液相色譜-串聯質譜法測定月柿中187種農藥殘留

秦 富，鄧全道，李 湧，黃大新，汪文龍*

(1.廣西出入境檢驗檢疫局 檢驗檢疫技術中心，廣西 南寧 530021；2.桂林出入境檢驗檢疫局，廣西 桂林 541004)

月柿俗稱“柿餅”，是由柿鮮果經剝皮、日曬、脫澀等一系列工藝制成，其肉質棕紅半透明，表皮凝有一層雪白的柿蜜霜。月柿是廣西傳統創匯的名優果品，其肉厚無核、脆嫩香甜、口感上佳，含有豐富的營養物質，深得日本、韓國、東南亞及地中海沿岸各國消費者的喜愛。廣西月柿源產于廣西桂林市平樂縣和恭城縣，產量達30萬噸，年產值超過3.7億元。其中“恭城月柿栽培系統”于2017年被農業部認定為第四批中國重要農業文化遺產[1]。柿樹在生長過程中易受到炭疽病、角斑病、瘡痂病、柿蒂蟲、介殼蟲、粉虱、刺蛾等病蟲害的影響[2-4]。其中，柿樹炭疽病是由膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides )[5-6]引起的可對柿樹及柿果造成毀滅性損傷的侵染性病害，且在柿樹生長的各個時期均較易發生。角斑病和柿蒂蟲的危害次之，在柿樹開花結果過程中容易發生。因此農藥防治是月柿栽培系統中的關鍵環節，最常用的農藥化合物包括甲氰菊酯、代森錳鋅、多菌靈、撲虱靈、噠螨靈、吡蟲啉、苯醚甲環唑、腈菌唑、咪鮮胺、甲基硫菌靈等[2-4]。然而，這些農藥的超量不合理使用不僅會導致柿果中農藥殘留超標而影響出口銷售和食用者的健康，還會對土壤和水體造成污染并引起人和動物急性或慢性中毒。因此，必須對月柿栽培中使用的農藥種類和劑量實行監管，并對月柿中農藥殘留實施風險監測。高通量檢測技術是實施農藥殘留風險監測的重要手段，近年來研究者們建立了高通量檢測生姜、水果、蔬菜和茶葉中數百種農藥殘留的方法[7-10]。但由于月柿經特殊工藝加工后含糖量很高，屬于半干樣品，其前處理方法和基質效應與水果蔬菜樣品均有較大區別。同時上述檢測方法未能覆蓋月柿栽培過程中較常用的農藥化合物。因此，有必要研究建立針對廣西月柿中常用農藥殘留的高通量檢測技術。本研究采用實驗室優化的QuEChERS方法[11]對月柿樣品進行快速前處理，在電噴霧正離子模式(ESI+)下進行動態多反應監測掃描分析，建立了液相色譜-串聯質譜同時檢測廣西月柿中187種農藥殘留的方法，為廣西月柿的種植生產及出口貿易中農藥殘留風險監測提供可靠的技術手段。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260-6410B液相色譜-串聯質譜儀、ZORBAX Eclipse Plus-C18色譜柱(100 mm×2.1 mm，1.8 μm)(美國Agilent公司)；XS204電子天平(瑞士Mettler公司)；GM200刀式混合研磨儀(德國Retsch公司)；SA300多功能振蕩器(日本Yamato公司)；KL512J氮氣濃縮儀(北京康林科技有限公司)；FA25高速組織分散器(德國Fluko公司)；Milli-Q超純水系統(美國Millipore公司)。

農藥混合標準品(100 mg/L，批號分別為LC23289、LC22982、LC22983、LC22984、LC23294、LC22986、LC23292和LC23293，美國Agilent公司)；甲醇、乙腈、甲酸銨(色譜純，美國Tedia公司)，甲酸、無水硫酸鈉、無水硫酸鎂、無水醋酸鈉(分析純，美國Tedia公司)；C18(40～63 μm)、N-丙基乙二胺(PSA，40～63 μm)(德國CNW公司)。

1.2 標準溶液配制

用甲醇將混合標準溶液稀釋10倍，配制成質量濃度為10 mg/L的標準儲備液，置于-20 ℃保存；用乙腈-水(體積比3∶ 2，下同)溶液稀釋，分別配制質量濃度為1、5、10、20、50、100 μg/L的標準工作液。

1.3 樣品處理

1.3.1加水處理將月柿樣品切碎后，用研磨儀均質研磨成細碎的混合試樣，稱取5 g試樣，置于50 mL離心管中，加10 mL超純水，充分混合振搖直至試樣呈乳糜狀。

1.3.2提取向經過加水處理的樣品中加入10 mL 含有1%醋酸的乙腈溶液，勻漿提取1 min；加入4 g無水硫酸鎂和1 g無水醋酸鈉，立即混合振搖30 min；以4 000 r/min離心5 min，移取上層清液2 mL，置于15 mL離心管中，待凈化。

1.3.3凈化分別加入1 g Na2SO4、0.3 g C18和0.2 g PSA，振蕩渦旋30 s，以4 000 r/min離心5 min；重復振蕩渦旋和離心1次；然后移取上清液1 mL，于45 ℃水浴氮吹至干，用1 mL乙腈-水(3∶ 2)溶解殘渣，過0.22 μm有機濾膜后裝瓶待測。

1.4 分析條件

1.4.1液相色譜條件ZORBAX Eclipse Plus-C18色譜柱(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)；柱溫為55 ℃，進樣體積為5 μL；流動相：A為含0.005 mol/L甲酸銨和0.01%甲酸的水溶液,B為含0.005 mol/L甲酸銨和含0.01%甲酸的95%乙腈水溶液；梯度洗脫程序：0～0.5 min，5% B；0.5～18 min，5%～95% B；18～20 min，95% B，流速為0.4 mL/min，后運行時間為4 min。

1.4.2質譜條件采用電噴霧離子源正離子模式(ESI+)，動態多反應監測(DMRM)方式；毛細管電壓為4 000 V；干燥氣溫度為350 ℃，流量為12 L/min；霧化氣壓力為0.34 MPa。

表1 187種農藥的質譜參數、保留時間、基質效應、相關系數、回收率及相對標準偏差Table 1 MS parameters，retention times，matrix effects，correlation coefficients，recoveries and relative standard deviations of 187 pesticides

(續表1)

No.Compound Precursor ionProduct ionCollision energy/VFragmentor/VRT/minME/%r2Recovery/%RSD/%54Ethoprophos(滅線磷)243.1131.0*/173.116/810511.6516.610.996285.5 18 55Ethoxyquin(乙氧基喹啉)218.2174.1*/148.025/3012012.7411.680.995789.3 20 56Etofenprox(醚菊酯)394.2177.1*/359.015/510018.315.260.998883.5 8.4 57Famoxadone(唑菌酮)392.2331.1*/238.112/49013.7714.340.9997116 13 58Fenamidone(咪唑菌酮)312.192.1*/236.120/412011.538.980.9998104 9.1 59Fenamiphos(苯線磷)304.1217.0*/234.020/1512011.4512.700.999898.8 3.0 60Fenarimol(氯苯嘧啶醇)331.0268.0*/81.030/2512011.20-13.110.9975101 16 61Fenazaquin(喹螨醚)307.257.0*/161.120/1512015.96-2.900.998973.7 7.2 62Fenbuconazol(腈苯唑)337.170.0*/125.020/2012012.1017.610.9993116 16 63Fenhexamid(環酰菌胺)302.197.1*/55.130/258011.6718.040.9994108 15 64Fenobucarb(仲丁威)208.195.0*/152.010/58010.64-6.400.998496.1 11 65Fenoxycarb(苯氧威)302.188.0*/116.120/1012012.43-1.500.9992108 8.3 66Fenpyroximate(唑螨酯)422.2366.1*/135.040/1513016.2810.540.999595.6 5.8 67Fenuron(非草隆)165.172.0*/120.015/151205.082.220.999498.2 2.6 68Fipronil(氟蟲腈)454.0436.9*/368.020/49413.158.310.9967115 1569Flonicamid(氟啶蟲酰胺)230.1203.0*/174.015/15704.141.670.9998108 8.1 70Fludioxonil(咯菌腈)266.1229.0*/158.036/48510.81-9.650.998394.0 6.1 71Flufenacet(氟噻草胺)364.1194.1*/152.110/58012.623.030.999199.0 7.3 72Flufenoxuron(氟蟲脲)489.0158.0*/141.015/108015.9114.400.9996106 4.5 73Flumetsulam(唑嘧磺草胺)326.1129.0*/129.030/201205.8816.890.991173.5 3.9 74Flumioxazin(丙炔氟草胺)355.1299.0*/327.025/2510010.901.540.9983104 1675Fluometuron(伏草隆)233.172.0*/160.020/201208.791.030.9999105 7.6 76Fluoxastrobin(氟嘧菌酯)459.1427.1*/188.040/1513012.703.020.9997115 4.0 77Fluquinconazole(喹唑菌酮)376.0307.0*/349.020/2510011.6713.860.9998116 13 78Flusilazole(氟硅唑)316.1247.1*/165.020/1512012.07-1.350.9993102 3.3 79Flutriafol(粉唑醇)302.170.0*/123.015/201209.0015.690.9995107 6.7 80Forchlorfenuron(氯吡脲)248.1129.1*/155.112/12958.810.710.99821013.8 81Fosthiazate(噻唑膦)284.1104.0*/228.020/5809.03-0.420.9995107 5.2 82Fuberidazole(麥穗寧)185.1157.1*/156.030/251205.593.690.9987100 2.6 83Furalaxyl(呋霜靈)302.1242.1*/95.027/1011010.902.980.9998107 4.2 84Furathiocarb(呋線威)383.2195.1*/252.115/1012015.406.890.9993100 5.2 85Hexaconazole(己唑醇)314.170.0*/159.020/1012012.205.420.9997103 12 86Hexythiazox(噻螨酮)353.1228.0*/168.120/1012015.882.980.999491.8 5.1 87Hydramethylnon(氟蟻腙)495.2323.1*/151.050/2822013.976.960.998485.0 6.2 88Imazalil(抑霉唑)297.1159.0*/255.020/201609.172.680.999598.4 5.6 89Imidacloprid(吡蟲啉)256.1209.1*/175.010/10805.287.650.99991022.7 90Indoxacarb(茚蟲威)528.1203.0*/150.016/3612014.725.100.9993101 12 91Ipconazole(環戊唑醇)334.270.1*/125.022/4511013.189.530.9994106 7.0 92Iprovalicarb(異丙菌威)321.2119.1*/203.120/58011.514.700.9998112 2.0 93Isoprothiolane(稻瘟靈)291.1189.0*/231.020/58012.1411.850.9989102 2.9 94Isoxaben(異草胺)333.2165.0*/150.050/1512012.057.720.9996107 2.8 95Kresoxim-methyl(醚菌酯)314.1267.0*/206.15/58013.246.890.9989109 17 96Lenacil(環草定)235.1153.1*/136.015/10808.11-1.050.999698.3 2.9 97Linuron(利谷隆)249.0160.0*/182.020/1512010.72-0.390.998394.5 12 98Lufenuron(虱螨脲)511.0158.0*/328.116/1213815.45-2.520.999710312 99Malaoxon(馬拉氧磷)315.199.0*/127.020/10808.394.400.9994108 3.6 100Malathion(馬拉硫磷)331.0126.9*/99.010/58012.176.860.9985100 4.2 101Mandipropamid(雙炔酰菌胺)412.1328.0*/356.011/512011.775.340.9994111 5.5 102Mecarbam(滅蚜蜱)330.1227.0*/199.010/58012.867.060.998999.3 6.4 103Mepanipyrim(嘧菌胺)224.177.0*/106.030/2512011.79-5.180.998793.5 10 104Metaflumizone(氰氟蟲腙)507.0178.0*/287.025/2513015.36-13.640.9999108 17 105Metalaxyl(甲霜靈)280.2220.1*/192.015/101209.376.760.9995107 4.6 106Metamitron(苯嗪草酮)203.1104.1*/77.015/201204.94-16.450.997990.9 8.6 107Metazachlor(吡草胺)278.1134.1*/210.120/5809.846.040.9998109 2.3 108Metconazole(羥菌唑)320.270.0*/125.035/5514012.440.140.999698.7 8.2 109Methabenzthiazuron(噻唑隆)222.1165.1*/150.020/151208.497.140.9996101 5.4 110Methidathion(殺撲磷)303.0145.0*/85.010/58010.57-5.050.9966111 6.7

(續表1)

No.Compound Precursor ionProduct ionCollision energy/VFragmentor/VRT/minME/%r2Recovery/%RSD/%113Methoprotryne(蓋草津)272.2198.1*/170.130/201409.973.720.999199.3 4.9 114Methoxyfenozide(甲氧蟲酰肼)313.0149.1*/91.035/1010012.2410.470.9998108 4.2 115Metobromuron(秀谷隆)259.0170.0*/148.115/151209.3810.550.9990103 5.7 116Metolachlor(異丙甲草胺)284.1252.1*/176.115/1012012.346.320.999390.7 17 117Metribuzin(嗪草酮)215.1187.1*/130.120/151207.64-1.360.9997106 3.6 118Metsulfuron-methyl(甲磺隆)382.1167.1*/141.020/151207.346.500.997574.9 4.1 119Mevinphos(速滅磷)225.1127.0*/193.015/1806.163.390.997081.7 17120Mexacarbate(茲克威)223.1151.0*/166.020/1011010.265.630.99951025.3 121Monocrotophos(久效磷)224.1127.0*/193.010/01003.854.690.999598.1 2.6 122Myclobutanil(腈菌唑)289.170.0*/125.015/2012011.325.850.999810111 123Novaluron(敵草胺)493.0158.0*/141.055/158014.735.230.9993110 3.9 124Oxadixyl(惡霜靈)279.1219.1*/102.010/10807.48-2.220.99951102.1 125Oxamyl(殺線威)237.072.0*/90.010/10803.477.330.9996105 2.8 126Penconazol(戊菌唑)284.170.0*/159.015/2012012.17-6.840.999381.2 16 127Pencycuron(禾穗寧)329.1125.0*/218.020/1512014.149.500.99981033.0 128Pendimethalin(二甲戊樂靈)282.1212.1*/194.15/57015.769.670.999183.4 9.8 129Phenmedipham(甜菜寧)301.1136.1*/168.120/58010.682.610.9995106 4.6 130Phenthoate(稻豐散)321.0247.0*/163.110/58013.556.040.998892.9 4.6 131Phosalone(伏殺硫磷)368.0182.0*/322.010/58014.210.620.9982104 4.7 132Phosmet(亞胺硫磷)318.0160.0*/133.035/108011.0210.330.99971049.0 133Phosphamidon(磷胺)300.1174.0*/127.020/101307.373.420.99981083.0 134Phoxim(辛硫磷)299.177.0*/129.020/208014.220.680.998791.9 11135Picolinafen(氟吡草胺)377.1238.0*/359.020/2012015.106.400.9994110 2.9 136Picoxystrobin(啶氧菌酯)368.1145.1*/205.120/58013.423.900.9997110 3.0 137Pirimicarb(抗蚜威)239.272.0*/182.120/151208.631.380.998794.3 6.9 138Pirimiphos-methyl(蟲螨磷)306.1164.1*/108.130/2012014.445.320.999095.8 11 139Prochloraz(咪鮮胺)376.0308.0*/266.010/108012.754.790.999997.5 4.8 140Profenofos(丙溴磷)372.9302.9*/344.915/1012014.506.500.999492.9 5.6 141Promecarb(猛殺威)208.1109.1*/151.110/58011.057.510.999298.6 6.2 142Prometon(撲滅通)226.2142.1*/184.120/201209.257.160.999099.0 5.3 143Propaquizafop(喔草酯)444.1100.0*/371.010/510015.108.590.998998.3 5.6 144Propham(苯胺靈)180.1138.1*/120.015/5809.673.530.9900111 6.3 145Propiconazole(丙環唑)342.1159.0*/69.020/2012012.616.820.99981077.0 146Propoxur(殘殺威)210.1111.0*/168.110/5808.194.660.999198.2 6.1 147Prosulfocarb(芐草丹)252.191.1*/128.115/1012014.815.400.995887.1 16148Pyracarbolid(比銹靈)218.1125.1*/55.136/121158.458.480.9994106 4.0 149Pyraclostrobin(百克敏)388.1163.0*/194.120/1012013.803.240.9999112 4.3 150Pyridaben(速螨酮)365.1147.0*/309.120/108017.1719.250.999599.9 4.2 151Pyrimethanil(嘧霉胺)200.1107.1*/183.025/2512010.399.940.998096.7 11 152Pyriproxifen(吡丙醚)322.196.0*/227.015/1012015.645.300.998488.3 9.8 153Quinalphos(喹硫磷)299.1163.0*/147.120/2012013.074.890.998293.0 16 154Quinoclamine(滅藻醌)208.0105.0*/154.030/201207.29-9.100.9993118 5.2 155Quinoxyfen(喹氧靈)308.0197.0*/272.032/2413514.844.920.998884.5 9.3 156Rotenone(魚藤酮)395.2213.0*/192.125/2012012.6319.500.9988107 10157Secbumeton(密草通)226.2142.0*/100.030/251009.247.520.9990101 6.0 158Spinosad A(多殺菌素A)732.5142.1*/98.055/3514012.60-3.200.998672.5 6.8 159Spirodiclofen(螺螨酯)411.171.2*/313.015/511017.3322.470.999799.5 5.0 160Tebuconazole(戊唑醇)308.270.0*/151.020/2012011.987.360.999410310 161Tebufenozide(蟲酰肼)297.0133.1*/105.035/159013.104.020.9998108 4.8 162Tebufenpyrad(吡螨胺)334.2145.1*/117.032/2417514.937.660.999393.9 4.7 163Tebuthiuron(丁唑隆)229.1172.1*/116.020/151207.202.560.9996100 3.2 164Teflubenzuron(伏蟲脲)381.0158.0*/141.045/1210014.1420.140.9975100 9.0 165Temephos(雙硫磷)467.0125.0*/419.024/815515.7911.730.9994106 4.0166Tepraloxydim(吡喃草酮)342.2166.1*/250.125/1012011.6721.190.995110612 167Tetraconazole(氟醚唑)372.0159.0*/70.016/3615011.832.940.99961182.9 168Thiabendazole(噻菌靈)202.0175.0*/131.140/301205.301.460.999696.6 4.8 169Thiacloprid(噻蟲啉)253.0126.0*/186.015/101206.62-0.540.9999106 2.1

(續表1)

No.Compound Precursor ionProduct ionCollision energy/VFragmentor/VRT/minME/%r2Recovery/%RSD/%172Thiodicarb(硫雙威)355.188.0*/163.015/5808.506.901.00001043.1 173Thiofanox(久效威)241.1184.0*/57.115/51208.94-1.540.995194.3 15 174Tolylfluanid(對甲抑菌靈)347.0137.0*/238.020/58014.007.500.999892.8 11175Triadimefon(三唑酮)294.169.0*/197.020/1512011.536.770.9994107 16 176Triasulfuron(醚苯磺隆)402.1167.1*/141.120/151208.4912.860.995884.8 9.0 177Triazophos(三唑磷)314.1162.1*/286.020/1012012.299.280.9996106 2.5 178Trichlorfon(敵百蟲)256.9109.0*/221.020/101204.843.900.9992100 7.2 179Tricyclazole(三環唑)190.0163.0*/136.030/251205.996.420.999389.6 3.7 180Trietazine(草達津)230.1202.0*/132.020/2016011.883.500.998294.0 16 181Trifloxystrobin(肟菌酯)409.1186.1*/206.115/1012014.852.660.9997105 3.9 182Triflumizole(氟菌唑)346.1278.1*/73.110/58013.713.020.999495.9 4.3 183Triflumuron(殺蟲隆)359.0156.0*/139.020/2012013.319.840.9999113 6.7 184Triticonazole(滅菌唑)318.270.0*/125.115/3512011.0417.580.998111112 185Uniconazole-1(烯效唑-1)292.170.0*/125.030/3012011.39-0.330.9989107 12 186Vamidothion(蚜滅多)288.1146.1*/118.020/10805.173.120.9996102 4.2 187Zoxamide(苯酰菌胺)336.0187.0*/159.036/1612513.66-2.030.999899.1 2.6

*quantitative ion

1.5 定量方法

采用基質匹配外標法定量，用空白月柿提取液將農藥標準品配制成一系列標準工作溶液進行檢測，然后用Agilent MassHunter B.04軟件對檢測結果進行定性分析，并繪制基質標準曲線進行定量分析。

2 結果與討論

2.1 樣品的處理與凈化

本研究首先將月柿樣品切碎均質后進行加水處理，因月柿屬于半干樣品，加水振蕩使其泡發、膨脹，破壞植物細胞和組織結構利于各種化合物的釋放溶解，有助于提高提取效率；再加入1%醋酸乙腈提取液、適量的無水硫酸鎂和無水醋酸鈉進行混合振蕩，誘導水相和乙腈分層，促使農藥等有機化合物分散遷移至乙腈層，酸性乙腈還能使植物蛋白、植物纖維等物質組織加速變性沉淀；最后采用QuEChERS方法對提取液進行凈化，并選擇1 g Na2SO4+0.3 g C18+0.2 g PSA為凈化填料，其中無水Na2SO4用于除水，C18可去除基質中的脂肪和酯類等非極性干擾物，PSA可吸附基質中的碳水化合物、脂肪酸、有機酸、酚類和少量色素[12-13]。

2.2 質譜與液相色譜條件的優化

2.2.1質譜條件的優化采用純乙腈分別配制質量濃度為100 μg/L的187種農藥混合標準溶液，依據食品法典委員會和歐盟關于分析方法評價和結果解釋執行委員會決議中的有關規定[14]，對187種農藥在ESI+模式下進行選擇離子監測(SIM)掃描。然后通過優化各化合物的源內碎裂電壓和碰撞能等質譜參數，選擇1個母離子和2個子離子作為該化合物的定性和定量離子對。選取響應值高、干擾小的離子為子離子，最后在兩對離子對中選擇響應較強的作為定量離子，從而建立了187種農藥化合物的離子監測掃描方法，具體參數見表1。

圖1 10 μg/kg加標試樣中187種農藥的總離子流色譜圖Fig.1 Total ion chromatogram(TIC) of 187 pesticides in spiked (10 μg/kg) solutions

2.2.2液相色譜條件的優化根據187種農藥的化學結構和性質選擇Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18色譜柱(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)，以乙腈-水溶液(3∶ 2)作為定容溶液，以含0.005 mol/L甲酸銨和0.01%甲酸的95%乙腈水溶液為有機相，含0.005 mol/L甲酸銨和0.01%甲酸的水溶液為水相。首先，將187種農藥化合物分為8組，并分別建立8個多反應監測(MRM)質譜掃描方法。然后，通過優化這8個方法中有機相和水相的比例和時間梯度，使各組化合物的響應值相對較高并且分離較好。最后，記錄每個化合物的保留時間作為動態多反應監測(DMRM)掃描方法的保留時間，設置增量保留時間(Delta Ret Time)為1 min，建立187種農藥化合物的DMRM質譜分析方法(表1)。在“1.4”條件下對加標10 μg/kg的試樣凈化處理后進行檢測分析，除了極性較強的殺線磷、滅多威和久效磷的峰形略差外，其余184種農藥的峰形和響應值均較好。10 μg/kg加標試樣中187種農藥化合物的總離子流色譜峰見圖1。

2.3 基質效應分析

基質效應(Matrix effect，ME)是在質譜檢測過程中目標化合物以外的其他樣品基質組分直接或間接影響檢測結果的現象。樣品基質中的共流出組分通過干擾目標化合物的離子化效率引起目標化合物信號的增強或減弱，最終影響定量的準確性。月柿由柿鮮果經日曬、脫澀等加工程序制成后，其中的多糖、果膠類、多酚類以及色素等基質組分的含量大大增加，若前處理凈化效果不佳將難以消除基質效應。本研究采用提取后加入標準物質法[15-16]評價基質效應，即將不含目標化合物的月柿樣品進行提取和凈化后獲得基質提取液，再分別用該提取液和定容液將187種農藥標準儲備液配制成1、5、10、20、50、100 μg/L兩組標準溶液。在相同條件下對兩組標準溶液進行檢測，分別以待測物定量離子的峰面積(y)為縱坐標，其質量濃度(x,μg/L)為橫坐標，建立基質標準曲線和溶劑標準曲線。當該兩條標準曲線的相關系數均≥0.99時，計算相應化合物的基質效應，ME=(B-A)/A×100%(A和B分別為溶劑標準曲線和基質標準曲線的斜率)。當|ME︱≤10%表示基質效應較小，可用溶劑標準曲線定量；當10%<|ME︱≤50%時表示基質效應較大，需用基質標準曲線定量以消除基質效應的影響；當|ME︱>50%時表示基質效應很強，需要優化前處理方法以降低基質效應。結果顯示，187種農藥的ME值為-16.45%～34.44%(見表1)，表明經前處理凈化后的月柿樣品對部分農藥的基質效應較顯著，因此本研究采用基質匹配外標法進行準確定量。

2.4 方法評價

在空白月柿樣品中分別按1、5、10、20、50、100 μg/kg加標水平添加187種農藥化合物的混合標準溶液，其中1、10、20、100 μg/L設置6個平行，進行加標實驗以分析方法的檢出限、線性相關性和回收率；同時用空白月柿基質提取液將187種農藥混合標準儲備液配制成1、5、10、20、50、100 μg/L系列濃度標準工作液，與加標試樣同時掃描檢測分析。分別以187種農藥化合物定量離子的峰面積(y)為縱坐標，質量濃度(x，μg/L)為橫坐標繪制基質標準曲線，并用于加標試樣的定量和回收率分析。結果如表1所示，187種農藥化合物在1～100 μg/kg范圍內線性相關性良好，r2>0.99；以滿足信噪比(S/N)≥3的最小加標水平作為方法檢出限(LOD)，以滿足S/N≥10的最小加標水平作為方法定量下限(LOQ)，187種農藥化合物的LOD、LOQ分別為1、10 μg/kg；10 μg/kg加標水平下的回收率為70.2%～118%，相對標準偏差(RSD，n=6)為2.0%～20%。本方法的準確度、靈敏度和精密度均能滿足歐盟指令《食品和飼料中農藥殘留分析質量控制和方法驗證程序的指導文件》[17]的相關要求。

圖2 月柿中13種農藥的檢出率Fig.2 Detection rate of 13 kinds of pesticides in dried persimmon

2.5 方法應用

采用該方法對本實驗室的149份月柿樣品進行檢測，結果見圖2。其中檢出農藥13種，包括吡蟲啉、丙溴磷、啶蟲脒、滅多威、噻蟲嗪5種殺蟲劑，苯醚甲環唑、多菌靈、氟硅唑、甲基硫菌靈、腈菌唑、戊唑醇、咪鮮胺、烯酰嗎啉8種殺菌劑，其中苯醚甲環唑、多菌靈、啶蟲脒、戊唑醇、吡蟲啉和咪鮮胺的檢出率較高。該檢測結果與柿樹病蟲害防治研究的相關結果一致，苯醚甲環唑、多菌靈、咪鮮胺和戊唑醇均是柿樹炭疽病防治過程中最常用和最有效的殺菌劑[4,18-19]，而啶蟲脒和吡蟲啉是兩種新型廣譜且高效的殺蟲劑，對柿蒂蟲、柿棉蚧、刺蛾等蟲害具有良好的防治效果[4]。本研究結果在一定程度上反映了廣西柿樹在種植生長過程中為了防治炭疽病、角斑病、柿蒂蟲、介殼蟲等病蟲害而廣泛施用殺菌劑和殺蟲劑，造成柿果中多種農藥殘留的風險。

3 結 論

本研究以廣西創匯名品月柿為樣本，以其種植過程中可能使用的187種農藥化合物為分析對象，成功建立了同時檢測月柿中187種農藥殘留的液相色譜-串聯質譜法。該方法準確、快速、靈敏，適用于月柿中高通量農藥殘留檢測和風險監測。