吉林省不同產地北蒼術的質量評價研究

肖春萍，夏 炎，張 強

（長春中醫藥大學，長春 130117）

藥用植物是中藥材的重要來源，其有效利用為人類健康做出了巨大貢獻。中藥產業是中國最具特色、優勢和發展潛力的產業之一。為了加快我國中藥產業的現代化和國際化進程，國家啟動了“中藥現代化科技產業行動計劃”，并提出中藥“安全、有效、穩定、可控”的發展目標[1]。由于中藥材的質量優劣、產量高低及規范化栽培程度不同，直接影響中藥的臨床療效及中藥產品的質量[2]。研究[3-11]表明，不同產地甚至同一產地的中藥材藥效成分及其含量的不穩定，嚴重影響了中藥產品質量的穩定性及其臨床療效的發揮，如許多植物類中藥材主要藥效成分含量不同產地相差很大，甚至達到數倍之差。為此，闡明不同產地植物類中藥材質量變化規律，進而實現中藥材質量的穩定可控，已成為藥用植物資源評價研究領域的重大科學問題之一。

蒼術為多年生菊科植物北蒼術Atractylodes chinensis（DC.） Koidz.和茅蒼術Atractylodes lancea （Thunb.）DC.的干燥根莖[12]。其中，北蒼術喜溫涼、潮濕氣候，耐寒能力較強，但忌強光照射，主要分布于我國吉林省、遼寧省及河北省等省區[13]。北蒼術藥材中的化學成分主要是揮發油，如β -桉葉醇和蒼術素是蒼術藥材中最主要的2大類活性成分[14-16]。北蒼術主要具有影響消化系統、降血糖、抗炎、利尿、抗腫瘤及增強免疫等功效[17-18]。目前，隨我國中醫藥產業迅猛發展，北蒼術藥材需求量不斷增加，北蒼術野生資源量日益枯竭，人工栽培已成為蒼術藥材的主要來源。然而，各地種植的北蒼術藥材是否達到道地藥材或中藥材相關規定的要求，從而保證臨床用藥安全有效是當前爭議的熱點。

相關文獻[9]表明，中藥材的化學成分隨產地、采收季節和加工方法的不同而變化，并進一步顯著影響療效。因此，比較吉林省不同產地北蒼術質量是評價北蒼術產地的重要依據。蒼術素為蒼術藥材中活性成分之一，因其結構穩定，2015年版《中華人民共和國藥典》[12]將其作為藥材質量的重點評價指標之一。本研究主要采用性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別及含量測定等鑒定手段，分別對吉林省8個北蒼術產地（敦化、蛟河、柳河、通化、集安、靖宇、舒蘭）種植的北蒼術藥材質量進行測定，旨在為吉林省區域內北蒼術的合理種植區域選擇提供理論參考，也為北蒼術品質評價提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 3年生北蒼術的原藥材，分別采自吉林省敦化、蛟河、柳河、通化、集安、靖宇、舒蘭、白山8個產地，即有8份北蒼術樣品，采集時間為2016年9月，由長春中醫藥大學藥學院張強副教授鑒定為菊科植物北蒼術（Atractylodes chinensis（DC.）Koidz.）的干燥根莖。

1.1.2 儀器及試劑 島津LC-2010A HT高效液相色譜儀（島津有限公司），奧林巴斯BX51型顯微鏡（北京奧林巴斯銷售服務有限公司），FA1004B 型分析天平（上海佑科儀器儀表有限公司）。北蒼術對照品蒼術素（蒼術素≥98%，20 mg，上海源葉生物科技有限公司），甲醇（色譜純，賽默飛世爾科技有限公司），其他試劑均為分析純。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品的預處理 8份吉林省不同產地北蒼術樣品均在統一條件下處理，除去其表面泥土，洗凈，潤透，切厚片，干燥。

1.2.2 性狀鑒別 參照《中華人民共和國藥典》[12]規定，觀察不同產地北蒼術藥材的形狀、大小、色澤、表面、質地及氣味等特征，對北蒼術樣品進行性狀鑒別。

1.2.3 顯微鑒別 參照文獻[12]規定，分別取8份吉林省不同產地的北蒼術藥材粉末少量，放置于載玻片上，滴加1～2滴水合氯醛試液，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡下對北蒼術樣品進行顯微鑒別。

1.2.4 薄層鑒別 參照文獻[12]蒼術項下的薄層法（通則0502），配置對照品及供試品溶液，并進行薄層色譜鑒別。供試品色譜中，在與北蒼術對照品色譜相應的位置上，顯示相同顏色的斑點。

1.2.5 含量測定

1.2.5.1 色譜條件 色譜柱：SinoChrom ODS-BP（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（79：21）；流量體積：1.0 mL/min；檢測波長：340 nm；色譜柱溫度：35 ℃；進樣體積：10 μL。

1.2.5.2 對照品溶液的配制 精密稱取蒼術素對照品2.01 mg于燒杯中，加甲醇（色譜純）定量轉移至100 mL容量瓶中，配制成濃度為20.1 μg/mL的對照品溶液。

1.2.5.3 供試品溶液的配制 取北蒼術粉末（過3號篩）0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液過0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。

1.2.5.4 線性關系考察 取1.2.5.2項下的對照品溶液，分別精密吸取 2 、8 、14 、20 、24 、30 μL，依次注入高效液相色譜儀，按1.2.5.1項下所示的色譜條件測定，以對照品的含量（X）為橫坐標，峰面積(Y)為縱坐標，得回歸方程為Y = 15 619 545.54 X - 19 887.47，r = 0.999 9，蒼術素對照品在0.04 ～0.6 μg范圍內呈良好的線性關系。

1.2.5.5 精密度試驗 取1.2.5.2項下的蒼術對照品溶液，連續進樣6次，每次進樣量為10 μL，測得其峰面積并計算RSD值為0.04%，表明儀器精密度良好。

1.2.5.6 穩定性試驗 取同一供試品溶液，分別于0 、3 、6 、9 、12 、15 、18 、24 h 時間段依次進樣，每次進樣量為10 μL，測定其峰面積并計算RSD值為0.13%，表明供試品溶液在0～24 h內穩定。

1.2.5.7 重復性試驗 取同一產地蒼術樣品粉末6份，依1.2.5.3項下的方法制備，依次注入高效液相色譜儀，按1.2.5.1項下所示的色譜條件測定，計算RSD值為1.5%，說明試驗方法重復性良好。

1.2.5.8 加樣回收率試驗 取同一產地蒼術樣品粉末6份，每份0.2 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，向其中加入適量的蒼術素標準品，按1.2.5.3項下的方法制備，測定其蒼術素的含量，計算回收率，其RSD值為1.27%，說明樣品回收率良好。

1.2.5.9 樣品含量測定 分別取8個不同產地的蒼術藥材粉末，照1.2項下方法處理檢測，平行3份，計算吉林省不同產地北蒼術樣品中所含蒼術素的百分含量。

2 結果

2.1 性狀鑒別結果 8份吉林省不同產地的北蒼術樣品的性狀鑒別結果，見表1。

表1 吉林省不同產地北蒼術藥材的性狀鑒別

表1結果表明，北蒼術樣品呈疙瘩塊狀，長約為4～9 cm，直徑1～2.5 cm。表面黑棕色，除去外皮后，其表面為黃棕色，質地較疏松，斷面有明顯的黃棕色油點。氣清香，味辛、苦。吉林省不同產地蒼術樣品在外觀顏色、斷面、氣味及質地都有一定程度的差異，說明吉林省8個產地蒼術藥材的質量不同。

2.2 顯微鑒別結果 8份吉林省不同產地的北蒼術樣品的根莖粉末顯微鑒別結果表明，不同產地北蒼術樣品中均可見草酸鈣針晶、木纖維石細胞、導管、菊糖及油管碎片。其中，草酸鈣針晶較為細小，不規則的充塞于薄壁細胞中；纖維常成束存在，長梭形，直徑約為40 μm，壁甚厚，木質化；導管多為網紋導管，較短；石細胞數量較多，呈多角形或類長方形，壁極厚，木質化，有時同木栓細胞相連，直徑約為20～80 μm；菊糖多數，呈塊狀或扇形，其表面有放射狀的紋理；油管碎片多見。

2.3 含量測定結果 8份吉林省不同產地的北蒼術樣品中所含蒼術素的含量結果，見表2。

表2 不同產地蒼術中蒼術素含量測定結果

根據《中華人民共和國藥典》[12]規定，蒼術藥材含蒼術素不得少于0.3%。研究結果表明，吉林省敦化、靖宇及白山地區的蒼術樣品中蒼術素含量小于0.30%，說明敦化、靖宇及白山3個產地本次提供的北蒼術樣品質量不合格，吉林省其他6個產地蒼術藥材質量合格，其中通化和集安種植的北蒼術質量最好，蒼術素含量分別為0.77%和0.80%。

3 討論

隨著人們對中藥材關注度的提升，野生中藥資源被不斷破壞，為了使中藥材資源能得以持續發展，人工栽培技術不可或缺[20]。目前，人工栽培的中藥材質量參差不齊，臨床藥效穩定性差。為了使北蒼術藥材栽培品能發揮更好的藥用價值，人們不斷地了解北蒼術藥材本身的生長習性，尋找其適宜生長的環境。本試驗采集吉林省內8個產地北蒼術藥材，依據2015年版《中華人民共和國藥典》中關于蒼術藥材的鑒別方法，采用性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別和含量測定的方法對吉林省內8個不同產地的8份北蒼術藥材進行質量評價，對比分析不同產地北蒼術藥材質量的差異。結果表明，不同產地北蒼術中蒼術素的含量分別為0.24%（敦化）、0.35%（蛟河）、0.58%（柳河）、0.77%（通化）、0.80%（集安）、0.27%（靖宇）、0.45%（舒蘭）、0.22%（白山），其中通化和集安地區的北蒼術質量最好。通化、柳河、集安、蛟河、舒蘭5個產地的北蒼術藥材的各項指標均符合《中華人民共和國藥典》規定，而敦化、白山、靖宇3個產地的北蒼術藥材中蒼術素的含量未達到藥典要求，本次實驗選取的通化、集安等5個產地的北蒼術藥材合格，敦化、靖宇等3個產地的北蒼術藥材不合格。

同時，試驗還綜合考查了8個不同產區的氣候、降雨量等環境因素，發現通化、集安一帶降雨量較小，溫差變化不明顯；白山一帶降雨量大，白天有強光照射，晚上濕度很高，對比蒼術喜陰涼干燥，怕高溫高濕環境的生長習性，綜合分析表明，北蒼術生長發育及質量形成受到環境、氣候等各方面因素的影響，導致北蒼術中蒼術素的含量有所不同。此外，影響北蒼術質量不一的原因也可能是因為各地區人工種植區域、播種時間、種植方式等因素的影響。該試驗的完成為今后吉林省內北蒼術的種植和發展提供一定的理論基礎，同時也為北蒼術藥材臨床用藥的選取提供了一定的依據。