乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中PHH3和Ki—67的表達(dá)及其臨床意義探討

黃江生　鄧偉　楊春梅　王平

[摘要] 目的 探究乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中PHH3和Ki-67的表達(dá)及其臨床意義。方法 方便選取該院2014年11月—2017年11月收治的31例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者為研究對(duì)象，為研究組；并將同期收治的另外31名正常乳腺組織者設(shè)為對(duì)照組，對(duì)其一般資料進(jìn)行回顧分析。結(jié)果 研究組的PHH3陽性表達(dá)率為70.97%，Ki-67陽性表達(dá)率為61.29%，明顯高于對(duì)照組的9.68%、6.45%（P<0.05）；且研究組的PHH3、Ki-67表達(dá)跟淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤組織學(xué)分級(jí)相關(guān)，預(yù)后效果較差。結(jié)論 PHH3、Ki-67表達(dá)跟乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，可為臨床治療及預(yù)后效果評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織；PHH3；Ki-67；表達(dá)；臨床意義

[中圖分類號(hào)] R739 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）04（c）-0040-03

Study on Expressions of PHH3 and Ki-67 and Clinical Significance in the Breast Infiltrating Ductal Carcinoma Tissues

HUANG Jiang-sheng， DENG Wei， YANG Chun-mei， WANG Ping

Department of Pathology， Kunshan Hospital of TCM Affiliated to Nanjing University of TCM， Kunshan， Jiangsu Province， 215300 China

[Abstract] Objective To study the expressions of PHH3 and Ki-67 and clinical significance in the breast infiltrating ductal carcinoma tissues. Methods 31 cases of patients with breast infiltrating ductal carcinoma tissues admitted and treated in our hospital from November 2014 to November 2017 were selected as the research group， while 31 cases of patients with normal breast tissues at the same period were selected as the control group， and the general data were analyzed. Results The PHH3 positive expression rate and Ki-67 positive expression rate in the research group were obviously higher than those in the control group（70.97%， 61.29% vs 9.68%， 6.45%）（P<0.05）， and the expressions of PHH3 and Ki-67 in the research group were related to the lymphatic metastasis， TNM staging and histological grade of tumor， and the prognosis effect is worse. Conclusion The expressions of PHH3 and Ki-67 are related to the occurrence and development of breast infiltrating ductal carcinoma tissues， which can provide theoretical basis for the clinical treatment and evaluation of prognosis effect.

[Key words] Breast infiltrating ductal carcinoma tissues； PHH3； Ki-67； Expression； Clinical significance

乳腺癌為臨床上常見的婦科惡性腫瘤，近些年來，該病癥發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì)。而浸潤性導(dǎo)管癌為乳腺癌癥中較為常見的一種組織學(xué)類型，約占乳腺癌的70%。從浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生機(jī)制看，主要跟腫瘤細(xì)胞的無線增殖、自主分裂相關(guān)，所以，需要對(duì)關(guān)鍵性指標(biāo)進(jìn)行有效測(cè)量，從而更好的分析患者的病情發(fā)展?fàn)顩r，并為診治、預(yù)后評(píng)定提供可靠依據(jù)[1]。該文主要研究乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中PHH3和Ki-67的表達(dá)及其臨床意義，并將該院2014年11月—2017年11月收治的31例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者作為該次研究對(duì)象，并將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

方便選取該院收治的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者31例納入該次研究，設(shè)為研究組。所有患者均行手術(shù)切除治療，且經(jīng)過倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均簽署知情同意書。其年齡在46～80歲，平均年齡為（52.3±3.06）歲；腫瘤直徑在1.6～6.2 cm，平均直徑為（3.1±0.12）cm；依據(jù)組織學(xué)分級(jí)，I級(jí)占8例，Ⅱ占13例，Ⅲ級(jí)占10例。合并有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者共有17例。依據(jù)國際抗癌聯(lián)盟（UICC）TNM標(biāo)準(zhǔn)，I期共有14例，Ⅱ期有9例，Ⅲ期有5例，Ⅳ期有3例。另外，將同期收治的31名癌旁正常乳腺組織者設(shè)為對(duì)照組，其年齡在54～79歲，平均年齡為（51.6±3.21）歲，其組織學(xué)結(jié)構(gòu)均正常。所有研究對(duì)象均未在術(shù)前接收過放療、化療、抗雄激素等治療。兩組研究對(duì)象在性別、年齡等一般資料上比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

將兔抗人多克隆抗體RAB-0693型作為免疫組化試劑PHH3；用鼠抗人單克隆抗體MAB-0672型為Ki-67試劑。采用免疫組化MaxVision兩步法，對(duì)研究組、對(duì)照組乳腺組織中的PHH3、Ki-67表達(dá)予以檢測(cè)，并對(duì)研究組的病理特征、預(yù)后關(guān)系進(jìn)行分析。所有標(biāo)本均采用10%的中性福爾馬林予以固定，且用石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度為4 μm。在操作過程中，需要按照試劑盒說明書的相關(guān)步驟進(jìn)行，并已知陽性切片為陽性對(duì)照，用PBS代替一抗為陰性對(duì)照。

1.3 效果評(píng)定

記錄兩組乳腺組織內(nèi)的PHH3、Ki-67表達(dá)，兩者陽性表達(dá)皆定位在細(xì)胞胞核，其中，當(dāng)細(xì)胞核內(nèi)存在黃色顆粒沉淀物時(shí)，可視為陽性細(xì)胞。在判定時(shí)，要使用高倍鏡對(duì)計(jì)數(shù)10個(gè)視野內(nèi)的陽性細(xì)胞占比予以記錄，PHH3的陽性細(xì)胞≥10%表示高表達(dá)，陽性細(xì)胞<10%表示低表達(dá)；Ki-67的陽性細(xì)胞≥20%為高表達(dá)，反之則為低表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

該研究涉及到的數(shù)據(jù)均用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件予以處理，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 組間乳腺組織表達(dá)水平比較

對(duì)照組PHH3高表達(dá)有3例，陽性率為9.68%，Ki-67高表達(dá)有2例，陽性率為6.45%；而研究組的PHH3高表達(dá)有22例，陽性率為70.97%，Ki-67高表達(dá)有19例，陽性率為61.29%；經(jīng)比價(jià)發(fā)現(xiàn)，研究組的PHH3、Ki-67陽性表達(dá)明顯高于對(duì)照組，且在細(xì)胞核內(nèi)均呈黃色（χ2=24.196 8、20.810 7，P<0.05）。

2.2 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌病理特征與PHH3、Ki-67表達(dá)關(guān)系

通過對(duì)研究組患者的PHH3、Ki-67表達(dá)進(jìn)一步研究后發(fā)現(xiàn)，其表達(dá)水平跟淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤組織學(xué)分級(jí)相關(guān)（P<0.05）；但與腫瘤直徑、患者年齡無關(guān)，見表1。

2.3 PHH3、Ki-67表達(dá)與預(yù)后關(guān)系

在31例研究組患者中，所有患者通過治療后2年隨訪，發(fā)現(xiàn)有6例患者死亡，且患者均為PHH3、Ki-67高表達(dá)，說明 PHH3、Ki-67表達(dá)水平，跟乳腺浸潤性導(dǎo)管癌預(yù)后效果有密切聯(lián)系，其陽性表達(dá)率越高，則預(yù)后效果越差。

3 討論

乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生、發(fā)展與多種因素相關(guān)，且包含了不同的可能機(jī)制，而不同的機(jī)制又會(huì)直接或是間接的對(duì)正常細(xì)胞周期造成影響。產(chǎn)生惡性腫瘤，主要是由于腫瘤細(xì)胞無限制的增殖、自主分裂。因此，對(duì)其瘤細(xì)胞的具體增殖狀況進(jìn)行有效測(cè)量，可以更好的協(xié)助診斷，并對(duì)預(yù)后效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而為臨床治療提供可靠的依據(jù)[2-4]。

Ki-67為增殖細(xì)胞核抗原，其蛋白主要由相對(duì)分子質(zhì)量為3.58×104及3.19×104的多肽鏈構(gòu)成，基因位于10號(hào)染色體上，一般在G1晚期存在表達(dá)，并在S期、G2期表達(dá)逐漸增多，到M期時(shí)達(dá)到頂峰。Ki-67不僅在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中有著較高的表達(dá)，在其他多種惡性腫瘤中均有著較高的表達(dá)，可以有效反映出細(xì)胞增殖活性，并用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的增殖狀況，對(duì)其預(yù)后效果予以評(píng)價(jià)[5]。Ki-67表達(dá)與增殖細(xì)胞相關(guān)，且廣泛存在于細(xì)胞核基質(zhì)核抗原內(nèi)，不僅可以在靜止期細(xì)胞內(nèi)檢出，且可能在增殖細(xì)胞相關(guān)周期活動(dòng)期內(nèi)檢出[6-7]。在該研究中，研究組患者的組織內(nèi)Ki-67表達(dá)水平，明顯要高于對(duì)照組，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。另外，在該組研究中，研究組患者的Ki-67高表達(dá)，主要與高組織學(xué)分級(jí)、高TNM分期以及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，但與患者的年齡以及腫瘤直徑無明顯的關(guān)系（P<0.05）。且其Ki-67表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、高組織學(xué)分級(jí)、高TNM分期呈正比例關(guān)系。

磷酸化組蛋白H3（PHH3）為最新發(fā)現(xiàn)的5個(gè)核心組蛋白之一，在真核細(xì)胞內(nèi)跟其它的組蛋白一同組成了染色質(zhì)中關(guān)鍵性的蛋白組分。PHH3表達(dá)通常可在核分裂期間達(dá)到最大值，為核分裂特異性標(biāo)志物之一，是公認(rèn)的腫瘤細(xì)胞核分裂象。在該研究中，發(fā)現(xiàn)研究組患者的PHH3高表達(dá)率較對(duì)照組明顯增高，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明PHH3表達(dá)狀況跟乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生、進(jìn)展等有密切的關(guān)聯(lián)，且其表達(dá)跟組織學(xué)分級(jí)為正比例關(guān)系。也就是說，患者的組織學(xué)分級(jí)越高，則其陽性表達(dá)率也越高。同時(shí)，從研究結(jié)果可看出，PHH3表達(dá)，跟淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、高TNM分期等相關(guān)，與王文超等[8]研究結(jié)果相符（P<0.05）。因此，可通過檢測(cè)PHH3表達(dá)，來對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、預(yù)后治療效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。而對(duì)PHH3在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織內(nèi)的表達(dá)進(jìn)行抑制，極有可能對(duì)該病癥的進(jìn)展、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處浸潤轉(zhuǎn)移等產(chǎn)生良好的阻礙作用，能夠在一定程度上提升預(yù)后效果，并提高患者的生存率，可以為新治療方案的研制提供新的思路。

綜上所述，PHH3、Ki-67表達(dá)跟乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生與進(jìn)展有密切的聯(lián)系，是其主要蛋白之一，結(jié)合PHH3、Ki-67在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織內(nèi)的表達(dá)，可以對(duì)其病理分級(jí)、預(yù)后效果進(jìn)行有效判斷，并為臨床治療提供可靠依據(jù)，有利于合理治療方案的制定。

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（收稿日期：2018-01-22）