何世成,胡云霏,魯杏華,林 源,唐小明,王衛國,王昌建
(1. 湖南省動物疫病預防控制中心,湖南長沙 410014;
2. 湖南科技學院化學與生物工程學院,湖南永州 425199)
湖南省是全國生豬養殖大省。根據國家統計局2015年畜產品產量和畜牧養殖情況數據,湖南省生豬岀欄量、年底存欄量分別為6 171.2萬頭和4 376萬頭,占比分別為8.7%和9.7%,均居全國前三列。在當前國內豬群疫病較為復雜的形勢下[1-4],湖南省養豬業也存在臨床病種多、疫病反復發生、多病原混合感染等問題[5-7]。
生豬養殖密度高,飼養管理不合理,藥物、疫苗過度使用等因素,一方面加劇了部分病原的變異速率,另一方面又增加了臨床混合感染的復雜程度,因而增加了對豬群疫病發生和流行的控制難度[6,8-9]。為了解當前湖南省豬病流行情況,對2017年接診的87例臨床豬病病例進行了實驗室診斷和流行病學分析,為了解豬病流行規律,制定防控策略提供參考。
2017年湖南省13個市州72個規模化豬場和15個散養戶送檢的87例臨床病例樣品,共238份,包括血清、組織或糞便樣品。送檢豬場存欄量在100~8000頭之間。
病毒RNA/DNA提取試劑盒:購自蘇州天隆生物科技股份公司;高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(HPPRRSV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬圓環病毒2型(PCV2)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬輪狀病毒(PRV-A)、豬鏈球菌2型(SS2)、H1N1流感等病原核酸熒光PCR檢測試劑盒:購自中山大學達安基因股份有限公司;豬細小病毒(PPV)和弓形體(TOX)熒光定量PCR試劑盒:購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司;肺炎支原體(MHP)、副豬嗜血桿菌(HPS)、胸膜肺炎放線桿菌(APP)熒光定量PCR試劑盒:購自廣州維伯鑫生物科技有限公司。
單疫種病種病例分析,以養殖場單次發病豬群為單位,依據發病豬群飼養管理情況、發病數量、死亡率、臨床癥狀、解剖病變情況,結合豬場疫苗免疫和藥物使用情況,做出該病例可能的病因診斷。
年度豬群病例分析,按照月份,特征性臨床癥狀(高熱、呼吸道癥狀、繁殖障礙、神經癥狀、腹瀉癥候等),不同生長階段(公豬、母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬)進行分類,以發病數量和死亡率為數據進行統計分析。
將送檢樣品分別按照RNA/DNA提取試劑盒說明書要求處理并進行核酸提取,然后將提取的核酸,按照相應病原的熒光定量PCR試劑盒說明書進行檢測和結果判定。
根據各病例的病原核酸檢測結果,統計分析按單個病例檢測出的病原種類以及所有病例檢測出的病原總數等。
送檢的87個病例分布于一年四季,但氣溫較低的1—3月份和12月份,以及溫度最高的7月份病例數量較多(圖1)。

圖1 87例臨床豬群疫病發病時間與氣溫分布情況
對所有病例進行群體分類統計,發現發病群體以保育豬為主,占所有病例的62.1%;哺乳仔豬、育肥豬、母豬等病例數量相差不大(表1)。

表1 臨床病例發病群體分布情況
在87例病例中,高熱癥狀占比最高,為40.2%,其次是腹瀉和呼吸道癥狀(表2)。其中,在氣溫較低的一季度(平均氣溫<9℃)主要以腹瀉、呼吸道和高熱癥狀為主,而夏秋季節(7月和10月),則以高熱為主,在冬季12月份(平均氣溫<9℃),繁殖障礙病例較多(圖2)。

表2 臨床病例癥候群分布情況
87個臨床病例中,大部分病例(82.75%)所在豬群的發病數量在100頭以下,其中以30頭以下為主(圖3),發病數量500以上的病例較少,僅有5例,占5.75%,最高的發病數量為600頭,僅1例。

圖2 發病癥候群時間分布情況

圖3 病例發病情況

圖4 臨床病例病原熒光定量PCR檢測
87個送檢病例中,有13例未檢測到常見的豬病病原。其他的74個病例中,PCV2的檢出率最高(56例),其次為HPPRRSV(27例)、PRV(15例)、PRRSV(11例)、CSFV(10例)、PEDV(9例)、PRVA(6例),HPS、SS2、MHP、H1N1和TOX均只有1例(圖4)。在74個檢測出相關病原的病例中,有47例存在多病原混合感染,占63.5%,其中混合感染病原種類數量最高的有5種。在混合感染病例中,多病原混合形式多達21種,其中“PCV2+PRRSV”最為常見(表3)。

表3 臨床病例多病原體混合情況
近年來,豬群疫病多病原混合、繼發、協同感染問題越來越普遍[1,4-7,9]。本文所述的87個臨床病例中,超過半數的病例呈現多病原感染,病原混合感染的形式多達21種,最多的在一份病料中檢測到了5種病原,其中“PRRSV+PCV2”最為常見。
本文所述87個臨床病例散在分布于全省37個縣,且均為養殖場發病后的主動送檢的,其分析對了解全省2017年豬病總體流行情況具有參考意義。相較于2016年[9]分析結果,2017年湖南省內豬群疫病整體形勢較為平穩,尤其是種豬、育肥豬群的發病情況好于2016年,病原分布和感染方式總體上未發生明顯變化,但與腹瀉相關的PEDV和PRV檢出率較高,PRV病例數相比2016年明顯增多[4,9],應引起重視。
本研究對湖南省13個市州37個縣送檢的87例臨床豬病病例進行流行病學分析發現,臨床表現主要以高熱、呼吸道癥狀和腹瀉癥狀為主,氣溫較低的冬春季節和氣溫最高的夏季病例數量最多,發病豬群主要集中在保育豬,存欄量較小的豬群發病率較高。主要病原檢測結果顯示,PCV2和HPPRRSV感染率較高,是危害豬群的主要病原。因此,在氣溫偏低和高溫季節,要注意加強豬病防控,尤其是保育豬;豬病的防控重點應是PCV2和HPPRRSV感染,以及與其它病原的混合感染。