氣相色譜法測定大米中8種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量

蘇春燕

[摘要]本文建立使用氣相色譜法同時(shí)測定大米中敵敵畏、久效磷、樂果、馬拉硫磷、毒死蜱、乙硫磷、三唑磷、甲拌磷8種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的方法。樣品經(jīng)丙酮提取，上清液經(jīng)過凈化、濃縮處理，外標(biāo)法定量。樣品中8種有機(jī)磷加標(biāo)回收率為73.4%～88.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.7%～3.7%，最低檢出限達(dá)到6.9×10^-4～7.8×10^-3μg/mL。

[關(guān)鍵詞]氣相色譜法；有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量；凈化；大米

中圖分類號(hào)：S511 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.20180311

有機(jī)磷類農(nóng)藥具有高效廣譜、性價(jià)比高以及低生物累積性等優(yōu)勢，因此一些生物選擇性好的有機(jī)磷類還在被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)以及衛(wèi)生害蟲方面的控制。但是這類農(nóng)藥的急性毒性較大，容易引起人畜急性中毒，食物中主要來源是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的使用。有機(jī)磷對(duì)人畜的中毒機(jī)理是對(duì)乙酰膽堿酶的抑制，使得乙酰膽堿酯酶大量蓄積，使膽堿神經(jīng)受到持續(xù)沖動(dòng)，導(dǎo)致先興奮后衰竭的一系列的毒蕈堿樣、煙堿樣以及中樞神經(jīng)等癥狀。有機(jī)磷農(nóng)藥中毒（OPP）是極其嚴(yán)重的健康問題之一，導(dǎo)致約20萬人死亡。

目前應(yīng)用于有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測方法有多種，最為常見的有氣相色譜法、免疫分析法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、高效液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等。根據(jù)蘇州本地農(nóng)戶實(shí)際施藥情況，本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜法對(duì)大米中8種有機(jī)磷農(nóng)藥（敵敵畏、久效磷、樂果、馬拉硫磷、毒死蜱、乙硫磷、三唑磷、甲拌磷）殘留量進(jìn)行研究，本方法采用丙酮提取，經(jīng)凝膠滲透色譜（GPC）凈化，氣相色譜氮磷檢測器（NPD）檢測，建立了大米中8種有機(jī)磷農(nóng)藥的同時(shí)測定方法，為大米的質(zhì)量控制提供了科學(xué)的檢測方法和依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

大米：市售；丙酮，HPLC級(jí)；敵敵畏、久效磷、樂果、馬拉硫磷、毒死蜱、乙硫磷、三唑磷、甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)品，均為100μg/mL，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

1.2儀器

7890B氣相色譜儀，美國安捷倫公司；HY-6調(diào)速多用振蕩器，常州固華電器有限公司；JFSD-100粉碎機(jī)，上海嘉定糧油儀器有限公司；凝膠滲透色譜儀，德國LC-Tech公司。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1樣品提取

樣品中敵敵畏、久效磷、樂果、馬拉硫磷、毒死蜱、乙硫磷、三唑磷、甲拌磷的提取：稱取20g粉碎試樣，置于250mL具塞錐形瓶中，加入100mL丙酮，振蕩提取30min，取上清液備用。

1.3.2凝膠滲透色譜（GPC）凈化+定量濃縮（EVA）

采用Bio-BeadsTM S-X3（400×25mm）凈化柱，以乙酸乙酯-環(huán)己烷（1：1，mL/mL）為流動(dòng)相，流速為4.5mL/min，收集第9～19min的洗脫液，濃縮溫度為40℃，定量環(huán)為5mL，1mL用于GC檢測，其余4mL排至廢液瓶。

1.3.3氣相色譜條件

色譜柱：HP-5毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25μm）；載氣：氮?dú)猓兌取?9.999%）；恒壓：壓力0.08MPa。

進(jìn)樣口溫度：250℃；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1μL。

檢測器溫度：300℃；空氣流量：60mL/min；氫氣流量：4mL/min；尾吹氣流量（氮?dú)猓?0mL/min，其中包括色譜柱流量：2.5mL/min。

柱箱升溫：初始溫度80℃，以20℃/min升至260℃保持2min。

2結(jié)果與分析

2.1樣品提取劑的選擇

由于有機(jī)磷農(nóng)藥極性較強(qiáng)，根據(jù)“相似相溶”的原則，常選用較強(qiáng)極性的乙腈、丙酮、乙酸乙酯和二氯甲烷等作為提取溶劑。乙腈的成本高，毒性大，污染環(huán)境，且其沸點(diǎn)高以致濃縮困難。乙酸乙酯極性大，穿透力強(qiáng)，并且濃縮時(shí)要求的溫度較高，有些農(nóng)藥回收率會(huì)偏低。考慮到二氯甲烷對(duì)環(huán)境的污染及乳化問題，乙酸乙酯適合蔬菜類產(chǎn)品的提取，丙酮更適合于糧食類產(chǎn)品中有機(jī)磷的提取。本實(shí)驗(yàn)選用丙酮提取樣品，不僅雜質(zhì)少，還能滿足回收率要求。

2.28種有機(jī)磷農(nóng)藥的氣相色譜圖

通過配備NPD檢測器的氣相色譜進(jìn)行檢測，在大米樣品中8種有機(jī)磷的峰形良好，不拖尾，分離效果良好，它們的出峰時(shí)間依次為：敵敵畏4.930min、久效磷7.939min、甲拌磷8.052min、樂果8.281min、馬拉硫磷9.608min、毒死蜱9.753min、乙硫磷11.229min、三唑磷11.369min。結(jié)果見圖1。

2.3線性范圍和檢出限

分別量取1mL標(biāo)準(zhǔn)品，用丙酮定容至100mL配成濃度為1.0μg/mL的有機(jī)磷混合標(biāo)準(zhǔn)液，再用丙酮將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋至0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.60μg/mL、0.80μg/mL。按選定色譜條件進(jìn)樣，以混合標(biāo)準(zhǔn)溶液中敵敵畏、久效磷、樂果、馬拉硫磷、毒死蜱、乙硫磷、三唑磷、甲拌磷的質(zhì)量濃度（x）和組分色譜峰面積（Y）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，8種有機(jī)磷在濃度為0.2～1.0mg/mL，線性關(guān)系良好，均不小于0.9985，其線性方程和相關(guān)系數(shù)見表1。在3倍信噪比時(shí)測定的8種農(nóng)藥的檢出限為6.9×10^-4～7.8×10^-3μg/mL。因此本試驗(yàn)方法的線性范圍寬且檢出限低，符合檢測要求。

2.4回收率以及精密度實(shí)驗(yàn)

采用加標(biāo)回收的方法，分別稱取三份空白大米樣品，分別添加10μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mL、2mL、4mL，每份樣品按檢測方法重復(fù)測定6次，平均回收率在73.4%～88.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.7%～3.7%，見表2。

3結(jié)論

本試驗(yàn)建立了GPC-EVA凈化濃縮，采用氣相色譜法同時(shí)測定大米中8種農(nóng)藥殘留的檢測方法。該方法操作簡單、自動(dòng)化程度高，而且8種化合物在濃度為0.2～1.0mg/mL，線性關(guān)系良好，線性范圍寬且檢出限低。