EDTA抗凝對凝聚胺交叉配血結果的影響分析

黎海江，馮學冠，符曉玲，楊藝偉，黃 植

交叉配血是輸血前必須檢查的項目之一，其結果的準確性直接影響著輸血治療的安全。近年來，凝聚胺試驗廣泛應用于交叉配血中，并且與其他交叉配血方法如卡式法、微柱凝膠法等比較，具有靈敏度和特異性高、配血符合率高的優點[1-2]。但是在交叉配血時，由于補體的激活，可能導致溶血或凝集不全的現象發生，干擾試驗結果。EDTA抗凝劑可與鈣離子及鎂離子螯合，從而抑制補體的激活，可減少溶血的發生，使得交叉配血的成功率和準確性增高[3]。目前有關EDTA抗凝血樣對凝聚胺交叉配血結果影響的相關報道較少，本研究比較了采用EDTA抗凝與無抗凝劑血樣的凝聚胺交叉配血結果，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 血樣采集 選擇醫院2017年1～12月進行輸血治療的患者120例，輸血治療前每例抽取靜脈血液標本2管，各2 ml。1管采用EDTA抗凝真空采血管（江西洪達醫療器械集團有限公司，規格2 ml），1管為不加任何抗凝劑的真空采血管（生產廠家及規格同上），4℃保存，6 h內完成測定。排除肝硬化、血液系統疾病、惡性腫瘤患者。其中血型鑒定為A型、AB型、B型、O型各30例；男性62例，女性58例；年齡 18～72（43.2±23.6）歲。 本研究已通過醫院醫學倫理委員會審核批準，所有患者在納入研究前均簽署知情同意書。

1.2 主要試劑 凝聚胺試劑盒購自上海博普生物技術有限公司，內含低離子強度溶液（LIM）、凝聚胺溶液、重懸液、陽性對照及陰性對照。抗A、抗B標準血清購自北京中聯安華科技公司。

1.3 配血實驗 對每管樣本與同血型及不同血型供血樣本進行凝聚胺交叉配血，具體操作步驟按照試劑盒說明書進行。結果判定標準：樣本混合后1 min內不能被懸浮液散開為凝集；無紅細胞凝集或1 min內能被懸浮液散開，顯微鏡下觀察證實紅細胞無凝集為不凝集；凡出現肉眼可見的溶血判定為溶血。

1.4 統計學方法應用SPSS16.0統計軟件進行分析，每例2管血樣結果以配對資料形式表示，進行配對資料χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 同血型交叉配血結果及溶血發生率 同血型交叉配血結果顯示，每例2管血樣主側與次側均無凝集；EDTA抗凝血樣主側與次側均無溶血發生，而無EDTA血樣中有6例主側與次側均發生溶血，二者溶血率有顯著差異（P＜0.05，表1）。

表1 同血型交叉配血結果比較［n（%）］

2.2 不同血型交叉配血結果及溶血發生率 分別將每管血樣與其他3種不同血型進行交叉配血，結果發現，無論有無EDTA抗凝，血樣主側或次側均出現凝集；EDTA抗凝血樣主側或次側均無溶血發生，而無抗凝血樣中有14例次主側或次側均發生溶血，二者溶血率也有顯著差異（P＜0.05，表2）。

表2 不同血型交叉配血結果比較［n（%）］

3 討論

凝聚胺同血型交叉配血相合表現為無凝集無溶血，只有在這種情況下，輸血是最安全可靠的[4]。但由于多種因素影響，如血樣中存在不規則抗體、凝集素、自身抗體、溶血、抗凝劑等，可能會造成與同血型交叉配血不合發生，影響輸血的可靠性和安全性[5]。本組資料對每位患者均采取有無EDTA抗凝的采血管采取2管血樣，構成配對資料，避免了血樣本身因素對交叉配血結果的影響，更具有對比性。

EDTA是一種常用的血液抗凝劑，用于血型鑒定或交叉配血時，能夠有效抵抗血液的自身凝集，保證結果的準確性。本研究發現，有無EDTA抗凝血樣與同血型交叉配血時均不出現凝集，與不同血型的供血交叉配血時均發生凝集，表明EDTA抗凝不影響交叉配血的結果，與文獻報道一致[6]。然而，無抗凝血樣在與同血型或不同血型交叉配血時，溶血的發生率較EDTA抗凝血樣均增高，表明EDTA抗凝有助于防止溶血的發生。交叉配血時，溶血的發生主要原因在于補體的激活，補體的激活需要鈣離子及鎂離子的參與，而EDTA能與鈣鎂離子相結合，從而抑制補體的激活，抑制溶血的發生。有研究表明，EDTA抗凝較加熱法更有助于抑制補體的激活，減少溶血的發生[3]。本組資料中，EDTA抗凝血樣無論與同血型或不同血型供血樣本交叉配血過程中均無溶血現象發生，表明EDTA抗凝有助于減少凝聚胺交叉配血過程中溶血的發生，增加了交叉配血結果的可靠性。

綜上所述，EDTA抗凝有助于防止凝聚胺交叉配血過程中溶血的發生，提高結果的準確性和可靠性，值得臨床推廣應用。