系統(tǒng)性硬化癥纖維化治療新靶點(diǎn)研究

孫杰 李洋

摘 要：系統(tǒng)性硬化癥是一種以局限性或彌漫性皮膚增厚和纖維化為主要特征，可引起多系統(tǒng)損害的結(jié)締組織病。纖維化作為系統(tǒng)性硬化癥患者主要的死亡原因，每年可造成巨大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)影響。近年來對(duì)系統(tǒng)性硬化癥纖維化治療新靶點(diǎn)的研究已成為一個(gè)新熱點(diǎn)，本文主要圍繞系統(tǒng)性硬化癥纖維化發(fā)生的病理生理學(xué)基礎(chǔ)和治療新靶點(diǎn)這兩方面加以闡述。

關(guān)鍵詞：系統(tǒng)性硬化癥；纖維化；靶點(diǎn)

中圖分類號(hào)：R593.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.09.018

文章編號(hào)：1006-1959（2018）09-0056-03

Abstract：Systemic sclerosis is a connective tissue disease that is characterized by localized or diffuse skin thickening and fibrosis that can cause multiple systemic damage.Fibrosis，the leading cause of death in patients with systemic sclerosis，can cause significant socio-economic impact each year.In recent years，the study of new targets for the treatment of systemic sclerosis fibrosis has become a new hot spot.This article focuses on the pathophysiology of systemic sclerosis fibrosis and the treatment of new targets in two aspects.

Key words：Systemic sclerosis；Fibrosis；Target

系統(tǒng)性硬化癥（systemic sclerosis，SSc），也可稱為硬皮病，是一種以局限性或彌漫性皮膚增厚和纖維化為主要特征的，可引起多系統(tǒng)損害的結(jié)締組織病。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，SSc患者的死亡率明顯高于一般人群，其五年生存率為74.9%，10年生存率為62.5%[1]。纖維化作為系統(tǒng)性硬化癥常見的并發(fā)癥，常累及肺臟、皮膚等組織，給SSc患者的生活質(zhì)量造成了巨大的影響[2]。然而到目前為止尚沒有根治硬皮病纖維化的治療方案出現(xiàn)，近年來相關(guān)系統(tǒng)性硬化癥纖維化治療新靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)可能會(huì)使上述上述問題得到解決，本文主要圍繞系統(tǒng)性硬化癥纖維化發(fā)生的病理生理學(xué)基礎(chǔ)和治療新靶點(diǎn)這兩方面加以闡述。因此如何積極有效地抗纖維化治療具有重大的意義，本文主要就目前硬皮病纖維化的病理生理學(xué)基礎(chǔ)和靶點(diǎn)治療新進(jìn)展這兩方面加以闡述。

1纖維化發(fā)生的病理生理學(xué)基礎(chǔ)

肌成纖維細(xì)胞作為纖維化形成的主要參與細(xì)胞，也是膠原的主要生產(chǎn)者，其在機(jī)體創(chuàng)傷修復(fù)過程中起著連接受損組織的作用。隨著修復(fù)的進(jìn)行，肌成纖維細(xì)胞和膠原含量也逐步下降，但在纖維化疾病（如系統(tǒng)性硬化癥）中，肌成纖維細(xì)胞可持續(xù)分泌膠原，導(dǎo)致皮膚、肺臟等組織纖維化的形成[3，4]。根據(jù)相關(guān)研究顯示以下幾種細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞[5-7]：其中多數(shù)肌成纖維細(xì)胞是由間質(zhì)固有成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來；其次是由間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來；剩余部分則主要由內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞和周細(xì)胞等轉(zhuǎn)化而來。其中內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞等細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化并不是一蹴而就的，中間需要先轉(zhuǎn)化為間充質(zhì)細(xì)胞，繼而轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞細(xì)胞，轉(zhuǎn)化途徑依賴轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）參與[8]。

2系統(tǒng)性硬化癥纖維化治療新靶點(diǎn)

據(jù)報(bào)道，相關(guān)科研人員最近發(fā)現(xiàn)數(shù)種與纖維化的發(fā)生發(fā)展存在明顯相關(guān)性的靶點(diǎn)，包括共刺激分子OX40/OX40L、信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3 ，STAT3）、細(xì)胞因子信號(hào)抑制物（supressor of cytokine signaling，SOCS3）、DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA （cytosine-5）-methyltransferase 3A，DNMT3A）、朋友白血病整合1轉(zhuǎn)錄因子（Friend leukemia integration 1 transcription factor，F(xiàn)li1）等。根據(jù)最新的研究結(jié)果顯示通過對(duì)上靶點(diǎn)的研究，并將其應(yīng)用于臨床，可能會(huì)導(dǎo)致在未來某一天纖維化這一臨床表現(xiàn)將受到明顯控制，甚至是得到根治。

2.1共刺激分子OX40/OX40L OX40/OX40L軸是機(jī)體免疫應(yīng)答中的一對(duì)重要的協(xié)同刺激分子，可參與T細(xì)胞的活化、增殖、遷移，以及生發(fā)中心的形成和樹突狀細(xì)胞的分化、成熟，介導(dǎo)腫瘤免疫應(yīng)答，并在自身免疫疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[9]。Muriel Elhai[10]等人研究發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)性硬化癥患者的血清OX40L水平較正常人明顯升高，彌漫性SSc患者的血清OX40L較局限性SSc水平升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，血清OX40L高水平的SSc患者的長(zhǎng)期生存率較健康對(duì)照組有所下降。系統(tǒng)性硬化癥患者的纖維化皮膚鏡下組織學(xué)觀察可見，OX40L在SSc患者的B細(xì)胞、T細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞中過度表達(dá)，其與CD3、CD22、CD90、α-SMA水平相同步；此外行定量分析研究發(fā)現(xiàn)彌漫性SSc患者B細(xì)胞、T細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞中OX40L的染色強(qiáng)度高于局限性SSc，更高于健康對(duì)照組[10]。在實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，OX40L缺陷的小鼠可免受博來霉素誘導(dǎo)的真皮纖維化，OX40L-小鼠與OX40L+小鼠相比其真皮厚度、膠原含量明顯減少，并且當(dāng)給予其OX40L抑制性中和抗體后可發(fā)現(xiàn)小鼠的真皮厚度明顯變薄[10]。由此可以推斷，若阻斷OX40/OX40L軸則可能會(huì)起到預(yù)防系統(tǒng)性硬化癥纖維化發(fā)生以及控制系統(tǒng)性硬化癥纖維化病情進(jìn)展的效果。

2.2信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3） STAT3是STAT蛋白家族的一員，可被不同的細(xì)胞因子受體激活，在細(xì)胞內(nèi)起到信號(hào)傳遞載體的作用，從而參與細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞凋亡等多種細(xì)胞過程，并且其與多種腫瘤疾病和自身免疫性疾病有關(guān)[11-13]。STAT3的沉默可以減少系統(tǒng)性硬化癥患者纖維化的發(fā)病，并改善皮膚纖維化的嚴(yán)重程度。Debomita Chakraborty， Barbora ？觢umová等人研究發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)性硬化癥患者皮膚中活化的STAT3（P-STAT3）和含有P-STAT3的成纖維細(xì)胞數(shù)目較健康對(duì)照組明顯增多，并且研究發(fā)現(xiàn)JAK/JNK/c-ABL/SRC激酶等信號(hào)通路可共同刺激STAT3信號(hào)的活化，促使成纖維細(xì)胞表達(dá)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β），從而導(dǎo)致SSc患者纖維化的發(fā)生與進(jìn)展[14]。在實(shí)驗(yàn)研究中，他們還發(fā)現(xiàn)當(dāng)特異性敲除成纖維細(xì)胞STAT3基因時(shí)或給予JAK/JNK/c-ABL/SRC等信號(hào)通路的抑制劑治療時(shí)，SSc小鼠的病灶纖維化皮膚的真皮厚度較之前明顯變薄，膠原以及P-STAT3的含量較之前明顯減少[14]。通過對(duì)上述研究結(jié)果的分析可以得出如下結(jié)論，對(duì)STAT3信號(hào)活化抑制劑的研究，可能會(huì)為研制新的纖維化靶向治療藥物提供新的方向。

2.3細(xì)胞因子信號(hào)抑制物（SOCS3） SOCS3是一種由STAT誘導(dǎo)的STAT抑制劑，受多種細(xì)胞因子調(diào)控，如白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）等，抑制絡(luò)氨酸蛋白激酶-信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子（JAK/STAT）信號(hào)系統(tǒng)，參與蛋白激酶B（AKT）的磷酸化從而參與腫瘤相關(guān)性疾病和自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展[15，16]。SOCS3基因的缺失可加重皮膚纖維化的嚴(yán)重程度，增加硬皮病患者纖維化的發(fā)病率。研究發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性硬化癥患者成纖維細(xì)胞含有的SOCS3水平較正常人下降，并且SOCS3缺失可導(dǎo)致皮膚厚度和膠原含量的增加。另外研究顯示TGF-β誘導(dǎo)的啟動(dòng)子纖維化可下調(diào)SOCS3表達(dá)，該途徑可被DNA甲基化抑制劑所阻斷[17]。由此可見，DNA甲基化抑制劑可以上調(diào)SOCS3表達(dá)，抑制TGF-β介導(dǎo)的纖維化，也為系統(tǒng)性硬化癥纖維化的治療提供了一個(gè)備選方案。

2.4DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMT3A） DNMT3A通過負(fù)責(zé)（de novo）DNA的甲基化，確保遺傳表觀遺傳模式復(fù)制的準(zhǔn)確性，參與細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、異染色質(zhì)形成和基因組穩(wěn)定性等多種過程[18]。相關(guān)文獻(xiàn)顯示，DNMT3A可增加纖維化的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，其表達(dá)受TGF-β調(diào)控，即TGF-β可上調(diào)DNMT3A的表達(dá)[19]。另有研究顯示控制成纖維細(xì)胞的DNMT3A活性或給予DNA甲基化抑制劑，可降低纖維化的發(fā)病率，改善纖維化的嚴(yán)重程度[20，21]。該現(xiàn)象再次證明抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性可以用于治療系統(tǒng)性硬化癥纖維化。

2.5朋友白血病整合1轉(zhuǎn)錄因子（Fli1） Fli1也被稱為轉(zhuǎn)錄因子ERGB，是一種由原癌基因Fli1基因編碼的蛋白質(zhì)。Fli1缺失可以增加膠原蛋白含量，導(dǎo)致系統(tǒng)性硬化癥纖維化的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性硬化癥患者真皮組織中Fli1的含量較健康對(duì)照組明顯減少，且彌漫性SSc患者的真皮Fli1的含量較局限性SSc減少。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)Fli1缺失可以對(duì)正常人角質(zhì)形成細(xì)胞的蛋白表達(dá)譜產(chǎn)生明顯的影響，增加角蛋白6（Keratin 6，K6）、K16、IL1A、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）和鋅指蛋白（SNAI1）等蛋白的表達(dá)，后者均為SSc角化細(xì)胞的表型改變。另外研究還發(fā)現(xiàn)K14表達(dá)的小鼠在敲除Fli1基因后可自行出現(xiàn)真皮厚度、膠原和抗平滑肌抗體（α-SMA）含量的增加，以及ANA、IL-4、IL-6、IL-17和IFN-γ水平的升高[22]。上述研究結(jié)果也給未來SSc纖維化的治療提供了一個(gè)新的思路，即通過增加系統(tǒng)性硬化癥患者體內(nèi)Fli1含量，以抑制纖維化進(jìn)程。

3總結(jié)

盡管硬皮病纖維化的治療作為一個(gè)世界性難題，但OX40/OX40L、STAT3、SOCS3、DNMT3A、Fli1等新靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)有可能在未來對(duì)系統(tǒng)性硬化癥纖維化治療產(chǎn)生巨大的影響。通過阻斷OX40/OX40L軸、阻斷STAT3表達(dá)、促進(jìn)SOCS3表達(dá)、抑制DNMT3A活性以及增加Fli1含量可以預(yù)防系統(tǒng)性硬化癥纖維化的發(fā)生，控制系統(tǒng)性硬化癥纖維化病情的進(jìn)展。

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收稿日期：2018-3-16：修回日期：2018-3-21

編輯/李樺