孫波 鄒甜 王志偉 吳琪 楊紅波 王興輝 孫小武
摘 要: 利用SSR分子標記技術對‘雪龍三號西瓜品種及其親本間的多態性進行了引物篩選和種子純度研究。結果表明,在供選的23對SSR核心引物中,有2對引物(BVWS02048和BVWS00106)在‘雪龍三號雜交種及其親本的帶型具有多態性。利用這2對引物對‘雪龍三號進行純度鑒定,鑒定結果均為98%,與大田純度檢測結果吻合率達99%,說明SSR分子標記對‘雪龍三號的純度鑒定結果是可靠的。同時2對引物鑒定結果的一致也驗證了品種的真實性。
關鍵詞: 西瓜; DNA提取; SSR標記; 純度鑒定
Abstract: In the study, SSR markers were used to screen polymorphic primers between ‘Xuelong No. 3 watermelon cultivar and their parents, and to identify seed purity of ‘Xuelong No. 3. Results showed that the two (BVWS02048 and BVWS00106) of 23 core SSR primers has be more polymorphic at ‘Xuelong No. 3 hybrids and their parents. Subsequently, the two pairs of primers were used to determine the purity of ‘Xuelong No. 3, and their purification results were 98%, which was up to 99% prediction matches morphological analysis. These results indicated that a purity identification of ‘Xuelong No. 3 using SSR molecular markers is viable. Simultaneously, the uniform results of these two pairs of primers also verified the authenticity of cultivar.
Key words: Watermelon;DNA extraction;SSR markers;Identification of purity
據統計,2016年我國西瓜播種面積189.08萬hm2,總產量7 940萬t[1],在部分地區西瓜產業已成為主導產業。生產上因“假種子”造成損失的現象層出不窮,品種的純度與種子質量密切相關。由于傳統的純度鑒定多以形態標記為主,其檢測周期長且結果易受環境影響。分子標記鑒定可以大幅提升檢測效率,而且鑒定過程由于減少了外界因素干擾,其結果也更加準確。
利用分子標記技術鑒定西瓜品種純度的技術已較為成熟。趙勝杰等[2]利用SRAP技術對生產上主推的9個無籽西瓜品種進行了雜交種純度鑒定;王鳴剛等[3]認為只要反應條件適合、引物選擇正確,RAPD技術完全適用于西瓜雜交種的純度鑒定;而閆鵬等[4]通過對100條RAPD引物的篩選,未能篩到在Tx14E及其親本間具有多態性的RAPD標記;李菊芬等[5]比較了RAPD、ISSR、SSR 3種方法在西瓜雜交種及其親本間的多態性,僅在供試的SSR引物里找到了特異引物,這說明SSR分子標記技術相對于其他分子標記技術具有一定的優越性,在其他農作物如水稻[6]、小麥[7]、玉米[8]、油菜[9]純度鑒定中均有廣泛應用。……