口蝦蛄幽門胃、中腸、后腸及中腸腺形態(tài)組織學(xué)觀察

安繼宗，徐海龍,2,3，王彥懷，田源廣，張樹林,2,3

(1.天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院，天津 300384；2.天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室，天津 300384；3.水產(chǎn)生態(tài)與養(yǎng)殖國家級實驗教學(xué)示范中心(天津農(nóng)學(xué)院)，天津 300384；4.天津市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，天津 300221；5.天津奕鳴泉水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，天津 300480)

消化道是食物運輸、消化及營養(yǎng)物質(zhì)吸收的重要組織器官，其對食物的消化和吸收直接影響到生物體的生長、發(fā)育和繁殖等重要生命活動。開展消化道結(jié)構(gòu)研究，不僅有助于豐富消化生物學(xué)內(nèi)容，還有助于了解生物體的食性，也是探討魚類消化及吸收生理機制的基礎(chǔ)和重要途徑[1]。

口蝦蛄(Oratosquillaoratoria)俗稱蝦爬子、皮皮蝦、螳螂蝦、琵琶蝦等，隸屬節(jié)肢動物門，甲殼綱，軟甲亞綱，口足目，蝦蛄科，口蝦蛄屬，是多年生海產(chǎn)經(jīng)濟甲殼類，廣泛分布于熱帶及亞熱帶海域，也是我國海域內(nèi)分布最廣、產(chǎn)量最大的口足類動物，在我國近海5～60 m水深處均有發(fā)現(xiàn)[2]。近年來，隨著口蝦蛄產(chǎn)量在近海捕撈漁獲中的比例逐漸增加，國內(nèi)學(xué)者就口蝦蛄的群體結(jié)構(gòu)及資源量[3]、形態(tài)特征[4-5]、人工繁育[5]、能量代謝[6]、生存及生長環(huán)境[7]等方面開展了廣泛探討。本研究以渤海灣海捕口蝦蛄為對象，采用解剖和石蠟切片技術(shù)，觀察口蝦蛄消化道組織結(jié)構(gòu)特征，旨在積累口蝦蛄消化生理研究奠定基礎(chǔ)，為食性研究和人工繁養(yǎng)提供理論支撐。

1 實驗材料及方法

1.1 材料

實驗用口蝦蛄于2017年5月至2017年10月使用拖網(wǎng)捕自渤海灣，選取體表完整、活力強的個體6只帶回實驗室，全長108～171 mm，體重11～65 g。

1.2 方法

活體解剖觀察消化道外部形態(tài)結(jié)構(gòu)，然后取幽門胃、中腸及中腸腺、后腸，小塊或小段固定于 Bouin 氏液中，梯度濃度乙醇逐級脫水，石蠟包埋，厚度5 μm連續(xù)切片，HE染色，中性樹膠封片，Olympus BX51顯微下觀察并拍照。

2 結(jié)果

2.1 口蝦蛄消化道形態(tài)特征

口蝦蛄的消化系統(tǒng)由消化道和中腸腺組成。消化道包括口、食道、胃、中腸、后腸和肛門。口上有一對大顎；食道為連接口與賁門胃的細(xì)小短管；胃由賁門胃和幽門胃組成，賁門胃呈囊狀結(jié)構(gòu)，位于前部，幽門胃較窄小，位于后部；中腸起始于頭胸甲后部至第5腹節(jié)，為細(xì)小直管，幽門胃和中腸相連接的地方背側(cè)突出形成一對中腸盲囊；從第6腹節(jié)開始，腸道逐漸變大為后腸，開口于尾扇部分腹面的肛門。口蝦蛄中腸腺較發(fā)達(dá)，始于頭胸甲中后區(qū)，止于尾扇末端，將幽門胃、中腸和后腸包裹其中，且在體節(jié)相連的地方，向左右延伸至體側(cè)緣。

2.2 幽門胃的組織結(jié)構(gòu)

如圖1所示，口蝦蛄的幽門胃腔分為背室和腹室。背室與中腸相接，背室背側(cè)黏膜上皮細(xì)胞呈高柱狀，表面覆蓋薄的幾丁質(zhì)層；腹側(cè)上皮細(xì)胞呈低柱狀，與黏膜下層向胃腔突起形成皺襞，腹側(cè)表面的幾丁質(zhì)層特化為間壺腹嵴。腹室背側(cè)上皮細(xì)胞呈高柱狀，表面的幾丁質(zhì)層較背室背側(cè)黏膜上皮的略厚，并向胃腔內(nèi)形成平行排列的剛毛，與間壺腹脊相對，稱為壺腹上脊。幽門胃肌肉較少，主要為環(huán)肌。

圖1 幽門胃橫切

2.3 中腸、后腸及中腸腺的組織學(xué)結(jié)構(gòu)

如圖2所示，口蝦蛄中腸壁自內(nèi)向外分別為上皮組織、結(jié)締組織和肌肉組織。中腸無幾丁質(zhì)層，腸壁內(nèi)側(cè)向腸腔突出，形成數(shù)條明顯縱褶；上皮細(xì)胞呈柱狀緊密排列，通過一層薄的結(jié)締組織與中腸腺相連。口蝦蛄后腸腸壁結(jié)構(gòu)與中腸類似，僅腸腔大于中腸腔，后腸上皮細(xì)胞同樣呈柱狀，后腸壁突出進入腔內(nèi)，形成多個縱向脊。中腸和后腸外部被中腸腺包裹，口蝦蛄的中腸腺又稱為肝胰腺，由眾多分支的小管組成，各小管之間通過結(jié)締組織依附。中腸腺上皮細(xì)胞由貯存細(xì)胞、分泌細(xì)胞、吸收細(xì)胞和胚胎細(xì)胞組成。分泌細(xì)胞頂部有一個大的囊泡，囊泡中有少量的顆粒物質(zhì)，可以看到細(xì)胞頂部破裂或崩解；儲存細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中有若干小泡；吸收細(xì)胞呈柱狀，細(xì)胞核大而圓，核仁明顯；胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核與吸收細(xì)胞的類似，大而圓，但胚胎細(xì)胞較小，細(xì)胞頂部達(dá)不到管腔。吸收細(xì)胞和胚胎細(xì)胞的數(shù)量明顯少于分泌細(xì)胞和貯存細(xì)胞。中腸腺內(nèi)較多的腺管最終組合成腺腔，平行于中腸和背腸的兩側(cè)，腺管上皮細(xì)胞主要由分泌細(xì)胞和貯存細(xì)胞組成。

3 討論

石蠟切片方法是組織結(jié)構(gòu)觀察最常用的方法，技術(shù)成熟，被廣泛應(yīng)用。但石蠟切片的操作過程繁瑣，影響成片的因素較多。朱有法和俞靜英認(rèn)為當(dāng)蠟塊硬度不夠時，容易出現(xiàn)切片橫紋[8]。切片橫紋主要表現(xiàn)為蠟片兩端出現(xiàn)褶皺的現(xiàn)象，而中間因為有組織支撐，皺褶程度相比兩端會小一些，甚或不存在；本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)進行切片時，在蠟塊的切面上沿組織左右緣用刀片輕劃一刀，減小蠟片的橫截面積，使組織與兩邊的蠟片接觸減小，從而可以減小甚至避免切出的蠟片出現(xiàn)褶皺的現(xiàn)象，即使當(dāng)切片環(huán)境溫度較高時，該方法的效果也十分明顯，切片后，將蠟片放入溫水中自然展開即可。除橫紋外，切片材料脫落也是石蠟切片中普遍存在的現(xiàn)象。進行口蝦蛄幽門胃、腸道和中腸腺石蠟切片時，幽門胃更易出現(xiàn)材料脫落的現(xiàn)象，任成林等[9]認(rèn)為脫水時間過長或過短均可導(dǎo)致切片材料脫落，本實驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)減少脫水時間后，切片材料脫落的問題得到了明顯改善，說明口蝦蛄幽門胃的體積較小，應(yīng)選擇較短的脫水時間，避免因脫水時間過長導(dǎo)致組織變脆變硬而產(chǎn)生材料脫落的問題。

從結(jié)構(gòu)組成看，口蝦蛄消化系統(tǒng)與許多十足目動物的基本一致[10-13]，朱麗巖等[14]研究發(fā)現(xiàn)，三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)幼體發(fā)育到Z3時期開始形成胃磨，胃內(nèi)的角質(zhì)層明顯加厚，并出現(xiàn)中齒和側(cè)齒，具備了較強的研磨能力；Factor[15]發(fā)現(xiàn)美洲龍蝦(Metapenaeusbennettae)在發(fā)育到Ⅲ期蚤狀幼體時，胃磨的齒出現(xiàn)；王海林等[16]指出中國對蝦(Fenneropenaeuschinensis)在M1期時，胃磨初步形成，此時幼蟲的攝食量也相應(yīng)提高；姜永華和顏素芬[17]報道中國龍蝦(Panulirusstimpsoni)成體擁有比幼體更完善的胃磨，研磨能力更強；說明這些十足類生物主要通過胃磨對食物進行消化研磨的。本研究中對口蝦蛄的胃進行解剖時，發(fā)現(xiàn)胃內(nèi)不存在胃磨的結(jié)構(gòu)，而位于胃前端的賁門胃，其增厚的角質(zhì)板兩側(cè)有剛毛排列和角質(zhì)的齒狀結(jié)構(gòu)，故認(rèn)為口蝦蛄對食物的機械研磨可能是依靠角質(zhì)板與剛毛相互配合完成的，但觀察還發(fā)現(xiàn)口蝦蛄胃壁囊腔中有大量的食物殘渣，由此推測口蝦蛄消化食物可能對研磨的依賴較小。

圖2 中腸及中腸腺橫切