腸肝循環對家兔膽固醇排泄影響的研究

田衛軍 俞生 趙玉文 姜元寶 龍成科 余小華

[摘要] 目的 通過建立腸肝循環模型及阻斷腸肝循環，研究家兔膽固醇腸肝循環的存在及其顯著性。 方法 本實驗設置實驗組與對照組，進行高膽固醇飲食與普通飲食差異飼養，通過建立腸肝循環模型及阻斷腸肝循環，利用膽固醇氧化酶法分別測定實驗組與對照組血清膽固醇濃度，通過6個月數據統計分析，研究膽固醇的腸肝循環現象。 結果 通過6個月數據統計，A、C兩組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，C組家兔后兩個月高膽固醇血癥表現明顯，A組家兔血清膽固醇濃度上升幅度較C組弱，高膽固醇血癥表現不明顯，A組與C組比較差異有統計學意義（P<0.05）；D組家兔血清膽固醇濃度稍有上升，但上升幅度不明顯，B組血清膽固醇濃度上升幅度較D組明顯，B組與D組比較差異有統計學意義（P<0.05）。以每組家兔血清膽固醇濃度為縱坐標，以時間為橫坐標，繪制血清TC-時間線狀圖，C組較A組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，B組較D組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯。 結論 家兔膽固醇腸肝循環現象存在，通過阻斷家兔腸肝循環，對降低家兔血清膽固醇含量具有一定作用，從而為進一步研究阻斷腸肝循環降低人體膽固醇含量提供理論基礎，為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環途徑治療高膽固醇血癥提供新思路，為藥品研發指引方向。

[關鍵詞] 高血脂；高膽固醇血癥；膽固醇；腸肝循環

[中圖分類號] R96 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）15-0034-03

Study on the effect of enterohepatic circulation on cholesterol excretion in rabbits

TIAN Weijun1 YU Sheng1 ZHAO Yuwen2 JIANG Yuanbao1 LONG Chengke1 YU Xiaohua3

1.Emergency Center， Shannan Peoples Hospital in Tibet Autonomous Region， Shannan 856000， China； 2.Huaibei Miner General Hospital Group， Huaibei 235000， China； 3.Department of Vasculocardiology， Shannan Peoples Hospital in Tibet Autonomous Region， Shannan 856000， China

[Abstract] Objective To study the existence and significance of cholesterol-intestinal hepatic circulation in rabbits by establishing a model of enterohepatic circulation and blocking enterohepatic circulation. Methods In this experiment， the experimental group and the control group were set up to conduct high-cholesterol diets and ordinary diets for differential feeding. By establishing a model of enterohepatic circulation and blocking enterohepatic circulation， cholesterol oxidase method was used to measure serum cholesterol concentration in the experimental group and the control group respectively. Based on the statistical analysis of the data for 6 months， the phenomenon of enterohepatic circulation of cholesterol was studied. Results Based on the data of 6 months， the serum cholesterol concentrations of rabbits in groups A and C were gradually increased. After two months， the hypercholesterolemia was significant in the rabbits in group C. The increase degree of serum cholesterol concentration in the rabbits in group A was weaker than that in group C. Hypercholesterolemia had no obvious effect. There was statistically significant difference between group A and group C （P<0.05）； serum cholesterol concentration in rabbits in group D was increased slightly， but the increase was not significant. The increase of serum cholesterol concentration in group B was more significant than that of group D. There was a statistically significant difference between group B and group D（P<0.05）. The serum TC-time line graph was plotted with the serum cholesterol concentration in each group as the ordinate and the time as the abscissa. Compared with group A， the serum cholesterol was increased significantly in group C. Compared with group D， the serum cholesterol in group B was increased significantly. Conclusion This experiment shows that the cholesterol enterohepatic circulation phenomenon exists in rabbits. By blocking the enterohepatic circulation in rabbits， it has a certain effect on lowering the content of serum cholesterol in rabbits. This will provide a theoretical basis for further studying the role of blocking enterohepatic circulation in reducing cholesterol levels in the body. It provides new ideas for the clinical treatment of hypercholesterolemia by blocking the cholesterol enterohepatic circulation in clinical practice and points a direction for drug development.

[Key words] Hyperlipidemia； Hypercholesterolemia； Cholesterol； Enterohepatic circulation

被分泌到膽汁內的藥物及其代謝產物經由膽道及膽總管進入腸腔，經膽汁排入腸腔的藥物部分可再經小腸上皮細胞吸收經肝臟進入血液循環，這種肝臟、膽汁、小腸間的循環稱腸肝循環（enteroheptic cycle，ETC）。腸肝循環是體內一種特殊生理現象，藥物ETC現象在臨床上具有不同的意義，藥物ETC的存在可使藥物出現雙峰或多峰現象，有助于提高藥物的生物利用度，內源性物質和毒性物質ETC現象則使人體長時間蓄積而帶來危害。阻斷腸肝循環（interruption of enterohepatic circulation，IETC）就是阻斷具有ETC特性物質在腸道內的重吸收過程，使其ETC過程受到抑制，降低藥物在人體內負荷的原理。

本實驗運用家兔作為實驗對象，通過建立腸肝循環模型及阻斷腸肝循環，研究膽固醇腸肝循環的存在及其顯著性，從而為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環途徑治療高膽固醇血癥及藥品研發提供理論基礎和現實依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2017年8月～2018年2月本實驗運用家兔作為實驗對象，設置實驗組與對照組，通過建立腸肝循環模型及阻斷腸肝循環，利用膽固醇氧化酶法分別測定實驗組與對照組血清膽固醇濃度，比較各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化情況，建立血清膽固醇濃度-時間曲線觀察各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化的增幅，研究膽固醇腸肝循環的存在及其顯著性。

1.2 方法

①雄性家兔40只，體重（2.0±0.2）kg，健康狀況良好，均等；分為A、B、C、D四組，每組10只。分別編號A1～10、B1～10、C1～10、D1～10，B、D兩組每日喂飼普通兔糧3次，A、C兩組在每日喂飼普通兔糧3次的基礎上，每只家兔添加20 g雞蛋黃。②分別做A、B兩組家兔近肝臟處的膽總管插管和近肝胰壺腹處的膽總管插管，近肝臟處的膽總管插管留置生物儲存囊儲存膽汁。③每次進食后1 h取A、B兩組家兔近肝臟處的膽總管插管生物儲存囊儲存的膽汁，采用30 min勻速注入對方的近肝胰壺腹處的膽總管插管。④分別于實驗前及實驗后1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月，抽取A、B、C、D四組家兔靜脈血，測定膽固醇濃度，每組10只家兔血清膽固醇濃度作為記錄數據。追蹤實驗6個月。

1.3觀察指標

C組為A組對照組，D組為B組對照組。觀察對比各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化情況。

1.4 統計學分析

使用SPSS16.0統計學軟件進行分析。計量資料以（x±s）表示，A組與C組、B組與D組分別配對t檢驗；P<0.05為差異有統計學意義。并以每組血清膽固醇濃度為縱坐標，以時間為橫坐標，繪制血清TC-時間線狀圖，觀察對比各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化趨勢。

2 結果

2.1 A組與C組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化比較

A、C兩組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，C組家兔后2個月高膽固醇血癥表現明顯，A組家兔血清膽固醇濃度上升幅度較C組小，高膽固醇血癥表現不明顯。A組與C組比較差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 B組與D組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化比較

D組家兔血清膽固醇濃度稍有上升，上升幅度不明顯；B組血清膽固醇濃度上升幅度較D明顯。B組與D組比較差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3血清TC-時間線狀圖

以每組家兔血清膽固醇濃度為縱坐標，以時間為橫坐標，繪制血清TC-時間線狀圖。C組較A組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，B組較D組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯（封三圖7）。

3討論

本實驗為研究膽固醇腸肝循環的存在及其顯著性的實驗，分為實驗組與對照組，進行高膽固醇飲食與普通飲食差異飼養，通過建立腸肝循環模型及阻斷腸肝循環，研究血清膽固醇濃度隨時間的變化。通過6個月數據統計，C組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，后2個月高膽固醇血癥表現明顯，A組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，但由于被阻斷腸肝循環，其血清膽固醇濃度上升幅度較C組小，高膽固醇血癥表現不明顯，A組與C組比較，差異有統計學意義（P<0.05）；D組家兔血清膽固醇濃度稍有上升，上升幅度不明顯，B組家兔由于通過腸肝循環模型接受來自于A組家兔的膽汁，其血清膽固醇濃度上升幅度較D組明顯，B組與D組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。以每組家兔血清膽固醇濃度為縱坐標，以時間為橫坐標，繪制血清TC-時間線狀圖，C組較A組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，B組較D組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，表明家兔膽固醇腸肝循環現象存在，且具有一定的顯著性。通過阻斷家兔腸肝循環，對降低家兔血清膽固醇含量具有一定作用，從而為進一步研究阻斷腸肝循環降低人體膽固醇含量提供理論基礎及指導。

高脂血癥是人體脂肪代謝異常的表現，是導致動脈粥樣硬化的主要因素，是引起心腦血管病主要原因之一。高血脂主要分為三類：高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥和混合性高脂血癥。膽固醇可轉化為膽汁酸經腸道排出體外，未代謝的膽固醇留在血液中可能會堆積起來，特別是飽和脂肪酸的攝取量多時，因為飽和脂肪酸會減少接受器的數目，并且阻礙細胞吸收正常的膽固醇量，從而引起高膽固醇血癥。目前高膽固醇血癥尚無很好的治療方法，主要通過膳食治療、增加運動以及辛伐他汀片等降脂藥物治療，且預后較差，尤其對于家族性高膽固醇血癥更無徹底治療方法。

膽固醇腸肝循環具有一定的顯著性，阻斷家兔腸肝循環，對降低家兔血清膽固醇含量具有一定作用，為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環途徑降低體內膽固醇含量提供新思路，為治療高膽固醇血癥開辟新途徑。膽固醇腸肝循環為肝臟、膽汁、小腸間的循環，若通過人為干預，阻斷小腸循環環節，使進入小腸的膽固醇經腸道排除體外，不再經小腸上皮細胞吸收而是經肝臟進入血液循環，從而可降低人體膽固醇含量。可使用藥物阻斷小腸循環環節，使用對膽固醇具有結合作用或分解作用的藥物，藥物進入小腸后，與腸道內的膽固醇結合或者分解膽固醇為其他物質，從而排出腸道。本實驗為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環途徑治療高膽固醇血癥提供理論基礎和新思路，為相關藥品研發指引方向。

[參考文獻]

[1] 朱大年. 生理學[M]. 北京：人民衛生出版社，2008：184-185.

[2] 寶峰. 藥理學[M]. 北京：人民衛生出版社，2008：256-260.

[3] 金惠銘，王建枝. 病理生理學[M]. 北京：人民衛生出版社，2008：234-235.

[4] 黃詒森，張光毅. 生物化學與分子生物學[M]. 北京：北京科學出版社，2008：150-152.

[5] 魏科達，肖平，方平飛，等. 阻斷腸肝循環原理的臨床意義及其研究進展[C].湖南省藥學會醫院藥學專業委員會學術年會論文集，2009：23-26.

[6] 董婧，陳西敬，宋捷，等. 阿托伐他汀大鼠體內藥動學及腸肝循環研究[J].中國藥科大學學報，2008，39（1）：55-59.

[7] 韓天權，蔣兆彥，張圣道. 膽石病人腸肝循環途徑脂質代謝異常的分子生物學研究進展[J].中華肝膽外科雜志，2008，14（4）：219-220.

[8] 李銳，周莉玲，蘇子仁，等. 絞股藍總苷腸-肝循環研究[J].中藥藥理與臨床，1993，（1）：19-22.

[9] 林國平，龍石銀，喬新惠，等. 高膽固醇飲食對家兔血清CETP和血脂水平的影響[J]. 中南醫學科學雜志，2011，39（5）：504-506.

[10] 何謙，張雪梅，王香玲，等.膽汁酸腸肝循環與膽固醇結石形成關系的研究[J]. 陜西醫學雜志，2007，36（1）：32-34.

[11] 蔣兆彥，胡海，韓天權，等. 膽固醇的腸肝循環：肝臟和小腸在膽石形成中的作用[J]. 外科理論與實踐，2017，（3）：191-194.

[12] 鄭培良. 藥物肝腸循環對藥物作用的影響[J]. 中國藥理學通報，1987，3（6）：349-350.

[13] 楊光義，張晨寧，張榮嬌，等. 具有肝腸循環特征藥物誘發的毒副作用及其機制研究進展[J]. 醫藥導報，2017， 36（3）：299-302.

[14] 焦正，沈杰，仲瓏瑾，等. 麥考酚酸腸肝循環藥動學模型的建立[J]. 藥學學報，2006，41（3）：272-276.

[15] 張國琴，林趙田. 大鼠的藥物腸肝循環模型和應用[J]. 中國抗生素雜志，1991，（6）：460-461.

[16] 周懷悟，沈佳慶. 吡羅昔康在家兔體內的腸肝循環藥物動力學分析[J]. 中國藥理學報，1992，（2）：180-182.

[17] 景榮榮. 腸-肝循環藥動學矩分析研究[J]. 數理醫藥學雜志，1999，12（2）：105-106.

[18] 誠強. 膽鹽的腸肝循環[J]. 國際外科學雜志，2003，30（4）：238-239.

[19] 鈐培國，郭曉霞. 肝腸循環的中西醫研究進展[J]. 醫學綜述，2016，22（14）：2799-2802.

[20] 程娟，李俊，宋玨，等. A771726在大鼠體內肝腸循環的研究[J].安徽醫科大學學報，2010，45（3）：338-341.

（收稿日期：2018-02-05）