美沙拉嗪聯合康復新液治療活動期潰瘍性結腸炎療效及對炎癥因子的影響

胡穎，陳元旺

(江西省九江市第一人民醫院，1、藥劑科；2、消化內科，九江 332000)

潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)是一類以腸道炎癥為主要表現的慢性復發性腸道自身免疫性疾病。其具有較高病死率和癌變率，現已被世界衛生組織列為現代難治病之一，近年在我國其發病亦呈逐年增高趨勢[1]。但其病因和發病機制尚不清楚，其發生可能與遺傳、免疫功能紊亂、感染、環境等多種因素有關，作為自身免疫性疾病，細胞因子如白介素 10（interleukin-10，IL-10）、白介素 17（interleukin-17，IL-17）以及新型細胞因子白介素33 （interleukin-33，IL-33） 和 白 介 素 35（interleukin-35，IL-35）等在UC致病中扮演重要作用[2-6]。目前臨床治療主要采用氨基水楊酸、糖皮質激素、免疫抑制劑及中藥灌腸等手段，其中氨基水楊酸類藥物美沙拉嗪可顯著抑制腸道炎癥而在UC治療中成為首選[7，8]。此外，康復新液灌腸可靶向給藥，藥物吸收率高且不良反應較少，已經成為輔助治療UC的方法[9]。故本研究擬探究美沙拉嗪聯合康復新液治療活動期UC的療效及對炎癥細胞因子IL-10、IL-17、IL-33和IL-35的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2015年2月-2017年11月于九江市第一人民醫院消化內科住院且經腸鏡明確診斷的UC患者56例，診斷均符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2012年廣州）》中關于活動期UC的診斷標準[10]，且病變部位為直腸及直乙狀結腸。排除出現穿孔、癌病及大出血等嚴重并發癥患者；排除合并克羅恩病及結腸息肉等消化系統疾病患者；并發其他臟器疾病或腫瘤患者；妊娠期或者哺乳期女性；重度和緩解期UC患者。56例UC患者隨機分為治療組A 28例，其中男15例，女13例，平均（41.6±4.1）歲，病程（1.19±0.32）年，平均體重（38.64±3.27）kg/m2， 輕度 UC/中度 UC 為 11 例/17例；治療組B 28例，其中男14例，女14例，平均（42.1±3.9）歲，病程（1.18±0.35）年，平均體重（38.37±3.92）kg/m2，輕度 UC/中度 UC 為 12 例/16 例。 同時選取同期健康體檢者30例作為對照組，其中男15例，女 15 例，平均（41.9±3.7）歲，平均體重（38.28±3.59）kg/m2。治療組A、治療組B和健康對照組在性別構成比、年齡及體重等一般資料間均無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。治療組A和治療組B間病程及輕度/中度比亦無統計學差異（P＞0.05）。

1.2 治療方案 所有患者均給予基礎治療如糾正水電解質、酸堿失衡、改善營養狀態等。治療組A在基礎治療基礎上給予口服美沙拉嗪1.0g，tid。治療組B在治療組A的基礎上聯合應用康復新液灌腸治療，即生理鹽水150ml及康復新液30ml灌腸，每晚1次。兩組治療周期均為30d。

1.3 標本采集及處理 抽取治療組A、治療組B和健康對照組治療前清晨空腹靜脈血3ml于干燥管中，3000rmp 10min離心分離血清于-80℃冰箱保存。30d治療周期結束后抽取治療組A和治療組B患者清晨空腹靜脈血3ml于干燥管中，3000rmp 10min離心分離血清于-80℃冰箱保存。兩次采集血清用于檢測治療前后血清IL-33、IL-35、IL-10及IL-17的濃度。

1.4 血清 IL-33、IL-35、IL-10及 IL-17的濃度測定 Human IL-33 DuoSet ELISA（R&D，DY3625B）、Human Interleukin 35，IL-35 ELISA Kit（上海生工，D710723）、Human IL-17 DuoSet ELISA Kit（R&D，D1700） 及 Human IL-10 Quantikine ELISA Kit（R&D，D1000B）用于檢測血清 IL-33、IL-35、IL-10及IL-17的濃度。所有步驟嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.5 療效評價 治療后觀察兩組患者臨床療效。療效評價標準如下：顯效即癥狀、體征基本消失，結腸鏡檢糜爛消失、潰瘍愈合、黏膜恢復正常，大便常規檢查陰性；有效即癥狀、體征顯著改善，結腸鏡檢黏膜輕度炎癥、假息肉形成，大便常規檢查陰性；無效即癥狀、體征無改善或惡化，結腸鏡檢無改善或加重。總有效率=（顯效+有效）/總病例數。此外，腸鏡效果評價依據Barons分級標準進行評估，即顯效：治療后進步2級或明顯緩解；有效：治療后進步1級；無效：治療后無進步或加重。總有效率=（顯效+有效）/總病例數。

1.6 統計學處理 利用SPSS 19.0統計軟件分析數據，計量資料數據以（±s）表示，兩樣本比較采用獨立樣本t檢驗，治療前后同組比較采用配對t檢驗；計數資料采用百分比表示，組間比較采用卡方檢驗，以P＜0.05視為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 治療組A和治療組B臨床療效及腸鏡療效比較 經過30d治療后，治療組A的臨床療效中總體有效率顯著低于治療組B的患者，差異顯著（χ2=4.462，P=0.035），見表1。此外，通過腸鏡療效評價亦顯示治療組A的總體有效率顯著低于治療組B的患者，差異顯著（χ2=4.909，P=0.027），見表 2。

表1 兩組患者臨床療效比較

表2 兩組患者腸鏡療效比較

2.2 兩組治療前后血清IL-33、IL-35、IL-10及IL-17濃度比 治療后A組和B組血清IL-33和IL-17水平均顯著低于治療前水平，但治療后A組血清IL-33和IL-17均高于治療后B組水平，差異均有統計學意義（P＜0.05）；此外，治療后A組和B組血清IL-35和IL-10則均顯著高于同組治療前水平，但治療后A組血清IL-35和IL-10均低于治療后B組水平，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

3 討論

UC病因學至今仍不清楚，當前觀點認為易感患者腸黏膜局部屏障被破壞，菌群抗原移位誘發不同類別細胞因子分泌失衡，引起免疫功能紊亂，進而產生急慢性腸道炎癥。其中多種細胞因子扮演的角色尤為關鍵[11，12]。既往大量研究也相繼證實諸如白介素 6 （interleukin-6，IL-6）、 白介素 1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素 8（interleukin-8，IL-8）及腫瘤壞死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等炎癥性細胞因子在UC患者的腸粘膜和血清中存在異常變化，且參與了UC發病和加重過程。此外，細胞免疫中T輔助細胞2（T helper cell2，Th2）樣免疫效應在UC發病中被認為是主要免疫學機理，近期研究還發現T輔助細胞17（T helper cell 17，Th17）/調節性 T 細胞 （Regulatory T cell，Treg）細胞免疫平衡同樣參與UC發生發展過程，而由Th17和Treg分泌的主要效應細胞因子發揮促炎的IL-17和發揮抑炎的IL-10均在UC患者中存在異常[13]。隨著新型細胞因子逐步被發現，其與UC的關系也被全球范圍的研究者進一步證實，其中IL-33和IL-35即為被證實與UC關系密切的新型細胞因子。IL-33在UC患者中發揮促炎和抑炎雙重效應，即可加重腸道炎癥，可減輕炎癥反應，促進腸粘膜愈合[14]。但其在UC患者血清中的變化如何，仍需要進一步探究。OI Saadah等[15]的研究證實兒童UC患者血清IL-33顯著增高，這與本研究在成人UC血清中的研究結果類似。此外，IL-35是新發現的炎癥抑制細胞因子，為IL-12家族新成員。其在類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病患者中均顯著下降，并與疾病嚴重程度密切相關[16，17]。本研究亦發現UC患者血清IL-35水平下調，這與Li Y等的發現一致[18]。以上結果表明 IL-17、IL-10、IL-33和 IL-35通過不同途徑參與了UC病因學過程。

表3 兩組治療前后血清IL-33、IL-35、IL-10及IL-17濃度的變化

目前UC治療的主要常用藥物之一為美沙拉嗪，常見用藥途徑為口服。與口服用藥相比，灌腸給藥途徑可直接靶向病灶，使得藥物吸收效果更好，作用時間延長。因此，當前臨床采用口服結合灌腸給藥的方式治療UC。但治療方案的療效報道還不一致，有待進一步探究。且探究聯合給藥的潛在機制多于療效評估和疾病監測具有重要意義。康復新液是美洲大蠊提取成分，其可通過抑制白介素、組織因子和前列腺素等促炎因子分泌，進而促進潰瘍愈合。既往研究也證實康復新液聯合美沙拉嗪可阻滯UC患者IL-1、IL-6、IL-8及TNF-α的細胞因子的釋放[19，20]。本研究進一步證實美沙拉嗪聯合康復新液治療UC療效良好，并可有效改善與UC發病密切相關的細胞因子IL-17和IL-33與IL-10和IL-35等促炎-抑炎細胞因子間的平衡，對于其療效監測具有重要價值。