孕婦血清PIGF、sFlt-1及sEng聯(lián)合使用在預測子癇前期發(fā)病中的診斷價值分析

張 翀,賀 銳,趙翠生,王紅洲

(甘肅省婦幼保健院 臨床檢驗中心,甘肅 蘭州730050)

妊娠期高血壓(GH)和子癇前期(PE)屬于妊娠期高血壓疾病,均在孕20周以后發(fā)病,其中PE因病情重且難以準確預測而備受關注,研究表明PE發(fā)病的早晚與分娩早晚以及疾病預后有密切的關系,越來越多的證據(jù)表明,胎盤促血管形成因子和抗血管形成因子參與了PE的發(fā)病。本研究選擇促血管形成因子的胎盤生長因子(PlGF)和抗血管形成因子的可溶性血管生長因子受體-1(sFlt1)和可溶性內(nèi)皮因子(s-Eng)作為研究指標,檢測其在健康孕母、PE和GH患者血清中的濃度,分析其在子癇前期發(fā)病中的預測和診斷價值。

1 對象與方法

1.1一般資料

本研究采用前瞻性病例對照研究,納入孕20周后初次出現(xiàn)高血壓的孕婦為病例組,共245例,年齡為21-38歲(28.5±3.6),GH組57例,PE組共188例(其中早發(fā)型PE 67例)；每位病例匹配同孕齡,年齡相仿健康孕婦2-3名為健康對照組,共629例,年齡為23-39歲( 28.6±3.7)。

排除標準:異常分娩、吸煙、多胎妊娠、孕期糖尿病、過度肥胖、孕期甲狀腺功能異常、急慢性肝臟疾病等內(nèi)外科合并癥及妊娠并發(fā)癥。

1.2儀器與試劑

酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測用酶標儀為雷杜RT-6500酶標分析儀；血清PLCF、sFlt-1和sEng濃度檢測用試劑盒購于上海藍基生物科技有限公司,具體實驗步驟嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.3方法

1.3.1樣本收集 抽取孕婦空腹靜脈血4 ml,以2 000 g相對離心力離心10 min,取上層血清置-70℃冰箱保存待用。

1.3.2檢測方法 本研究采用ELISA方法定量檢測研究對象血清PIGF、sFlt-1和sEng濃度,計算sFlt-1/PIGF和sEng/PIGF值。

1.3.3中位數(shù)倍數(shù)值(MoM)值的計算 因各篩查指標濃度分布區(qū)間大,對檢測數(shù)據(jù)進行對數(shù)轉化使數(shù)據(jù)分布較為集中；為消除孕周對篩查指標濃度分布的影響,確定孕周各指標中位數(shù)并與孕周進行曲線擬合,確定最優(yōu)曲線,計算出各孕周各指標中位數(shù),利用中位數(shù)倍數(shù)計算公式：MOM=標記物檢測值/同孕周該標記物的中位數(shù)[1],計算出各指標各個MOM 值。

1.4統(tǒng)計學處理

計量資料以中位數(shù)(四分位間距)及均數(shù)±標準差表示,采用SPSS 19.0 軟件進行統(tǒng)計學分析,不同組別間的比較用非參數(shù)Kruskal-Wallis H檢驗進行統(tǒng)計分析,各篩查指標診斷效能的評價應用ROC曲線進行評估,P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1各組PIGFMOM、sFlt-1MOM、sEngMOM、sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM的比較

研究對象血清指標PIGF、sFlt-1、sEng、sFlt-1/PIGF和sEng/PIGF 檢測結果見表1,經(jīng)單因素方差分析 (One-Way ANOVA)顯示,各組孕婦各指標數(shù)據(jù)分布方差不齊,經(jīng)過對檢測數(shù)據(jù)對數(shù)轉化、MoM數(shù)據(jù)標準化后,應用Kruskal-Wallis H檢驗進行對照組、GH組和PE組間的兩兩比較,結果顯示：PE組各指標與GH和正常對照組間均有明顯的統(tǒng)計學差異,P<0.05。GH組與正常對照組間sFlt-1/PIGF MOM指標差異有明顯的統(tǒng)計學意義,P<0.05,其余各指標在這兩組間差異無統(tǒng)計學意義,P>0.05,結果見表2。

2.2各篩查指標預測PE發(fā)病的診斷價值評估

應用ROC曲線分析篩查指標PIGFMOM、sFlt-1MOM、sEngMOM、sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM預測PE發(fā)病的診斷價值,結果顯示：各指標預測188例PE患者的發(fā)病中都有很好的預測診斷價值,并且sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM 的曲線下面積(AUC)更大,診斷價值更高,結果見表3；以上指標在預測67例早發(fā)型PE的發(fā)病中,其曲線下面積均較預測全部PE的優(yōu)勢更為明顯,AUC接近或超過90%,而且sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM的診斷價值也優(yōu)于單獨指標的使用,結果見表4。

表1 對照組、GH組和PE組各篩查指標檢測結果[中位數(shù)(四分位間距)]

表2 對照組、GH組和PE組各篩查指標MOM值濃度比較

注：*表示與對照組比較有統(tǒng)計學差異,P<0.05,△表示與GH 組比較有統(tǒng)計學差異,P<0.05。

表3 應用ROC曲線評價各生化指標診斷PE的應用價值

表4 應用ROC曲線評價各生化指標診斷早發(fā)PE的應用價值

3 討論

與妊娠相關的許多指標其變化與孕周關系密切,因此無論建立正常值的參考區(qū)間還是進行病例對照數(shù)據(jù)的比較,都要充分考慮孕周的因素,不考慮孕周因素而進行的數(shù)據(jù)對比盡管有時體現(xiàn)了本質(zhì)上的差異,但科學性差,這在以往PE的研究中有體現(xiàn)[2-5]。MOM是產(chǎn)前疾病篩查中常用的用于消除孕周影響的數(shù)據(jù)標準化方法,本研究通過對檢測數(shù)據(jù)的對數(shù)轉化和MOM的使用,使數(shù)據(jù)分布更為集中,同時也消除了孕周差異帶來的影響,建立了健康孕婦20-40周孕95%的參考值區(qū)間,為病例組對照組間數(shù)據(jù)的比較打下了基礎。

PE是導致孕產(chǎn)婦死亡的主要原因之一,全球發(fā)病率3%-5%[6],發(fā)展中國家的發(fā)病率為10%左右[7]。盡管目前臨床上缺乏有效的治療方法,但有研究表明孕早期預防性治療可以改變子癇前期的病理生理學變化[8],因此探尋有效、實用的篩查、預測指標十分重要。國外一些前瞻性的研究表明[9-13],PE患者有較低的PIGF濃度和較高的sFlt-1 、s-Eng濃度,并且有較可靠的預測、診斷和鑒別價值。本研究結果顯示反應血管形成和抗血管形成平衡狀態(tài)的sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM的診斷價值更高,ROC曲線下面積(AUC)達到0.87以上,并且有較高的診斷靈敏度和特異性,尤其值得關注的是,sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM指標在預測診斷早發(fā)型PE的價值更高,其ROC曲線下面積在0.9左右及以上,診斷靈敏度和特異性均達到0.93以上。

盡管PE目前的診斷是以血壓升高和蛋白尿為依據(jù),但血壓和蛋白尿在預測疾病進展中缺乏應有的價值；研究表明血管形成因子PIGF、抗血管形成因子sFlt-1和sEng在預測PE的發(fā)病中有較高的應用價值,但以上指標在預測疾病進展和預后的進一步前瞻性研究將是他們進入臨床應用階段的必要理論基礎,也是我們下一步研究的重點。