河源地區不明原因復發性流產患者免疫治療的研究分析

吳燕 李漢煌 朱彩容

[摘要] 目的 研究河源地區不明原因復發性流產（RSA）患者采用淋巴細胞主動免疫治療后的臨床效果。方法 方便選取2015 年4 月—2017 年11 月在該院婦科門診或婦保科收治的79例封閉抗體（BA）陰性的不明原因復發性流產患者進行淋巴細胞主動免疫治療，以復查BA判斷臨床療效。結果 患者經主動免疫治療1個療程后，BA陽性率為83.54%（66/79），2個療程后BA陽性率為91.14%（72/79），與治療前比較差異有統計學意義（χ2=12.07、5.38，P<0.01）；免疫治療后，BA轉陽性患者中，妊娠率為59.72%（43/72），經治療后BA仍為陰性的患者中，妊娠率57.14%（4/7），兩組比較差異無統計學意義（χ2=0.07，P>0.05）；免疫治療后，BA轉陽并已妊娠的患者中，接受孕后加強免疫治療為研究組，共30例，其中妊娠成功90.00%（27/30），不成功妊娠10.00%（3/30），未接受孕后加強免疫治療為對照組，共13例，其中妊娠成功46.15%（6/13），不成功妊娠53.85%（7/13），兩組比較差異有統計學意義（χ2=13.36，P<0.01）。結論 淋巴細胞主動免疫治療河源地區不明原因復發性流產患者能提高BA陽性率，及對其再次妊娠具有臨床應用價值。

[關鍵詞] 復發性流產；不明原因；封閉抗體；免疫治療

[中圖分類號] R714 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）05（a）-0013-03

Research and Analysis of Immune Treatment of Patients with Unexplained Recurrent Abortion in Heyuan Region

WU Yan， LI Han-huang， ZHU Cai-rong

Heyuan Maternal and Infant Healthcare Hospital， Heyuan， Guangdong Province， 517000 China

[Abstract] Objective To research the clinical effect of immune treatment of patients with unexplained recurrent abortion in Heyuan region. Methods Convenient selected 79 cases of BA negative unexplained recurrent abortion in Heyuan region for the active lymphocyte immunotherapy admitted and treated in the outpatient in the department of gynecology and department of gynecology and obstetrics from April 2015 to November 2017， and the clinical curative effect was determined by checking BA. Results After 1 treatment course of active immune therapy， the BA positive rate was 83.54%（66/79）， after 2-treatment course， the BA positive rate was 91.14%（72/79）， and the differences were highly statistically significant compared with those before treatment（χ2=12.07， 5.38， P<0.01）， after the immune therapy， the BA negative conversion patients， the pregnancy rate was 59.72%（43/72）， after the treatment， the pregnancy rate was 57.14%（4/7）， and the difference between the two groups was not statistically significant （χ2=0.07，P>0. 05）； after the immune therapy， 0f 30 cases enhancing the immune therapy after pregnancy， the gestational success rate was 90.00%（27/30） and the unsuccessful rate was 10.00%（3/30）， and of 13 cases not enhancing the immune therapy in the control group， the successful rate was 46.15%（6/13） and the unsuccessful rate was 53.85%（7/13）， and the differences were statistically significant（χ2=13.36， P<0.01）. Conclusion The active lymphocyte immunization therapy of patients with unexplained recurrent abortion in Heyuan region can improve the BA positive rate， and it is of clinical application value to the second pregnancy.

[Key words] Recurrent abortion； Unexplained； Blocking antibody； Immune therapy

復發性流產（repetitive spontaneous abortion，RSA）是指自然流產次數≥2次的患者，妊娠早期為疾病高發期，是婦產科常見病，在已婚婦女占得比例大約12%[1-2]，病因復雜尚無定論。部分學者指出可與染色體異常或生殖解剖結構異常等有關。還有學者認為，疾病可能與其他免疫系疾病、生活條件和環境及心理因素等有關[3]。還有42%～82%的其他因素尚未確認[4-6]，現將原因不明的RSA稱之為不明原因復發性流產（URSA）。近年來，隨著生殖醫學尤其是免疫學的不斷發展，生殖免疫學治療技術的提高， 發現許多不明原因導致的反復流產與免疫因素密切相關。文獻指出[7]，RSA患者的BA陽性率極低，而研究發現給予患者主動免疫治療可取得理想的臨床療效，可以有效提高患者的受孕率。臨床認為主動免疫治療可以以配偶或健康第三方淋巴細胞作為治療的免疫因素，達到理想的療效。目前，解決患者不明原因復發性流產問題，已經成為臨床高度重視的課題。該研究以2015 年4 月—2017 年11 月該院收治的79例河源地區BA陰性的URSA患者為例，對患者進行淋巴細胞主動免疫治療，探討其臨床療效，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為方便選取在該院婦科門診或婦保科就診符合復發流產診斷的患者79例， 選取的患者均為封閉抗體陰性，平均年齡（29.04±4.10）歲，最小22歲，最大40歲，流產次數2～5次，平均2.25 次，治療前所有患者及家屬簽訂與治療相關的知情書，研究對象需符合以下條件： ①患者歷史流產次數≥2次；② 排除支、衣原體生殖道感染癥狀；③通過測定激素六項等排除內分泌疾病；④患者雙方染色體核型無異常；⑤無生殖器畸形及其他先天性免疫系統病變等；⑥女方自身免疫性抗體檢查無異常[8]。

1.2 方法

1.2.1 封閉抗體（BA）檢測 檢測方法采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA），采用美國OneLambda公司生產[4]的試劑盒。抽取患者外周血2～3 mL，3 000 r/min離心分離出血清備用，按說明書操作步驟進行實驗。

1.2.2 淋巴細胞主動免疫治療方法 抽取丈夫或第三者（需排除血清HIV、梅毒、甲肝、丙肝、乙肝等傳染病）外周血15～20 mL（肝素抗凝），淋巴細胞提取過程必須在無菌條件下操作，為保證提取質量，對提取后的細胞使用生理鹽水反復沖洗3次，調至細胞懸液量1.8 mL，采用皮內多點注射方法，在患者上臂內側注射六個點，左右各3個點，每周進行免疫治療一次，每個療程4次，孕前每次間隔3周，1個療程完成后2周復查BA，如果BA轉陽，需在半年內盡早懷孕，否則需進行加強治療，間隔4～6周，直到成功受孕，懷孕后繼續每2周1次，直至14周左右；仍為陰性患者則進行第2個療程，隨后復查[9]。

1.2.3 觀察指標 患者經淋巴細胞主動免疫治療后，分析BA轉陽率、再次妊娠流產情況等，經治療后超聲檢查提示妊娠維持至14 周以上即判為妊娠成功。

1.3 統計方法

采用SPSS 19.0統計學軟件分析數據，該次實驗研究數據組間比較采用χ2檢驗，P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 免疫治療后BA變化

接受免疫治療且BA均為陰性的79例URSA患者，經治療1個療程后，BA轉陽率為83.54%（66/79），經2個療程治療后BA陽性率為91.14%（72/79），與治療前比較差異有統計學意義（χ2=12.07、5.38，P<0.01）。見表1。

2.2 免疫治療對URSA患者懷孕機會的影響

免疫治療后，BA轉陽性患者中，妊娠率為59.72%（43/72），經治療后BA仍為陰性的患者中，妊娠率57.14%（4/7），兩組比較差異無統計學意義（χ2=0.07，P>0.05）。

2.3 免疫治療后的臨床研究分析

經治療后BA轉為陽性并已懷孕的患者中，接受孕后加強免疫治療為研究組，共30例，其中妊娠成功90.00%（27/30），不成功妊娠10.00%（3/30），未接受孕后加強免疫治療為對照組，共13例，其中妊娠成功46.15%（6/13），不成功妊娠53.85%（7/13），兩組比較差異有有統計學意義（χ2=13.36，P<0.01）。見表2。

3 討論

隨著科技的發展， 生活水平的提高， 妊娠生育越來越受到大家的關注， 妊娠期流產是不可忽視的問題， 其中復發性流產的發病率約為4%， 這類疾病超過一半的發病機制與免疫因素有關[10-11]。現代生殖免疫學認為，妊娠的過程類似于半同種移植[12]，宮內胚胎移植物的正常維持，既需要母體自身正常免疫功能，又需要其他免疫調節的協同作用，如封閉抗體（BA）特異性的封閉效應。適齡生育婦女體內都存在一定水平的BA， 妊娠時來自父母雙方的白細胞抗原（HLA） 相互排斥， 父源性HLA 抗原屬于外來物，促進母體免疫系統發生應答，促進封閉因子釋放；因子與人體的滋養細胞結合，或與淋巴細胞表面的抗原結合，進而截斷了母與子之間的免疫識別及免疫反應[13-14]，減少免疫排斥反應， 這樣能增加胚胎的成活率， 降低流產概率。關于RSA的很多研究提出，RSA的發生率與母體BA水平存在直接關聯，且BA水平與流產次數相關，流產次數越多，人體內的BA水平就越低[15]。

河源地區免疫治療的79 例URSA患者中，治療前均為陰性，經一兩個療程治療后，BA陽性率分別為83.54%、91.14%，與治療前比較均差異有統計學意義（P<0.01）。結果提示淋巴細胞主動免疫治療對提高患者體內BA水平有積極作用。這一研究結果與國內相關學者研究相一致[16]，其2個療程治療后BA陽性率89.63%，與該次研究結果相近；經治療后BA成功轉為陽性的72例患者中，懷孕率為59.72%；經治療后BA仍為陰性的7例患者中，懷孕率57.14%，兩組比較差異無統計學意義（P>0.05），反應出BA陽性與否對河源地區URSA患者懷孕的機會并無太大影響。經治療后BA轉為陽性并已懷孕的患者中，接受孕后加強免疫治療設為研究組，共30例，其中27例妊娠成功，3例再次結局不良，成功妊娠率為90.00%；未接受孕后加強免疫治療設為對照組，共13例，其中妊娠成功6例，7例再次結局不良，成功妊娠率為46.15%，兩組比較差異有統計學意義（P<0.05），表明河源地區URSA患者經淋巴細胞主動免疫治療BA轉陽后，再次妊娠后須做加強治療，增加母體內BA，形成免疫耐受，從而保護胎兒，因此顯著提高了再次妊娠成功率。

綜上所述， 在河源地區，對于BA陰性不明原因復發性流產患者，應及時利用丈夫或第三者血清中淋巴細胞主動免疫療法治療， 提高BA陽性率，并在其再次妊娠后需積極進行加強治療，有效提高再次妊娠成功率。因此，淋巴細胞主動免疫治療法簡單易行，可有效提高河源地區不明原因復發性流產患者的成功受孕率，具有積極的推廣價值，且治療周期短、免疫反應強、減少經濟負擔且患者容易接受，可以在臨床上長期發展。對于經淋巴細胞主動免疫治療后BA仍為陰性或轉陽后受孕率未見顯著提高，但孕后繼續進行免疫治療的成功分娩的概率明顯提高。如存在其他未知原因，需要繼續進行更深入的研究分析。

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（收稿日期：2018-02-06）