含馬兜鈴酸類中藥材中馬兜鈴總酸的含量

李紅妍

摘 要：馬兜鈴酸是一種腎毒素，具有一定的生理活性，但也能造成腎小管大量喪失，導致腎衰竭。在應用含馬兜鈴酸類中藥材時，應當嚴格控制其用量，盡可能避免其毒副作用。本文基于一種馬兜鈴總酸的含量測定方法，測定目前市售的幾種含馬兜鈴酸類中藥材中馬兜鈴總酸含量，以指導臨床用藥。

關鍵詞：馬兜鈴酸 含量 中藥材

中圖分類號：R282 文獻標識碼：A 文章編號：1003-9082（2018）10-00-01

馬兜鈴酸為硝基菲類有機酸類化合物，天然存在于諸如馬兜鈴屬與細辛屬等馬兜鈴科植物中，此外，在依靠吸食這類植物生存的蝴蝶體內，也存有一定量的馬兜鈴酸。此類馬兜鈴科植物曾廣泛地被中醫作為原生藥材入藥。但同時馬兜鈴酸也是一種較為嚴重的致病因素，有相關的文獻報道，馬兜鈴酸是一種腎毒素，可導致馬兜鈴酸腎病等嚴重疾病，同時還具有致癌作用及致突變作用。2017年10月27日，在世界衛生組織國際癌癥研究機構公布的一份致癌物清單中，馬兜鈴酸、含馬兜鈴酸的植物均在其列。近年來國內外的臨床治療中，因服用過量的馬兜鈴酸而導致腎衰竭的病例也不在少數。

一、測定方法

本次測定以馬兜鈴總酸的含量為指標，用紫外分光光度法測定市售的不同產地含馬兜鈴酸類中藥材中馬兜鈴總酸含量。紫外分光光度法是一種較為常用的定量測定、鑒別與雜質檢查方法，其原理是通過測定待測物質處在不同波長時的吸光度獲得待測物質的吸收光譜，結果以繪制波長與吸光度之間的關系圖呈現。與其他測定方法相比較，紫外分光光度法具有較高的靈敏度，測定工作所涉及的儀器設備較為簡單，操作也較為方便，選擇性好，同時能夠較快地獲得結果，因此得到了較為廣泛的應用。

本次測定選擇的紫外可見分光光度計儀器型號為SP-752型，所測中藥材為購于江蘇等地的青木香，購于陜西等地的馬兜鈴，購于吉林等地的關木通，購于東北等地的遼細辛。無水乙醇、甲醇、甲酸、乙酸乙酯、鹽酸均為分析純。

二、測定步驟及結果

馬兜鈴酸Ⅰ和馬兜鈴酸Ⅱ在馬兜鈴科植物中的含量相對較高，二者被認為是馬兜鈴屬以及細辛屬植物產生毒素、致癌的重要因素。在進行待測材料的測定前先完成馬兜鈴酸Ⅰ對照品溶液的制備。精密稱定馬兜鈴酸I對照品，用無水乙醇配置濃度分別為0.03，0.025，0.02，0.015，0.01，0.005mg/mL的對照品溶液，檢測波長為390nm，用紫外可見分光光度計測定此時的吸光度，并以馬兜鈴酸Ⅰ的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標繪制曲線，結果發現在該范圍內，馬兜鈴酸Ⅰ的濃度與其吸光度具有良好的線性關系。

在進行供試品溶液的制備時，取適量藥材生品粉末，精密稱定0.3g。為優化馬兜鈴總酸的提取條件，可采用正交試驗法，即用正交表安排與分析多種因素試驗，在馬兜鈴總酸的測定中，主要考察提取溶劑的濃度、溶劑的用量以及提取的方法，以馬兜鈴總酸含量為參考指標安排正交試驗：溶劑有濃度2.5%的氨水、濃度5%的氨水、濃度7.5%的氨水三種，溶劑的用量有40mL、50mL、60mL三種，提取的方法有冷浸過夜、超聲提取15min、超聲提取15min×2三種。稱重并補足重量，濾過，取續濾液10mL，以6mol/L的鹽酸調節pH值為2，加乙酸乙酯10mL進行4次萃取，合并有機層并用20mL水洗至中性，回收溶劑，加無水乙醇溶解殘渣，定容至10mL，精密吸取2mL，用無水乙醇定容至5mL。由多次重復試驗的結果分析，以60mL濃度為7.5%的氨水采用冷浸過夜的方法提取的效果最佳，且在馬兜鈴酸總酸含量的影響因素中，提取方法產生的影響較大，差異極為顯著，其次是溶劑的用量，差異較為顯著，而不同濃度的溶劑之間不存在顯著差異。

經過上述試驗分析，對馬兜鈴總酸的最優提取方法，以青木香為例，精密稱定青木香生品粉末，過四號篩，加入60mL濃度為7.5%的氨水，經冷浸過夜，補足重量，取續濾液10mL，以6mol/L的鹽酸調節pH值為2，加10mL乙酸乙酯進行4次萃取，合并有機層并用20mL水洗至中性，回收溶劑，加無水乙醇溶解殘渣，定容至10mL，精密吸取2mL，用無水乙醇定容至5mL。

對各類含馬兜鈴酸類中藥材的樣品測定采用上述最優的提取方法，分別進行提取，并制成供試品溶液，重復測定5次計算出待測藥材中馬兜鈴總酸含量的平均值，以完成精密度試驗；同時進行重復性試驗，驗證方法的重復性是否良好；進行加樣回收率試驗，測出其平均回收率；在第0、2、6、12、24h測定含量的平均值，驗證其穩定性。試驗數據使用SPSS 19.0 軟件進行分析，檢測結果中，不同產地的含馬兜鈴酸類中藥材的馬兜鈴總酸含量為0.164%-0.734%，其中青木香的總酸含量為0.563%，馬兜鈴的總酸含量0.527%，關木通的總酸含量0.734%，遼細辛的總酸含量0.164%。

三、討論

本次試驗采用紫外分光光度法，對不同地區市售的幾種含馬兜鈴酸類中藥材的馬兜鈴總酸含量進行測定，以指導臨床治療中馬兜鈴酸類中藥材的應用。本次測定的藥材包括江蘇等地的青木香、陜西等地的馬兜鈴、吉林等地的關木通、東北等地的遼細辛。測定結果發現，不同產地的含馬兜鈴酸類中藥材的馬兜鈴總酸含量介于0.164%-0.734%之間，其中關木通的總酸含量最高，達到0.734%，遼細辛的總酸含量最低，為0.164%。

紫外分光光度法是一種較為常用的定量測定方法，定量測定時，在最大的吸收波長處，對一定濃度的樣品溶液的吸光度進行測量，并與待測溶液的吸光度進行比較，從而計算出待測溶液的濃度。此外，也可以采用吸收系數法求算。本次試驗所用的紫外分光光度計，是根據待測物質的吸收光譜，對其結構、成分以及物質之間的相互作用進行研究的有效手段。紫外分光光度計的自動化程度較高，應用更加開放靈活，具有較強的兼容性，操作簡單，便于維護，因而具有較高的效率。基于本文所述的方法測定含馬兜鈴酸類中藥材馬兜鈴總酸的含量，能夠迅速得到準確的結果，從而為臨床的應用提供相應的數據參考。

參考文獻

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