高效液相色譜法測定蔬菜中氨基甲酸酯類農藥

◎ 衛 昊

（鹽城市大豐區綜合檢驗檢測中心，江蘇 鹽城 224100）

HPLC法具有較高靈敏度和較好重現性，廣泛應用于氨基甲酸酯類農藥檢測中[1]。本文在蔬菜中氨基甲酸酯類農藥殘留測定時，選用HPLC法，靈敏度高、準確性好。

1 材料與方法

1.1 試樣

蔬菜樣品，隨機選自于某市場。

1.2 儀器

E 2695型高效液相色譜儀配熒光檢測器、Waters Symmetry C18（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）色譜柱；N-E-VAPTM112型氮吹濃縮儀；12位SPE固相萃取儀；ST 16R型高速離心機；KQ-250B型超聲波清洗器；CARB/NH2（500 mg/6 mL）固相萃取小柱。

硼砂、氫氧化鈉、巰基乙醇、鄰苯二甲醛（均為分析純）；甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷（均為色譜純）；濃度均為100 μg/mL的克百威、三羥基克百威、涕滅威砜等氨基甲酸酯。

1.3 儀器條件

選 用 Waters Symmetry C18（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）為色譜柱；柱溫42 ℃，進樣體積20 μL，發射波長465 nm，激發波長330 nm。選取水-甲醇為流動相，流速為1.0 mL/min。

1.4 配制柱后衍生試劑

衍生試劑1：用水稀釋1.00 g NaOH至500 mL，過濾、脫氣、備用。

衍生試劑2：用10 mL甲醇溶解0.1 g鄰苯二甲醛，將上述混合物轉至水溶液中（內涵硼砂19.1 g）。補充溶劑至1.0 L容量，過濾、脫氣。將25 μL的β-巰基乙醇加入溶液中，輕搖、混合，備用。柱后衍生反應器溫度80 ℃，兩種衍生試劑流速0.3 mL/min。

1.5 樣品測定

將10.0 g蔬菜樣品粉碎放入50 mL離心管中，添加乙腈25 mL、搖勻，持續20 min超聲萃取、離心分層[2]。40 ℃水浴中將15 mL上清液氮氣吹至近干，加入丙酮1 mL，待凈化。將經5 mL丙酮/二氯甲烷（體積比1∶1）淋洗后的固相萃取小柱固定至固相萃取儀上，二氯甲烷液面與小柱吸附層表面相近時轉移樣品液至萃取柱，樣液另選比色管（10 mL）接收，液面接近小柱吸附層表面時采用10 mL丙酮/二氯甲烷（體積比1∶1）對小柱分別淋洗3次，氮氣吹至近干，用甲醇定容至1.0 mL，以0.22 μm有機膜過濾，待測。

2 結果與分析

2.1 標準曲線及檢出限

配制濃度為0.05、0.50、1.00、2.00 μg/mL和5.00 μg/mL的氨基甲酸酯標準系列溶液，根據保留時間、外標峰面積（y）、濃度（x）完成標準曲線的繪制，以3倍信噪比計算方法檢出限。3種農藥質量濃度、峰面積在0.05～5.00 μg/mL的濃度范圍內具有良好的線性關系，相關系數0.992～0.998，方法檢出限0.002～ 0.005 mg/kg。

2.2 方法回收率、精密度

不含氨基甲酸酯類農藥殘留的10.00 g白菜樣品內加入50 μL相應濃度標準溶液，渦旋混勻，完成濃度為0.10、0.50、2.00 μg/mL氨基甲酸酯模擬樣品配制。記錄氨基甲酸酯峰面積值，根據標準曲線計算濃度，得到方法精密度[3]。經預處理后的模擬樣品，得到的氨基甲酸酯色譜峰面積對比相應濃度標準溶液進樣色譜峰面積，得到回收率。見表1。

表1 方法回收率及精密度表

2.3 樣品測定

以上述方法測定2種市售蔬菜，黃瓜和土豆，見表2?？煽闯?種市售蔬菜氨基甲酸酯類農藥含量均比檢出限小。

表2 實際樣品測定結果表

3 結論

在蔬菜氨基甲酸酯類農藥的測定中采用HPLC法，加標回收率79%～91%，RSD為0.8%～4.9%，方法檢出限0.002～0.005 mg/kg，方法靈敏度高、準確性好，與農藥殘留檢測要求相適應，適用于蔬菜氨基甲酸酯類農藥殘留測定。