血小板參數在判斷慢性丙型肝炎RNA水平中的價值

張 夏，杜丹丹，翟志敏，郭進京

持續的丙肝病毒(hepatitis C virus ，HCV)感染引起的丙型肝炎易導致肝臟纖維化，進而發展成肝硬化，約20%患者轉化為肝癌(hepatocellular carcinoma ，HCC)[1]。肝炎患者有較高的血小板減少的發生率，由于肝炎病毒感染和血小板的減少密切相關，美國血液學會免疫性血小板減少性紫癜診療指南推薦長期血小板減少的的患者，應常規檢測肝炎病毒[2]。該研究旨在分析丙型肝炎患者RNA的載量和血小板相關參數的關系，為臨床治療方案的選擇、病情療效監測提供一定的參考依據。

1 材料與方法

1.1病例資料回顧性分析2014年1月～2016年12月阜陽市人民醫院住院期間檢測出丙肝抗體陽性并做丙肝RNA檢測的患者78例。其中男32例，女46例，年齡21～82歲，中位年齡54歲，排除能引起三系減低的血液系統疾病及病例資料不完全的患者。按照參考文獻[3]HCV-RNA載量高低分為三組：<500 IU/ml定義為HCV-RNA陰性組，500～105IU/ml定義為低載量組，≥105IU/ml為高載量組，低載量組和高載量組定義為HCV-RNA陽性組。

表1 HCV-RNA陰性組和HCV-RNA陽性組各血小板參數的比較

表2 低載量HCV-RNA組和高載量HCV-RNA組各血小板參數的比較

1.2試劑和儀器血小板計數(platelet count，PLT)，血小板分布寬度(platelet distribution width，PDW)，平均血小板體積(mean platelet volume，MPV)及血小板壓積(platelet volume，PCT)由BC-6800血細胞分析儀測試，儀器及配套試劑均購自中國深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；HCV-RNA載量由LineGeneⅠ基因擴增儀檢測，其配套檢測試劑盒購自中山大學達安基因股份有限公司。

1.3方法以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝用于血小板參數檢測，HCV-RNA載量采用RT-PCR法，嚴格按照實驗室標準操作程序(SOP)規范操作完成各參數測試。

2 結果

2.1HCV-RNA陰性組和HCV-RNA陽性組血小板參數的比較HCV-RNA陰性組和HCV-RNA陽性組相比年齡差異無統計學意義，有可比性。與HCV-RNA陰性組比較，HCV-RNA陽性組PLT和PCT水平明顯減低，PDW和MPV水平明顯增高(P<0.01)，見表1。

2.2血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數判斷HCV-RNA陰性情況由于PDW、MPV和HCV-RNA陰性呈負相關性，故在做ROC曲線時，取其倒數。PLT判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線下面積(area under curve，AUC)為0.903(95%CI：0.837～0.970，P<0.001)；PDW判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線的AUC為0.847(95%CI：0.763～0.913，P<0.001)；MPV判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線的AUC為0.888(95%CI：0.817～0.960，P<0.001)；PCT判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線的AUC為0.821(95%CI：0.792～0.913，P<0.001)。見圖1。

圖1 PLT、PDW、MPV、PCT判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線

圖2 PLT、PDW、MPV、PCT和HCV-RNA載量的線性分析

2.3HCV-RNA陽性組中HCV-RNA低載量組和HCV-RNA高載量組血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數的比較低HCV-RNA載量組和高HCV-RNA載量組相比年齡差異無統計學意義，有可比性。與高HCV-RNA載量比較，低HCV-RNA載量組有著更高的PLT和PCT水平，差異有統計學意義(P=0.001,P=0.005)，同時低HCV-RNA載量組有著更低的PDW和MPV水平，差異有統計學意義(P=0.028,P=0.047)，見表2。

2.4HCV-RNA載量和血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數相關性分析以HCV-RNA載量科學計數法數量級為自變量，血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數分別為因變量，在53例HCV-RNA陽性的患者中，與HCV-RNA載量呈正相關且有統計學意義的參數為MPV(r=0.306,P=0.026)，呈負相關且有統計學意義的指標有：PLT(r=0.493，P<0.001)、PCT(r=0.444，P=0.001)。PDW和HCV-RNA載量相關性分析無統計學意義(r=0.258,P=0.063)。見圖2。

3 討論

血小板是血細胞中最小的細胞，其大小數量及分布寬度與骨髓中巨核細胞的增生速度、代謝情況、促血小板生成素等因素有關[4]。血小板相關參數PLT、PDW、MPV、PCT可反應血小板的生成及功能狀態。PDW反應血小板體積大小的離散程度。MPV即血小板平均體積，MPV增大，提示血小板內致密顆粒增多，是巨核細胞增生及血小板活化的標志，可輔助鑒別血小板減低的原因及評估骨髓造血功能；其增高和骨髓受到抑制、血小板破壞過多、機體高代償狀態有關，與PLT呈負相關。PCT可間接反應血小板活性物質及所含顆粒的多寡，與PLT呈正相關性[5]。丙肝病毒感染除引起肝臟的損害，也能引起肝外組織的損傷[6]，肝炎患者有較高的血小板減低的發生率，研究[7]表明HCV比HBV更易發生血小板的減低。其引起血小板減低的機制可能如下：HCV感染可導致全身免疫系統的紊亂，產生自身抗體導致血小板的破壞[8]；慢性HCV感染患者往往伴有不同程度的脾功能亢進，尤其是發生肝硬化時，脾功能亢進時能分泌某些激素，影響骨髓的造血同時加速血細胞的破壞[9]；血小板生成素由主要由肝細胞合成，HCV感染所致的肝功能受損會導致血小板生成素水平的下降，進一步加速血小板的減少和影響巨核細胞的分化[10]；此外，丙肝病毒對骨髓的抑制作用和血管內皮功能障礙也可導致血小板減少[11]。

丙肝病毒感染主要依賴血清學抗體的檢測，但由于“窗口期”使得抗體檢測有一定的假陰性的可能，另一方面丙肝抗體陽性不代表病毒是否復制，而HCV-RNA的檢測是診斷丙肝是否復制的有力證據，其載量的高低和肝功能的損傷程度有一定的相關性。本研究證明PLT和PCT水平的減低、PDW和MPV的增高在判斷HCV-RNA是否陰性的ROC AUC均大于0.5，對HCV-RNA是否復制的判斷有著積極的意義，同時本研究也證實上述4個參數在判斷HCV-RNA載量的高低中也有一定的預測價值，與HCV-RNA載量的線性分析提示除PDW外，PLT、MPV、PCT水平均和HCV-RNA載量的高低相關。血小板參數是血常規中的常規檢測項目，經濟、簡便、易得是其特點，在有些無分子生物學實驗室的地方，血小板4個參數可作為輔助判斷丙肝病毒復制和病毒載量高低。臨床醫師在抗病毒治療的同時動態監測丙肝患者血小板水平及其參數能更有效的判斷病毒復制的嚴重程度，及時為患者制定最佳的治療方案，同時和HCV-RNA載量監測相互補充。