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不同品種菊花總黃酮的含量比較

2018-10-24 15:31:44劉茂泉
科學與財富 2018年26期

摘 要:菊花有很好的藥用和食用價值,在杭州也算特產,桐鄉的種植面積較大。本文以杭州萬向學院花圃采摘的九種菊花品種為實驗材料,研究九種菊花的總黃酮含量,比較每個菊花品種的質量差異,為制定菊花的相關質量標準提供相應的理論參考,為選育菊花的優良品種提供科學依據。

關鍵詞:不同品種菊花;總黃酮;含量比較

菊花,Dendranthema morifolium(Ramat. )Tzvel. 為菊科菊屬多年生的宿根草本植物,是中國的傳統花卉,有極高的觀賞價值,也具有很高的藥用價值。臨床上多用于治療風熱感冒、頭暈目眩、眼目昏花、目赤腫痛等疾病。除此之外菊花還具有抑菌消炎、調節免疫系統、抗疲勞等作用,近年來的新發現菊花對肝的保護作用、鎮痛作用。黃酮成分具有抗衰老和抗菌抗病毒作用。

1.藥用菊花的化學成分

菊花中的有效成分主要包括三類:黃酮類、揮發油、多糖等。隨著近幾年檢測方法以及提取工藝的提高,對于菊花的黃酮類成分研究越來越深入。從菊花中已經分離得到的黃酮類成分有香葉木素、香葉木素 7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、金合歡素7-O-β-D-葡萄糖苷、金合歡素 7-O-(6″-O-乙酰)-β-D-葡萄糖苷、金合歡素、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素和異澤蘭黃素。

2.菊花的總黃酮測定方法構建

2.1建立菊花的種質資源圃

菊花是藥材,廣泛應用于醫藥和生活等方面,本次研究的菊花樣品是我院花圃種質資源圃中選取9個不同菊花花序的品種,進行總黃酮的測定,相對來說貯藏時間較短,成分較為完整。先是菊花殺青1分鐘,然后放入烘箱干燥再粉碎,然后裝袋標記。

2.2 菊花總黃酮的測定方法

不同栽培類型的品種中的菊花總黃酮含量存在明顯的差異,因此采用高效的提取工藝是非常重要的。通常采用回流提取法、超聲提取法和60℃水溫恒溫萃取法。除了這些提取方法還有一些別的提取方法,如索氏提取法、超臨界流體提取法等等,而方法的選擇是根據測定的化學成分而定的。測定總黃酮的最佳方法就是超聲提取法。相比普通的回流提取更加節能、省時、高效等優點。

2.3 儀器與試藥及菊花品種

紫外-可見分光光度計;精確到0.0001g的電子天平;蘆丁對照品。1%氫氧化鈉溶液,10%硝酸鋁溶液, 5%亞硝酸鈉溶液,70%乙醇溶液。所用的水均為蒸餾水,試劑均為分析純。采集品種有錦菊1號(區試)、早小洋菊(區試)、金菊3號(區試)、金絲黃菊、婺源黃菊、大洋菊、金菊1號、小黃菊、早小洋菊。

2.4 定制標準曲線

首先要將蘆丁對照品配成溶液濃度為0.1992mg/ml。精密稱取蘆丁對照品0.0996g,用無水甲醇溶解,轉移入50ml容量瓶中,用無水甲醇定容至50ml刻度線,搖勻。精確移取5.0ml到50ml容量瓶中,用無水甲醇定容到50ml,搖勻。準確吸取該蘆丁對照品溶液0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml分別移入10ml的容量瓶中,加甲醇至3.5ml,先加入5%亞硝酸鈉溶液0.5ml,搖勻,放置6分鐘后再加入10%硝酸鋁溶液0.5ml搖勻,放置6分鐘,最后加入1%氫氧化鈉溶液5ml,搖勻,用水定容至10ml刻度線,放置12分鐘后,以空白溶液(不加蘆丁對照品,直接用無水甲醇)為參比,在波長510nm出測吸光度,得到方程式:Y=10.129C-0.0065(r=0.9992)。線性范圍:0.212~0.742mg/ml。

2.5樣品液的制備

實驗所需的試液都要提前準備。取藥材0.2500±0.0010g,精確稱定重量,放入具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇25ml,密塞,稱定重量,并記錄,超聲處理40分鐘,放置冷卻,再稱定重量,用70%乙醇補足損失的重量,再搖勻,過濾,取續濾液1ml,用70%乙醇定容于10ml容量瓶至刻度線,從中取3.5ml,移入10ml的容量瓶種,分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.5ml,搖勻,放置6分鐘后分別加10%硝酸鋁溶液0.5ml搖勻,放置6分鐘,再分別加1%氫氧化鈉溶液5ml,搖勻,用水定容至10ml刻度線,放置12分鐘后,以空白溶液(不加菊花超聲過濾的續濾液,用70%乙醇代替)為參比,在波長510nm出測吸光度。并記錄數據。

2.6重復性實驗

精密稱取同一樣品2份,按含量測定方法,重復測定總黃酮的含量,結果RSD小于5%,實驗重復性良好。

3.數據分析

每一種樣品是稱取2份做重復性實驗,測定數據分別為重復1、重復2。結合重復1、重復2的數據RSD小于5%則為合格,并記錄,若數據RSD大于5%則為不合格,樣品需要重復實驗,表格中的數據均為重復性實驗合格。測定結果見表。

%,去掉最高值最低值,中間水平大約在7.2281%之間。其中每個品種都做了2份重復性實驗,達到重復性合格才放到表格之中。

4.總結

所有樣品的總黃酮含量在5.3899 %~9.6367%之間,以婺源黃菊最高,小黃菊最低,錦菊1號(區試)、早小洋菊(區試)、婺源黃菊、金菊1號、早小洋菊在7%以上,通過本研究,得出婺源黃菊的總黃酮含量上較有優勢,為選育高總黃酮菊花的優良品種提供科學依據。

參考文獻:

[1]陳志蓮,不同貯藏期,不同品種菊花中總黃酮的含量比較[J].基層中藥雜志,2001,15(05):18-19.

[2]楊銘,吳志誼,吳川,馬寶娟. 可見光及紫外光分光光度法測定菊花總黃酮含量的研究[J].廣東化工,2007,34(04):112-114.

[3]賈凌云,孫毅,王春陽,孫啟時. 菊花總黃酮提取工藝研究[J] .中藥材,2003,26(01):35-37.

作者簡介:

劉茂泉(1968、2--),男,漢族,浙江杭州人,講師,碩士,主要從事園藝植物生產技術研究。

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