕。本文探討AMI發病風險和CRP基因T-757C多態性的相關性。

1 資料和方法

1.1臨床資料 選擇北華大學附屬醫院2015年12月至2017年2月住院的AMI患者125例(AMI組)，全部由心電圖(ECG)、超聲心動圖或冠狀動脈CT血管成像、數字減影血管造影等確診。選擇同一期間體檢的健康觀察對象85例作為對照組。

1.2一般資料 收集全部觀察對象的基本資料。

1.3CRP基因T-757C多態性檢測 參照以往研究方法〔3〕。

1.4AMI基因報告 分為以下6個階段①-：患病的風險非常低,幾乎不患本病。②-:發生AMI的概率較低,相當與普通人。③+-:發生AMI的風險有，但不高，發病概率略高于普通人，建議該人群日常生活中注重預防保健，無需治療。④+:AMI發病因素較高，需要高度重視，預防為主，注意預防保健，定期檢查身體，若生活因素控制不佳，發病率提高，可通過控制生活習慣，降低發病率。⑤:AMI的發病風險很高，若生活習慣控制不佳，很容易發病，若注重生活因素控制，可有效降低發病概率。建議及早預防保健和身體檢查。⑥:AMI的發病風險極高，若生活因素控制欠佳，極易發病，同樣的，若注重控制生活因素，如心情平和等，可有效降低發病概率。建議及早預防保健及規范、定期專項體檢。①～③認為陰性,④～⑥認為陽性。

1.5AMI的基因檢測適應證〔4〕①目前尚無臨床狀,但危險因素很多，如中老年男性，絕經后女性；不良飲食習慣，長期吸煙史，肥胖或者缺乏運動；有家族史，血糖、血壓及血脂等異常；胰島素抵抗增強；一些凝血因子的增高；高纖維蛋白原血癥;尿酸增高等。可以經由基因檢測，預測觀察對象的AMI發病概率，稱為一級預防。②受檢查已經出現胸悶、胸痛、呼吸困難等臨床表現,可抽血檢測基因，評估梯度，以便進行下一步檢測或保健。③抑郁、焦慮等與AMI癥狀相似的病變,心電圖不典型者可抽血進行基因檢測。

1.6血清CRP水平檢測 AMI組發病時間短于24 h，并及時采集空腹靜脈血，取5 ml血液于室溫下靜置30～60 min，離心后得到需要的血清，選擇酶聯免疫吸附試驗檢測CRP水平，檢測之前血清需要放入-70℃冰箱內保存。

1.7統計學方法 采用SPSS19.0軟件行t及χ2檢驗；偏態分布者選擇中位數/四分位數間距(M/IQR)表示，并進行Wilcoxon秩和檢驗或Kruskal-WallisH檢驗。校正其他因素對血清CRP濃度的影響時選擇多變量Logistic回歸分析；臨床參數及血清CRP水平的關聯性分析選擇多元線性回歸分析。

2 結 果

2.1一般臨床資料對比 與對照組相比較，AMI組年齡更長，男性比例明顯提高，吸煙與高血壓的比例更高，血糖水平更高，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平明顯減低(P<0.05)，空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2CRP基因T-757C多態性 PCR擴增獲取314 bp的特異性片段，該片段經過酶切后在兩組中皆呈現CC(314 bp)、TC(314 bp、234 bp和80 bp)和TT(234 bp和80 bp)3種基因型。兩組基因型分布差異無統計學意義(P>0.05)，具有群體代表性，見表2。

表1 兩組一般臨床資料比較

2.3血清CRP水平 AMI組血清CRP濃度明顯高于對照組(5.985/6.255 μg/ml:3.269/1.294 μg/ml，P<0.01)，且經Logistic回歸分析校正AMI相關臨床因素，包括性別、年齡、吸煙、高血壓、血糖和血脂異常等，兩組血清CRP水平差異有統計學意義(OR=2.088，95%CI1.259～3.458，P<0.01)。

2.4AMI患者CRP基因T-757C多態性與血清CRP水平的相關性 去除以上提到的臨床影響因素后，分析比較AMI患者各種基因型的血清CRP水平，CC(4.071/2.492 μg/ml)、TC(5.744/6.319 μg/ml)及TT(6.126/6.627 μg/ml)基因型之間CRP水平差異無統計學意義(P>0.05)。CC、TC基因型的AMI患者≥60歲和<60歲的CRP水平差異有統計學意義(P<0.05)，而TT基因型的AMI患者在不同年齡段CRP水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 不同年齡AMI患者CRP水平比較(M/IQR,μg/ml)

3 討 論

CRP來源于肝臟，作為當前炎癥標志中探討最廣泛的因子，以血清濃度反映感染或組織損傷。CRP的主要生物學功能是通過其識別病原體和宿主的能力受損的細胞和補體系統的招聘和吞噬細胞介導的消除〔5〕。CRP還是一項新的心肌標志物，心血管疾病的病理改變就是血管發生炎癥反應，進而出現粥樣硬化等表現，因此在這個組織受損的過程中CRP值也會升高，進而成為實驗室檢測指標〔6〕。文獻表示，超敏CRP(hsCRP)濃度是心血管疾病發展過程中的促炎性反應，其濃度的升高和心血管疾病聯系緊密〔7〕。CRP具有多種生物學效應:①和補體發生反應，補體被激活補體，CRP發生氧化，促進補體的吞噬作用；②CRP本身可促進與外源性凝血機制相關的組織因子的增加，從而增加血栓的形成;③改變原本的內皮細胞一氧化氮(NO)的表達與形成，通過影響血管內皮細胞功能，加快白細胞介素(IL)-6等因子的生成，同時降低內皮細胞NO合酶mR1VA的穩定性，進一步降低NO量，不易產生新生血管，進而改變心血管結構；④降低LDL-C的作用。血清CRP濃度成為冠狀動脈病變高危人群的獨立預測指標。CRP是冠心病的重要危險因子。因此，生物學層面的CRP基因的遺傳變異可能調節AMI風險。CRP基因已被映射到人類染色體1q21和1q23之間。它包含2 263個核苷酸，有1個單一的內含子。CRP的表達主要是在轉錄水平的調節，而轉錄后機制也有助于CRP基因表達的調控。研究已經表明，在CRP基因啟動子區常見的多態性可能是AMI的風險中扮演著重要的角色〔3,8〕。

血清CRP、白細胞及白蛋白水平受遺傳因素影響。位于啟動序列的CRP基因286C>T>A屬于功能性多態性位點，和CRP水平有相關性。CRP基因T-757C也位于啟動子區，在轉錄中起重要作用，和286C>T>A間關系密切〔9〕。所以推測，T-757C也可能通過轉錄、翻譯，間接影響血清CRP水平。

本研究顯示，AMI患者和健康人均存在CRP基因T-757C多態性，且T-757C多態性與AMI明顯相關。但本研究中各基因型樣本特別是CC型樣本量很少，統計結果可能存在一定誤差，還需進一步研究CRP基因多態性和AMI的相關性。采用CRP基因多態性檢測參與評估AMI的風險性；增加了對AMI發生發展的認識〔10〕。對于臨床上懷疑AMI的患者,可以通過抽血檢查基因的方式預測AMI的發病風險,改變了以往必須經影像檢查診斷心臟病變的局面，減輕冠心病患者對臨床檢查存在的恐懼和抵觸情緒。