白細胞介素10基因啟動子區—592C>A位點多態性與宮頸癌易感性的Meta分析

郭沖 張志軍

[摘要] 目的 研究白細胞介素-10（IL-10）基因啟動子區-592C>A位點多態性與宮頸癌易感性的關系。 方法 檢索PubMed、Embase、Web of SCI、中國知網及萬方數據庫中從建庫至2018年3月有關IL-10基因-592C>A位點多態性與宮頸癌易感性相關研究的文獻。對符合納入標準的文獻進行資料提取后，以OR值和95%可信區間為效應指標，應用STATA 14.0軟件進行Meta分析，并對發表發生偏倚、敏感性和累積分析等進行檢測。 結果 共納入10篇已發表文獻，共計3149例宮頸癌患者和2237例正常對照。Meta分析結果表明：在總人群中，IL-10基因-592C>A位點多態性與宮頸癌易感性之間沒有顯著的關聯。在其后的針對多個因素的亞組分析中，IL-10基因-592C>A位點多態性與歐洲人群宮頸癌發生有顯著的相關性（P < 0.05）。 結論 IL-10基因-592C>A位點多態性改變可能會增加歐洲人群罹患宮頸癌的風險。

[關鍵詞] 宮頸癌；白細胞介素-10；多態性；Meta分析

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）06（b）-0089-06

[Abstract] Objective To study the association between -592C>A polymorphism within gene promoter region of interleukin-10 （IL-10） and susceptibility of cervical cancer. Methods The relevant literatures about -592C>A polymorphism within gene promoter region of IL-10 and susceptibility of cervical cancer of PubMed， Embase， Web of SCI， CNKI and Wanfang from inception to March 2018 were searched. After the data of literatures met with inclusion criteria was extracted， taking OR value and 95% confidence interval as effect indicators， STATA 14.0 software was used to make meta analysis， and the occurrence of bias， sensibility， accumulation analysis were detected. Results Ten published studies including 3149 patients with cervical cancer and 2237 normal controls were enrolled. The results of meta analysis showed that in the total population， no significant association between IL-10 -592C>A polymorphism and susceptibility of cervical cancer was found. After that， the subgroup analysis aiming at multiple factors showed that -592C>A polymorphism within gene promoter region of IL-10 had significant correlation with the occurrence of cervical cancer in European （P < 0.05）. Conclusion The changes of -592C>A polymorphism within IL-10 gene may increase the risk of suffering from cervical cancer in European.

[Key words] Cervical cancer； Interleukin-10； Polymorphism； Meta analysis

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一，臨床發病率較高，位居女性惡性腫瘤的第2位，占總體女性癌癥總數和癌癥死亡人數的8%左右[1-4]。研究表明，細胞因子在上皮細胞的炎癥浸潤和惡性轉化過程中起著關鍵作用[5-6]。白細胞介素-10（IL-10）主要由T型細胞（Th2細胞）、單核細胞/巨噬細胞、角質形成細胞和腫瘤細胞等分泌，同時發揮了促癌（免疫抑制）和抑癌（抗血管生成）效應[7-8]。單核苷酸多態性是人類基因組中最常見的遺傳變異之一，占基因組變異總量的90%以上。IL-10基因位于染色體1q31-32，包含5個外顯子和4個內含子，編碼178個氨基酸[9]。IL-10-592C>A（rs1800872）位點中堿基序列的改變，可能引發啟動子與靶蛋白的結合活性，影響DNA的轉錄進程，改變IL-10 mRNA的產量，導致下游IL-10蛋白的表達異常，疾病易感性發生改變。自2002年起，Roh等[10]相繼開展了多項病例-對照研究，探討IL-10基因-592C>A位點多態性與婦女中宮頸癌發病風險的關系，然而其研究結論并不一致。本研究擬通過運用Meta分析的研究方法，收集既往已經發表的文獻，對結果進行綜合分析，研究IL-10基因-592C>A突變是否與宮頸癌的發生具有相關性。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

在線檢索PubMed、Embase、Web of SCI、中國知網和萬方數據庫，收集國內外公開發表的關于IL-10-592C>A多態性與宮頸癌發病風險相關性的病例-對照研究，檢索時限均為自建庫至2018年3月，中文檢索詞包括“宮頸癌”“白細胞介素10”“多態性”；英文檢索詞包括“cervical cancer”“interleukin-10”“IL-10”“rs1800872”“polymorphisms”，并運用論文追溯法查詢已發表論文的相關引文，避免漏檢。

1.2 納入與排除標準

本研究運用循證醫學PICO原則，納入數據的相關文獻必須滿足的條件包括：①文獻來自于國內外雜志公開發表的關于宮頸癌的發生與IL-10基因-592C>A位點突變相關的病例-對照研究，文獻語種主要為中文和英文；②納入文獻中包含的研究數據完整，或者可以通過文字提供的數據進行推導演算；③關于同一研究主題或是研究數據多次發表時，以最新或者是最大數據為準。排除標準：①非中英文的文獻報道；②病例報道、綜述、動物及細胞學基礎研究；③數據不完整或無法演算出OR及95%可信區間（CI）。

1.3 數據錄入及質量評價

獨立提取每篇納入本次Meta分析的研究論文中的研究數據，并通過交叉進行核對，遇到不一致時，通過論文核查，相互探討以解決。錄入數據包括發表文獻第一作者、發表文獻年份、對照組人群的組織來源、研究對象來自的國家（以及人種）、研究位點的三種基因型數據、各基因位點的檢測方法、對照組人群的基因分析數據是否符合哈德-溫伯格平衡（Hard-Weinberg equilibrium，HWE）。應用紐卡斯爾-渥太華量表（NOS）對每項納入的原始研究的質量進行分析評價，評價結果>6分的即認為是高質量研究。

1.4 統計學方法

OR值和95%CI被用于評估IL-10基因-592C>A突變和宮頸癌的相關性，5種等位基因模型包括等位基因模型（A vs. C）、共顯性模型（CA vs. CC和AA vs. CC）、顯性模型（CA+AA vs. CC）和隱性模型（AA vs. CC+CA），逐一計算，結合對照組人群的組織來源和人種等因素進行亞組分析。檢驗被用于評估組間異質性，若I2 < 40%，則認為Meta分析的文獻同質性較好，采用固定效應模型，反之使用隨機效應模型。發表偏倚分布使用Egger檢驗和Begg檢驗計算。Egger敏感性分析以及積累效應分析用于統計納入各研究的一致性及統計趨勢。統計采用STATA 14.0軟件，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 文獻檢索結果

通過在線檢索，共發現相關文獻164篇，依據納入標準，經過逐步排除后，納入10篇文[10-19]，包括3149例宮頸癌患者和2237例正常對照，其中6項研究來自于亞洲人群[10，13-16，19]，4項研究來自歐洲人群[11-12，17-18]。基因分型的檢測手段包括TaqMan、ARMS-PCR、PCR-RFLP和Multiplex PCR技術。僅有1項研究偏離HWE[17]。見表1。

2.2 Meta分析結果

表2結果表明，IL-10基因-592C>A多態性和宮頸癌的易感性之間無顯著的相關關系（P > 0.05）。總人數AA vs. CC模型森林圖見圖1。在其后的亞組分析中，統計結果表明，IL-10基因-592C>A多態性和歐洲人群宮頸癌的發生有顯著的相關性（P < 0.05）。此外，納入的10篇研究中，有3篇的質量評價分數>6分，其余7項研究的質量評價分數≤6分。見表1。

2.3 發表偏倚

各基因型所示漏斗圖表明，納入的研究分布對稱，無偏倚存。Egger檢測結果也進行了證實[A vs. C：P = 0.96；CA vs. CC：P = 0.63；AA vs. CC：P = 0.58（圖2）；CA+AA vs. CC：P = 0.82；AA vs. CC+CA：P = 0.34]。

2.4 積累效應分析和敏感性分析

通過將所有納入研究依據發表年代，進行積累效應分析表明，統計結果未見明顯的波動和偏倚（圖3）。此外，依據納入文獻的發表時間先后，逐個刪除，進行敏感性分析（圖4）。計算表明，納入的研究在依據發表年份逐一排除后，OR值及95%CI在各個基因分析模型中均未發生明顯的改變。

3 討論

近30年來分子流行病學已經證實，宮頸癌以及各種婦科腫瘤的發生是多種致病因素相互作用的結果，如環境因素的惡化、不潔生活習慣等。個體基因組學的突變是導致人群差異及多樣性的重要因素，也是腫瘤易感性差異化的重要原因[20]。炎癥細胞因子在組織細胞由正常上皮向惡性腫瘤的轉化過程中起重要作用，這些細胞因子通過誘導血管生成、代償性細胞增殖、DNA損傷或基因突變的積累等途徑促進這一過程的發生。基因突變，特別是啟動子區的多態性，影響基因轉錄的過程，導致相應基因的異常表達和表達蛋白的失活。這些突變也會影響個體對癌癥的易感性[21]。

2002年以來，大量的分子流行病學病例-對照研究開始關注于IL-10基因-592C>A多態性位點與宮頸癌風險之間的關系。Zoodsma等[11]研究發現在印度人群中，與CC基因型相比，CA和CA+AA模型人群可顯著提高宮頸癌發展的風險（CA vs. CC：OR = 1.36， 95%CI = 1.07～1.73；CA+AA vs. CC：OR = 1.34，95%CI = 1.06～1.69。于曉牧等[14]和Torres-Poveda等[18]研究也同樣發現IL-10基因-592C>A多態性可能會增加罹患宮頸癌的風險。然而，Ivansson等[12]和Zidi等[17]研究卻未能發現該位點的突變與宮頸癌的發生之間具有顯著的相關性。基于以上研究的不一致性，本研究運用Meta分析方法，通過對關于IL-10基因-592C>A位點多態性及宮頸癌相關性研究系統地檢索，科學地篩查，全面地收集相關證據，匯總并分析評價其合并效應量，以期獲得較為準確的結論。

本Meta分析納入10個病例-對照研究，共計3149例宮頸癌患者和2237例正常對照，涵蓋歐洲及亞洲，并且在亞組分析中，從納入研究的HWE平衡、人種差異、對照組來源等多種因素進行展開，以期更加細致地分析二者之間的相關性。此外，本Meta分析仍然存在一定的不足：①總體納入研究數據相對較少，特別是針對歐洲人群及非洲人群，進而增加研究結果的不確定性的風險；②僅限于-592C>G位點，同一基因啟動子區，以及其他區位的多態性位點未能深入研究；③囿于數據的不足，煙酒史等危險因素的統計未能充分展開，環境-基因交互作用未能得到清晰的解析。

綜上所述，本Meta分析提示，IL-10基因-592C>A位點多態性改變可能會增加罹患宮頸癌的風險，特別是與歐洲人群宮頸癌的易感性有顯著的關聯。但是該結論尚需進一步開展大樣本、高質量的研究加以驗證，以明確IL-10基因-592C>A位點多態性與宮頸癌的相互關系。

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