金姣 陳亞軍(通訊作者)
(南京市婦幼保健院檢驗科 江蘇 南京 210004)
新生兒溶血病(HDN)是一種臨床常見的溶血性貧血病,常發生于胎兒和新生兒時期[1]。我國臨床發病率最高的是ABO血型不合引起的新生兒溶血病,其中檢測O型孕婦血清抗A(B)IgG效價是臨床上預測新生兒溶血病的常用方法[2]。然而這種方法需要在嚴格標準的條件下操作,且檢測出的IgG效價和新生兒溶血病之間仍存在一定非相關性[3]。為了提供更準確預測ABO血型引起的新生兒溶血病,本研究在已知孕婦血清中抗A(B)IgG效價和是否發生新生兒溶血病的基礎上,我們進一步檢測孕婦及其新生兒血清中抗A(B)IgG各亞類的含量,探究孕婦血清中抗A(B)IgG亞類與HDN之間的關系,現報告如下。
1.1 一般資料
選取2015年1月—2017年12月在我院檢測的120例血型不合的O型孕婦及其新生兒血樣作為標本來源。其中孕婦年齡在22~32歲之間,平均年齡(26.4±3.1)歲,孕齡28~35W,身體健康,無妊娠異常及并發癥;新生兒為足月生產,且排除其他異常新生兒,在出生48h內進行樣本送檢。
1.2 方法
(1)新生兒三項檢測:直接抗球蛋白實驗(DAT),測定血清中游離抗體和紅細胞抗體釋放實驗(熱放散法)。(2)制備血清中抗A(B) IgG:采用吸收和放散實驗來制備血清中抗A(B) IgG。(3)采用ELISA法檢測血清樣本中抗A(B) IgG各亞類含量:將標準品、質控樣品、孕婦以及新生兒血清中抗A(B) IgG樣本,按一定順序加入IgG亞類含量檢測板,在37℃條件下溫育反應1h;洗滌三次后再加入酶標抗體,在37℃條件下溫育反應1h;洗滌三次再加入顯色液,避光顯色0.5h;用酶標儀檢測樣本在405nm處的吸光度值,通過標準曲線可以得到各樣本血清中抗A(B) IgG各亞類含量。
1.3 HDN診斷標準
ABO母嬰血型不合,臨床表現為新生兒三項檢測為陽性,或紅細胞抗體釋放實驗和直接抗球蛋白實驗(DAT)其中一項為陽性。
1.4 統計學分析
2.1 按照HDN診斷標準,發現本次研究中120例新生兒標本中有53例HDN陽性,67例HDN陰性。
2.2 采用ELISA法檢測120例新生兒血清樣本中抗A(B)IgG中各亞類含量,見表1。統計結果顯示:新生兒中,HDN(+)組中IgG1水平要高于HDN(-)組,結果具有顯著性差異(P<0.05);而在IgG2、IgG3和IgG4水平上,兩組結果之間無顯著性差異(P>0.05)。

表1 新生兒HDN(+)組和HDN(-)組中IgG各亞類含量(ng/mL)
2.3 采用ELISA法檢測120例孕婦血清樣本中抗A(B)IgG中各亞類含量,見表2。統計結果顯示:孕婦中,HDN(+)組中IgG1水平高于HDN(-)組,結果具有顯著性差異(P<0.05);而在IgG2、IgG3和IgG4水平上,兩組結果之間無顯著性差異(P>0.05)。

表2 孕婦HDN(+)組和HDN(-)組中IgG各亞類含量(ng/mL)
新生兒溶血病起因為母嬰血型不合,臨床上可致早期流產,表現為新生兒黃疸、貧血、胎兒水腫,嚴重可導致嬰兒死亡,給家庭和社會帶來巨大負擔[4]。因而,準確預測新生兒溶血病的發生,可以為臨床采取有效、及時的預防和治療手段提供可能。
本次研究結果表明,孕婦和新生兒中,HDN(+)組中IgG1水平高于HDN(-)組,結果具有顯著性差異;而在IgG2、IgG3和IgG4水平上,兩組結果之間無顯著性差異(P>0.05)。結果表明孕婦血清過高是引起HDN的主要因素。
綜上所述,孕婦血清中抗A(B)IgG1水平過高是引起ABO血型不合的主要原因,因而檢測孕婦血清中抗A(B)各IgG亞類含量可以有效地預測新生兒溶血病的發生,該方法值得臨床進一步推廣。