間變性淋巴瘤激酶在神經母細胞瘤患兒病理組織中的表達及臨床意義

黃體龍 李麗娟(通訊作者)

（昆明市兒童醫院血液科 云南 昆明 650000）

神經母細胞瘤（NB）占小兒惡性實體腫瘤10%和兒童腫瘤死亡率的15%[1],NB預后較差。筆者采用IHC方法分析ALK在NB患兒的表達特點。

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年10月至2016年1月昆明市兒童醫院血液腫瘤科收治的90例經病理初次證實NB患兒臨床資料，平均年齡（9.53±3.62）歲，35例患兒進行Nmyc基因擴增檢測，8例陽性，27例陰性，根據INSS分期將Ⅰ+Ⅱ+ⅣS期NB患兒分為低危組，INSSⅢ+Ⅳ期分為高危組，根據INSS分期和Nmyc基因擴增檢測對NB患兒采取手術或化療。

1.2 ALK檢測方法

免疫組織化學檢測：手術或組織活檢取得組織標本后，制作10%福爾馬林固定石蠟包埋細胞學蠟塊，常規切片，脫蠟，EDTA熱修復法修復抗原，滴加一抗，37℃溫箱中孵育40min，PBS緩沖液中沖洗5次，滴加二抗，37℃溫箱中孵育30min，PBS緩沖液中沖洗5次，加DAB顯色劑，清水沖洗5min,蘇木精染色2rnin,中性樹膠封片。高倍鏡下取4個不同視野共計數800個細胞，計算ALK陽性細胞比例，0～4分代表ALK細胞比例，未發現ALK細胞為0分，ALK陽性細胞數≤10%為1分，11%＜ALK陽性細胞數＜50%為2分，51%＜ALK陽性細胞數＜75%為3分，ALK陽性細胞數＞75%為4分。0分～3分表示染色強度，分值越高，染色越重。ALK細胞比例評分和染色評分結果的積為最終結果，0分為陰性（-），1～3為弱陽性（+），3～7為中度陽性（++），7～12分為強陽性（+++）。-、+為低表達，++、+++為高表達。

1.3 隨訪

所有患者隨訪期間截止2018年2月。

1.4 統計學分析

SPSS22.0進行數據分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2.結果

2.1 ALK表達情況

ALK高表達于NB患兒臨床特征見表1。

表1 ALK高表達于NB患兒臨床特征的關系[例（%）]

2.2 NB患兒生存狀態

NB患兒存活狀態見表2。

表2 NB患兒存活狀態的（n，%）

3.討論

正常情況下，ALK表達于人體胚胎的神經系統[2]，出生以后ALK除在腦組織中較少表達外，其他組織均不表達ALK，ALK基因異常可導致細胞增殖與凋亡失調，引起腫瘤。目前ALK與NB疾病預后的關系尚不明確。

本研究發現ALK高表達與年齡存在一定的關系，NB低危組和高危組、ALK高度表達組和低度表達組的生存率明顯不同，INSS分期高危NB患兒死亡率顯著高于INSS分期低危組，ALK高度表達NB死亡率顯著高于ALK低表達患兒。

總之，我們認為ALK在國內NB患兒中陽性表達率較高，ALK高表達與NB患兒不良預后有著密切的關系。